痘苗病毒介导人癌胚抗原的免疫原性实验研究 被引量：2

1

作者 杨洁 江悦华 +4 位作者 罗超权 杨太成 伍新尧 王晓怀 杨英浩 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 1997年第5期283-283,共1页

痘苗病毒介导人癌胚抗原的免疫原性实验研究①杨洁江悦华②罗超权杨太成②伍新尧王晓怀③杨英浩（中山医科大学生化教研室，广州５１００８９）①本课题为广东省卫生厅“九五”五个一工程资助项目②广州军区总医院医学实验科，广州５１... 痘苗病毒介导人癌胚抗原的免疫原性实验研究①杨洁江悦华②罗超权杨太成②伍新尧王晓怀③杨英浩（中山医科大学生化教研室，广州５１００８９）①本课题为广东省卫生厅“九五”五个一工程资助项目②广州军区总医院医学实验科，广州５１００６０③广州军区总医院放射肿瘤科... 展开更多

关键词 痘苗病毒 癌胚抗原 免疫原性 肿瘤疫苗

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抗重组人血管生长素单克隆抗体的制备及鉴定 被引量：9

2

作者 杨太成 江悦华 +2 位作者 冼江 吴锦银 李明 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 1999年第9期412-413,共2页

目的：制备不同类型抗重组人血管生长素（Ｒｅｃｏｍｂｉｎａｎｔｉｏｎ Ｈｕｍａｎ Ａｎｇｉｏｇｅｎｉｎ ，ｒｈＡＮＧ） 的单克隆抗体，为进一步研究抗ｒｈＡＮＧ 抗体对ＡＮＧ 的中和作用以及对ＡＮＧ 依赖型肿瘤的抑瘤实验打下基... 目的：制备不同类型抗重组人血管生长素（Ｒｅｃｏｍｂｉｎａｎｔｉｏｎ Ｈｕｍａｎ Ａｎｇｉｏｇｅｎｉｎ ，ｒｈＡＮＧ） 的单克隆抗体，为进一步研究抗ｒｈＡＮＧ 抗体对ＡＮＧ 的中和作用以及对ＡＮＧ 依赖型肿瘤的抑瘤实验打下基础。方法：利用杂交瘤技术以ｒｈＡＮＧ 免疫Ｂａｌｂｃ小鼠，制备二株（Ｃ６ 、Ｃ４６） 能够稳定分泌抗ｒｈＡＮＧ 抗体的杂交瘤，并对上清进行ＥＬＩＳＡ、双扩散、免疫印迹等鉴定。结果：该抗体类别Ｃ６ 为ＩｇＧ１ ，Ｃ４６ 为ＩｇＭ，并特异地识别ｒｈＡＮＧ 与其它细胞因子及血清蛋白无交叉反应，免疫印迹显示该抗体与分子量１４４ｋＤｒｈＡＮＧ 蛋白结合，不与宿主菌体蛋白反应。结论：经多种方法鉴定获得的二株杂交瘤细胞分泌的抗体为ｒｈＡＮＧ 特异抗体。 展开更多

关键词 单克隆抗体 rhANG 鉴定 制备

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普通级、SPF级SD、Wistar大鼠血液生化常值的测定与比较 被引量：51

