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RD-PCR技术在酵母基因表达谱研究中的应用 被引量:1
1
作者 刘莉扬 马文丽 +2 位作者 宋艳斌 张宝 郑文岭 《西安医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第3期246-248,261,共4页
目的 应用RD PCR技术分离酵母基因。方法 首先提取酿酒酵母 (Saccharomycescerevisiae)总RNA ,纯化mRNA ;然后 ,反转录成双链cDNA ;再用限制性内切酶Sau3AI酶切 ,在酶切片段上加上接头后 ,用通用引物U进行第一次PCR扩增 ,以这一产物... 目的 应用RD PCR技术分离酵母基因。方法 首先提取酿酒酵母 (Saccharomycescerevisiae)总RNA ,纯化mRNA ;然后 ,反转录成双链cDNA ;再用限制性内切酶Sau3AI酶切 ,在酶切片段上加上接头后 ,用通用引物U进行第一次PCR扩增 ,以这一产物为模板用选择性引物(在通用引物的 3’端延伸两个碱基 )作第二次PCR扩增。 5 %PAGE胶分离基因片段 ,选择单带割胶回收 ,做第三次PCR扩增 ,与载体连接 ,最后进行测序分析。结果 采用这种方法分离得到的基因片段 ,经Blast检索分析 ,确为来自酿酒酵母基因的cDNA片段或表达序列标签 (EST)。结论 RD PCR技术可以有效地分离EST ,可用于酵母基因表达调控的研究。 展开更多
关键词 RD-PCR技术 基因表达谱 酿酒酵母 限制性显示技术 表达序列标签
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基因芯片制作中玻璃介质表面处理对DNA固定率的影响 被引量:1
2
作者 祝骥 马文丽 +2 位作者 李凌 姚汝华 郑文岭 《华南理工大学学报(自然科学版)》 EI CAS CSCD 北大核心 2002年第3期94-97,共4页
用显微镜载玻片作为基因芯片制作中DNA固定介质材料 ,对玻片表面分别进行醛基化、异硫氰酸基化、氨基化等不同修饰处理 ,分析其对DNA固定率的影响 ,并比较了国产与进口玻片处理间的差异 .结果表明 ,异硫氰酸基化处理玻片DNA固定率高于... 用显微镜载玻片作为基因芯片制作中DNA固定介质材料 ,对玻片表面分别进行醛基化、异硫氰酸基化、氨基化等不同修饰处理 ,分析其对DNA固定率的影响 ,并比较了国产与进口玻片处理间的差异 .结果表明 ,异硫氰酸基化处理玻片DNA固定率高于醛基化、氨基化处理 ,接近进口的氨基化玻片 。 展开更多
关键词 基因芯片 玻璃介质 表面处理 固定率 DNA 基因固定 醛基化 异硫氰酸基化
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SH-SY5Y细胞基因片段文库及其数据库的建立 被引量:1
3
作者 张宝 马文丽 +4 位作者 冯前进 吴清华 刘莉扬 石嵘 郑文岭 《西安交通大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2002年第4期333-334,341,共3页
目的 建立SH SY5Y细胞基因片段文库和一种对大量cDNA片段数据管理系统的方法。方法 采用RD PCR技术构建SH SY5Y细胞基因片段文库 ,并对每一个克隆进行测序。应用FOXPRO编制一个软件对其大量的信息进行系统化管理。结果 应用RD PCR技... 目的 建立SH SY5Y细胞基因片段文库和一种对大量cDNA片段数据管理系统的方法。方法 采用RD PCR技术构建SH SY5Y细胞基因片段文库 ,并对每一个克隆进行测序。应用FOXPRO编制一个软件对其大量的信息进行系统化管理。结果 应用RD PCR技术建立了细胞的cDNA片段文库 ,由 12 0 0余个片段克隆组成 ;应用FOXPRO制作了基因片段数据信息管理系统的软件 ,对此文库片段的测序数据进行管理。结论 采用RD PCR技术是一个很好的建立基因片段文库的方法 ;建立了基因片段数据信息管理系统的软件进行这个文库数据的管理。 展开更多
关键词 SH-SY5Y细胞 数据库 FOXPRO 基因片段文库
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B19微小病毒70-mer寡核苷酸探针的设计 被引量:1
4
作者 刘佳 郑文岭 马文丽 《山西医科大学学报》 CAS 2004年第2期104-106,共3页
目的 设计B19微小病毒诊断基因芯片的寡核苷酸探针。方法 以微小病毒B19为例 ,利用BLAST软件对其序列进行比对并获得特异序列 ;利用软件Oligo 6设计特异性高、Tm值接近、长度均一的寡核苷酸探针。 结果 获得 12条 70 mer寡核苷酸探... 目的 设计B19微小病毒诊断基因芯片的寡核苷酸探针。方法 以微小病毒B19为例 ,利用BLAST软件对其序列进行比对并获得特异序列 ;利用软件Oligo 6设计特异性高、Tm值接近、长度均一的寡核苷酸探针。 结果 获得 12条 70 mer寡核苷酸探针 ,用于芯片打印及病毒检测。结论 利用BLAST系统和生物学软件Oligo 展开更多
关键词 BLAST软件 基因芯片 寡核苷酸探针 分子生物学 微小病毒B19
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