3

作者 詹纯列 肖育华 +3 位作者 李新春 杨传红 赖晃文 王捷 《中国比较医学杂志》 CAS 2004年第2期94-96,共3页

目的　测定普通级、SPF级SD大鼠 ,Wistar大鼠血液生化常值并进行比较。方法　日立 715 0全自动生化分析仪自动检测。结果　SPF级与普通级SD大鼠丙氨酸转氨酶、白蛋白、碱性磷酸酶、尿素氮、肌酐、铁、磷、镁、尿酸、低密度脂蛋白、胆汁... 目的　测定普通级、SPF级SD大鼠 ,Wistar大鼠血液生化常值并进行比较。方法　日立 715 0全自动生化分析仪自动检测。结果　SPF级与普通级SD大鼠丙氨酸转氨酶、白蛋白、碱性磷酸酶、尿素氮、肌酐、铁、磷、镁、尿酸、低密度脂蛋白、胆汁酸差异有非常显著性 (P <0 0 1) ;SPF级与普通级Wistar大鼠总蛋白、白蛋白、碱性磷酸酶、总胆固醇、甘油三脂、尿素氮、乳酸脱氢酶、磷、镁、尿酸、高密度脂蛋白、胆汁酸 (P <0 0 1) ,低密度脂蛋白 (P <0 0 5 )差异有非常显著性。结论　不同微生物学环境对SD、Wistar大鼠血液生化常值有较大影响。 展开更多

关键词 普通级 SPF级SD WISTAR 大鼠 生物化学 血液标本

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ELISA法检测单纯疱疹病毒Ⅱ型特异性抗体的临床应用研究 被引量：10

4

作者 杨慧兰 杨军 +4 位作者 刘荣卿 杨太成 王捷 冼江 李建军 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2000年第4期383-384,共2页

目的探讨单纯疱疹病毒Ⅱ型(HSV 2)感染的早期特异检测手段。方法对52例性病门诊的生殖器疱疹患者用改良的ELISA方法进行了HSV gD2IgG检测并同细胞分离方法进行对比观察。结果病毒分离的阳性率为69.2 % ,ELISA法检测抗体的阳性率为65 % ... 目的探讨单纯疱疹病毒Ⅱ型(HSV 2)感染的早期特异检测手段。方法对52例性病门诊的生殖器疱疹患者用改良的ELISA方法进行了HSV gD2IgG检测并同细胞分离方法进行对比观察。结果病毒分离的阳性率为69.2 % ,ELISA法检测抗体的阳性率为65 % ,两种方法检测结果差异无显著性。结论ELISA法检测血清疱疹病毒IgG抗体具有简便 ,快速 ,特异的优点 ,适合于临床大规模检测之用。 展开更多

关键词 单纯疱疹病毒 Ⅱ型 糖蛋白D ELISA

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人癌胚抗原cDNA-重组痘苗病毒接种动物的研究 被引量：4

5

作者 杨洁 赖晃文 +3 位作者 罗超权 杨太成 徐国恒 王晓怀 《中山大学学报（医学科学版）》 CAS CSCD 1997年第S1期46-48,52,共4页

将构建的表达人癌胚抗原（ＣＥＡ）的重组痘苗病毒接种于纯种新西兰兔，在兔血清中测到高水平的ＣＥＡ以及高滴度抗ＣＥＡ抗体，而在兔的非淋巴组织器官中未检测到ＣＥＡ的表达及免疫复合物的沉积，接种后的兔也没有明显的毒副反应，显... 将构建的表达人癌胚抗原（ＣＥＡ）的重组痘苗病毒接种于纯种新西兰兔，在兔血清中测到高水平的ＣＥＡ以及高滴度抗ＣＥＡ抗体，而在兔的非淋巴组织器官中未检测到ＣＥＡ的表达及免疫复合物的沉积，接种后的兔也没有明显的毒副反应，显示痘苗病毒作载体在体内应用是安全可行的。 展开更多

关键词 痘苗病毒 癌胚抗原/治疗应用 抗体生成/免疫学 接种

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bFGF真核表达载体构建及表达 被引量：3

6

作者 张丽君 丁焕文 +4 位作者 王捷 郭勇 杨传红 冼江 郑文岭 《华南理工大学学报（自然科学版）》 EI CAS CSCD 北大核心 2002年第8期20-23,共4页

旨在构建可在哺乳细胞中表达碱性成纤维细胞生长因子 (basicFibroblastGrowthFactor ,简称bFGF)的真核表达载体 ,以便用于研究bFGF基因治疗在骨组织工程中的应用 .应用基因重组技术 ,将已经克隆的bFGF基因从PBR32 2_bFGF载体上亚克隆到... 旨在构建可在哺乳细胞中表达碱性成纤维细胞生长因子 (basicFibroblastGrowthFactor ,简称bFGF)的真核表达载体 ,以便用于研究bFGF基因治疗在骨组织工程中的应用 .应用基因重组技术 ,将已经克隆的bFGF基因从PBR32 2_bFGF载体上亚克隆到真核表达载体 pcDNA3.1上 ,构建的重组质粒经脂质体介导转染 3T3细胞 ,36h后观察瞬时表达情况 .酶切 ,PCR和DNA测序结果均证实了插入片段的正确性 ;免疫组织化学检测bFGF的表达分泌情况 ,结果显示部分经转染的细胞呈阳性 (棕色颗粒 ) .结果表明已成功地构建了bFGF真核表达载体pcDNA3.1_bFGF ,并且bFGF能够在 展开更多

关键词 BFGF基因 真核表达 DNA重组技术 转染

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人骨唾液酸蛋白在巴斯德毕赤酵母中的高效分泌表达 被引量：2

7

作者 董燕 王捷 +2 位作者 杨连生 张宏斌 郑文岭 《华南理工大学学报（自然科学版）》 EI CAS CSCD 北大核心 2003年第1期26-29,共4页

以PCR方法扩增人bsp基因 ,与分泌型表达载体 pPICZαA重组 ,重组质粒经电击转化毕赤酵母GS115菌株 ,获得的GS115 /pPICZαA_hbsp表达菌株能高效分泌表达rhBSP .SDS_PAGE和Westernblot分析结果表明 ,产物的分子质量接近 6 6ku ,能发生特... 以PCR方法扩增人bsp基因 ,与分泌型表达载体 pPICZαA重组 ,重组质粒经电击转化毕赤酵母GS115菌株 ,获得的GS115 /pPICZαA_hbsp表达菌株能高效分泌表达rhBSP .SDS_PAGE和Westernblot分析结果表明 ,产物的分子质量接近 6 6ku ,能发生特异性抗原 展开更多

关键词 人骨唾液酸蛋白 巴斯德毕赤酵母 基因表达 分泌型表达载体 PCR方法 抗原-抗体反应

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高压氧对正常大鼠海马神经元结构的影响 被引量：3

8

作者 刘燕 鲍锦华 +3 位作者 赖晃文 杨传红 冯晓冬 李建军 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2000年第7期664-666,共3页

目的　观察不同高压氧及停止高压氧处置后 2 0d大鼠海马神经元结构的变化。方法　将正常成年大鼠暴露于 2 .5ATA高压氧环境中 ,每日 1次 ,每次给氧 30min× 2 + 10min ,连续 1～ 3个疗程 (10次为1疗程 )。结果　高压氧 1疗程时海马... 目的　观察不同高压氧及停止高压氧处置后 2 0d大鼠海马神经元结构的变化。方法　将正常成年大鼠暴露于 2 .5ATA高压氧环境中 ,每日 1次 ,每次给氧 30min× 2 + 10min ,连续 1～ 3个疗程 (10次为1疗程 )。结果　高压氧 1疗程时海马组织内毛细血管与神经元结构未见明显变化 ,2疗程时部分线粒体稍肿胀 ,3疗程时线粒体进一步肿胀、嵴模糊 ,部分粗面内质网轻度扩张、脱颗粒 ,毛细血管扩张 ,停高压氧处置后 2 0d上述变化恢复正常。高压空气组结构无明显改变。结论　高压氧可引起海马组织毛细血管扩张与神经元超微结构损伤 ,这种变化主要与高氧有关 ,非高气压所致 ,而且是可逆的。 展开更多

关键词 海马 神经元结构 高压氧疗法 大鼠

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木瓜凝乳蛋白酶与5-Fu或MTX对人肝癌细胞7402的细胞毒试验 被引量：3

9

作者 蔡小玲 王捷 +2 位作者 郭勇 杨太成 洗江 《实用医学杂志》 CAS 2004年第1期6-8,共3页

目的 :测定木瓜凝乳蛋白酶及其与 5 氟尿嘧啶 (5 Fu)、氨甲喋呤 (MTX )单独或联合作用对人肝癌细胞740 2的细胞毒性。方法 :采用MTT法 ,不同浓度的酶和药物在不同的培养时间下 ,通过其细胞抑制率和半数抑制率 (IC50 )测定木瓜凝乳蛋... 目的 :测定木瓜凝乳蛋白酶及其与 5 氟尿嘧啶 (5 Fu)、氨甲喋呤 (MTX )单独或联合作用对人肝癌细胞740 2的细胞毒性。方法 :采用MTT法 ,不同浓度的酶和药物在不同的培养时间下 ,通过其细胞抑制率和半数抑制率 (IC50 )测定木瓜凝乳蛋白酶及联合药物的细胞毒性。结果 :木瓜凝乳蛋白酶对 740 2细胞的IC50 约为 12 5 μg/mL ,随浓度增加对细胞的抑制率增加。培养 3 6h时酶对细胞的毒性最大。酶与 5 Fu、MTX联合使用比单独使用效果更好。结论 :木瓜凝乳蛋白酶对人肝癌细胞 740 2具有细胞毒作用 ,酶在培养 3 6h时细胞毒作用最大 ; 展开更多

关键词 木瓜凝乳蛋白酶 5-FU MTX 人肝癌 7402 细胞毒性 试验 癌细胞 5-氟尿嘧啶 氨甲喋呤

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表达人癌胚抗原重组痘苗病毒的构建 被引量：5

10

作者 杨洁 杨太成 +4 位作者 罗超权 王晓怀 杨英浩 江悦华 伍新尧 《中山医科大学学报》 CSCD 1997年第1期9-12,共4页

用痘苗病毒作载体，成功构建了高效表达人癌胚抗原（ＣＥＡ）的ＣＥＡ－重组痘苗病毒，用１４３ＴＫ－细胞作为宿主细胞，表达的蛋白质只在细胞膜上能检测到，而胞质内和细胞上清液中均未能检测到，可见所表达的蛋白质保持了其原有特性... 用痘苗病毒作载体，成功构建了高效表达人癌胚抗原（ＣＥＡ）的ＣＥＡ－重组痘苗病毒，用１４３ＴＫ－细胞作为宿主细胞，表达的蛋白质只在细胞膜上能检测到，而胞质内和细胞上清液中均未能检测到，可见所表达的蛋白质保持了其原有特性，再次证实痘苗病毒是真核表达的有效载体。本结果为进一步研究ＣＥＡ－重组痘苗病毒能否激活机体的免疫系统杀伤表达ＣＥＡ的肿瘤提供了物质基础。 展开更多

关键词 痘苗病毒 癌胚抗原 基因重组 肿瘤 基因治疗

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盆腔炎动物模型的建立 被引量：10

11

作者 唐伟琼 杨日普 +5 位作者 翟桂悦 唐庚云 杨传红 肖育华 冯晓冬 张彦平 《中国比较医学杂志》 CAS 2005年第5期305-307,共3页

目的建立临床盆腔炎的动物模型。方法以健康成年新西兰兔为研究对象将大肠埃希菌接种到输卵管系膜及注射到输卵管,7d后剖腹探查,通过肉眼、光镜及电镜观察炎症形成情况。结果盆腔腹膜和盆腔器官明显充血、水肿、粘连。光镜见明显的炎细... 目的建立临床盆腔炎的动物模型。方法以健康成年新西兰兔为研究对象将大肠埃希菌接种到输卵管系膜及注射到输卵管,7d后剖腹探查,通过肉眼、光镜及电镜观察炎症形成情况。结果盆腔腹膜和盆腔器官明显充血、水肿、粘连。光镜见明显的炎细胞浸润,电镜下细胞核核膜不清,染色体线粒体肿胀。结论3×108cfu/kg大肠埃希菌注射至输卵管可建立典型的盆腔炎动物模型,其重复性强,可用于实验研究。 展开更多

关键词 子宫附件炎 模型 动物

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血管内皮生长因子受体KDR的靶向制剂的制备 被引量：1

12

作者 武婕 张宏斌 +6 位作者 冼江 杨太成 杨传红 王捷 郑文玲 赖晃文 陈惠鹏 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 2003年第2期122-125,共4页

目的 :研究从噬菌体肽库中筛选到的与血管内皮生长因子受体Ⅱ (KDR)有特异结合活性的小肽 ,做为KDR靶向药物的先导物质的应用。方法 :从噬菌体肽库中筛选能特异结合KDR的噬菌体克隆 ,挑选结合力最强的克隆测序并化学合成小肽P5 ,梯度EL... 目的 :研究从噬菌体肽库中筛选到的与血管内皮生长因子受体Ⅱ (KDR)有特异结合活性的小肽 ,做为KDR靶向药物的先导物质的应用。方法 :从噬菌体肽库中筛选能特异结合KDR的噬菌体克隆 ,挑选结合力最强的克隆测序并化学合成小肽P5 ,梯度ELISA、阻断实验和竞争结合实验测定小肽在体外与KDR的结合活性。将P5与生物素 (NHS d Biotin)、BSA化学偶联 ,ELISA法和细胞免疫组化实验检测偶联物与KDR的结合活性。结果 :化学合成的小肽P5在体外能特异结合KDR ,Kd =16 8.6nmol/L ,约是KDR与配体血管内皮生长因子 (VEGF165)亲和力的 1/30 ,P5能阻断VEGF165与KDR的结合活性 ,但不能竞争VEGF165与KDR的结合活性。将P5作为导向物质化学合成的P5 BSA Biotin ,在体外同样具有与KDR和细胞表面KDR分子结合的特性。结论 :化学合成的小肽P5有望作为先导分子 ,在以KDR为靶点的肿瘤靶向治疗中得到应用。 展开更多

关键词 血管内皮生长因子受体 KDR 靶向制剂 制备

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肝纤维化形成过程中Ⅰ型血管紧张素Ⅱ受体表达的研究 被引量：1

13

作者 王卫卫 田野 +3 位作者 赖晃文 杨传红 杨希山 吴平生 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第4期276-278,共3页

目的 :探讨Ⅰ型血管紧张素Ⅱ受体 (AngiotensinⅡType1Receptor,AT1R)在人肝脏组织中的表达情况。方法 :运用免疫组织化学SABC法和间接免疫荧光标记法 ,对 12例正常肝组织及 18例纤维化肝组织进行检测。结果 :AT1R阳性表达主要分布在肝... 目的 :探讨Ⅰ型血管紧张素Ⅱ受体 (AngiotensinⅡType1Receptor,AT1R)在人肝脏组织中的表达情况。方法 :运用免疫组织化学SABC法和间接免疫荧光标记法 ,对 12例正常肝组织及 18例纤维化肝组织进行检测。结果 :AT1R阳性表达主要分布在肝小叶周边及肝窦区星形细胞 (HepaticStellateCell,HSC)的胞浆内。 12例正常肝组织中 8例呈阳性表达 ,18例纤维化肝组织均表达AT1R ,且纤维化组阳性细胞数明显多于正常组 (P <0 0 0 1)。结论 :AT1R在肝星形细胞胞浆中的表达随肝纤维化的发展明显增强 ,并且可能在肝纤维化的发生发展中发挥着一定作用。 展开更多

关键词 肝纤维化 Ⅰ型血管紧张素Ⅱ受体 肝星形细胞

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以血管内皮生长因子受体KDR为靶的肿瘤治疗的研究进展 被引量：1

14

作者 武婕 马文丽 郑文岭 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 2003年第3期214-216,共3页

血管内皮生长因子受体Ⅱ (激酶功能区受体 ,KDR)是介导血管内皮生长因子 (VEGF)在肿瘤新生血管形成中发挥功能的主要受体 ,以KDR为靶 ,通过抑制VEGF与KDR的相互作用来抑制血管生长从而达到治疗肿瘤目的已经成为肿瘤治疗的新途径。本文从... 血管内皮生长因子受体Ⅱ (激酶功能区受体 ,KDR)是介导血管内皮生长因子 (VEGF)在肿瘤新生血管形成中发挥功能的主要受体 ,以KDR为靶 ,通过抑制VEGF与KDR的相互作用来抑制血管生长从而达到治疗肿瘤目的已经成为肿瘤治疗的新途径。本文从抗KDR的单克隆抗体、酪氨酸激酶小分子抑制剂、KDR的小肽抑制剂、核酸抑制物和导向制剂等几个方面综述了以KDR为靶治疗肿瘤的基础和临床现状及研究进展 ,探讨不同各种方法的优势与不足 ,以期在临床实施中选择合适的方法进行KDR靶向的肿瘤治疗。 展开更多

关键词 血管内皮生长因子受体 靶向 肿瘤

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筛选与KDR有结合活性的小肽

15

作者 武婕 陈惠鹏 +2 位作者 张宏斌 王捷 郑文玲 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 2001年第3期201-204,共4页

目的 :从噬菌体 12肽库和环 7肽库中 ,筛选能够与KDR分子有特异结合活性的小肽。方法 :以KDR/IgGFc为靶分子筛选噬菌体 12和环 7肽库 ,经过 3轮筛选和竞争性洗脱后 ,由ELISA、细胞 ELISA和竞争结合实验 ,鉴定阳性噬菌体克隆并测序。结... 目的 :从噬菌体 12肽库和环 7肽库中 ,筛选能够与KDR分子有特异结合活性的小肽。方法 :以KDR/IgGFc为靶分子筛选噬菌体 12和环 7肽库 ,经过 3轮筛选和竞争性洗脱后 ,由ELISA、细胞 ELISA和竞争结合实验 ,鉴定阳性噬菌体克隆并测序。结果 :从 40个噬菌体克隆中得到 12个能特异性与靶分子结合的阳性克隆 ,其中 ,6个噬菌体克隆与靶分子有较强的结合力 ,6个结合力较弱。结论 :测序结果表明 ,12条小肽的一级结构中没有发现共同模式。特异性与KDR结合的活性小肽 ,有望在临床上作为放化疗药物的导向肽 ,以提高药物的选择性和降低其毒副作用。 展开更多

关键词 血管内皮细胞生长因子受体-2 导向药物 肽库 KDR 肿瘤

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鼠疫诊断芯片的探针制备

16

作者 黄海 马文丽 +3 位作者 董兴齐 张宝 王鹏 郑文岭 《中国人兽共患病杂志》 CSCD 北大核心 2004年第5期429-431,434,共4页

目的　探索制备鼠疫诊断芯片特异性探针的新方法。方法　直接采用限制性核酸内切酶Sau3AⅠ消化鼠疫耶尔森菌 3个致病性质粒 ,克隆在T载体上 ,再经巢式PCR扩增制备成打印芯片的探针。结果　该法收集到 2 5 0条探针用于打印芯片 ,分别与... 目的　探索制备鼠疫诊断芯片特异性探针的新方法。方法　直接采用限制性核酸内切酶Sau3AⅠ消化鼠疫耶尔森菌 3个致病性质粒 ,克隆在T载体上 ,再经巢式PCR扩增制备成打印芯片的探针。结果　该法收集到 2 5 0条探针用于打印芯片 ,分别与鼠疫耶尔森菌 ,同属的假结核耶尔森菌和小肠结肠炎耶尔森菌杂交 ,可筛选出杂交信号强阳性的特异点阵。结论　该法简便可行 。 展开更多

关键词 鼠疫耶尔森菌 诊断 基因芯片 探针

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