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扶正抗癌方抑制人肺癌细胞增殖及增强LAK抑瘤活性的实验研究
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作者 石世德 郑文岭 +3 位作者 杨太成 李任先 周岱翰 冼江 《中山大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2000年第S2期229-233,共5页
研究中药复方制剂扶正抗癌方对人肺癌细胞LA、肺癌原代细胞增殖的影响,探讨其抗癌作用机制.扶正抗癌方灌胃给药后,采集大鼠血清,处理人肺癌细胞LA、人肺癌原代细胞,MTT法观察细胞增殖;并与淋巴因子激活的杀伤细胞(LAK... 研究中药复方制剂扶正抗癌方对人肺癌细胞LA、肺癌原代细胞增殖的影响,探讨其抗癌作用机制.扶正抗癌方灌胃给药后,采集大鼠血清,处理人肺癌细胞LA、人肺癌原代细胞,MTT法观察细胞增殖;并与淋巴因子激活的杀伤细胞(LAK)共同处理以上2种细胞.扶正抗癌方具有显著抑制人肺癌细胞LA、人肺癌原代细胞增殖的作用,且存在不同浓度之间的差异,提示呈现出血清浓度依赖性;可以显著提高LAK抑制人肺癌细胞LA、人肺癌原代细胞增殖的活性抑制人肺癌细胞增殖,提高LAK活性可能是扶正抗癌方抗癌的主要作用机制. 展开更多
关键词 肺癌/中医药疗法 扶正抗癌方/治疗应用 肺癌细胞/人肺癌细胞LA、肺癌原代细胞 血清药理学 大鼠
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芯片杂交中荧光标记样品定量与非定量的比较研究
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作者 冯春琼 马文丽 +5 位作者 李凌 宋艳斌 石嵘 吴清华 郭秋野 郑文岭 《生物技术通报》 CAS CSCD 2002年第6期32-35,共4页
比较在芯片杂交中 ,荧光标记样品定量与非定量对杂交结果的影响。其方法是 ,提取经As2 O3 作用K5 6 2细胞前后的总RNA ,逆转录成cDNA第一链 ,并分别用Cy3/Cy5标记。标记后的样品再次定量或不定量 ,但均取相同体积上样与K5 6 2芯片杂交 ... 比较在芯片杂交中 ,荧光标记样品定量与非定量对杂交结果的影响。其方法是 ,提取经As2 O3 作用K5 6 2细胞前后的总RNA ,逆转录成cDNA第一链 ,并分别用Cy3/Cy5标记。标记后的样品再次定量或不定量 ,但均取相同体积上样与K5 6 2芯片杂交 ,用扫描仪扫描并分析。其结果 ,标记后样品定量与不定量杂交的结果都与理论推测一致 ,但以样品定量进行杂交的效果更好 ,标记样品杂交前再次定量的 ,分析发现 2个基因表达下调 ;杂交前不定量仅取相同体积进行杂交的 ,发现 6个基因片段表达下调 ,其中只有 2个基因与细胞凋亡通路密切相关。认为在芯片的杂交检测中 ,对荧光标记样品杂交前再次定量可大大提高杂交结果的可靠性。 展开更多
关键词 定量 荧光标记 AS2O3 样品 K562细胞 细胞凋亡 表达 杂交 总RNA 基因片段
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细胞凋亡的MTT染色法检测 被引量:23
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作者 冯春琼 马文丽 +3 位作者 宋艳斌 郭秋野 吴清华 郑文岭 《第一军医大学学报》 CSCD 北大核心 2002年第3期262-263,266,共3页
目的研究MTT染色法用于检测细胞凋亡的可行性。方法以As2O3诱导K562细胞建立凋亡细胞模型,并比较以下3种方法检测凋亡的结果。MTT染色法检测、直接在光镜下进行形态学观察以及DNA凝胶电泳。结果MTT染色法可准确判定细胞凋亡,并可清晰分... 目的研究MTT染色法用于检测细胞凋亡的可行性。方法以As2O3诱导K562细胞建立凋亡细胞模型,并比较以下3种方法检测凋亡的结果。MTT染色法检测、直接在光镜下进行形态学观察以及DNA凝胶电泳。结果MTT染色法可准确判定细胞凋亡,并可清晰分辨正常细胞、凋亡细胞和死亡细胞。结论MTT染色法是一种简单、可行的检测细胞凋亡的方法。 展开更多
关键词 细胞凋亡 MTT染色 三氧化二胂 K562细胞
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细胞松弛素B对K562细胞脱核作用的观察 被引量:5
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作者 危敏 马文丽 +4 位作者 毛向明 宋艳斌 张宝 冯春琼 郑文岭 《第一军医大学学报》 CSCD 北大核心 2002年第12期1087-1089,共3页
目的观察细胞松弛素B(cytochalasin B,CB)对K562细胞形态和增殖能力的影响.方法以人红白血病K562细胞为细胞模型,经不同浓度的CB作用不同时间(4~48 h),通过相差显微镜和Giemsa染色观察细胞形态学改变.细胞计数法绘制细胞不同条件下的... 目的观察细胞松弛素B(cytochalasin B,CB)对K562细胞形态和增殖能力的影响.方法以人红白血病K562细胞为细胞模型,经不同浓度的CB作用不同时间(4~48 h),通过相差显微镜和Giemsa染色观察细胞形态学改变.细胞计数法绘制细胞不同条件下的生长曲线.结果细胞形态发生显著变化,处理组细胞出现不同程度的脱核,细胞生长受到显著抑制.结论CB对K562细胞的脱核作用与其浓度呈正相关,随作用时间延长而增强;秋水仙素有显著提高CB诱发细胞脱核的作用;CB对细胞的增殖能力有显著抑制作用. 展开更多
关键词 细胞松弛素 K562细胞 细胞脱核 秋水仙素 细胞增殖 白血病
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As_2O_3处理前后K562细胞基因表达变化的基因芯片检测 被引量:4
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作者 冯春琼 马文丽 +6 位作者 李凌 宋艳斌 石嵘 吴清华 郭秋野 祝骥 郑文岭 《第一军医大学学报》 CSCD 北大核心 2002年第9期772-775,共4页
目的应用基因芯片研究三氧化二砷(As2O3)处理前后K562细胞基因表达的变化。方法提取As2O3处理前后K562细胞的总RNA,纯化为mRNA后再反转录为cDNA。cDNA经限制性内切酶Sau3AI切割后,cDNA片段分别用Cy3和Cy5标记,与自制的包含348个基因... 目的应用基因芯片研究三氧化二砷(As2O3)处理前后K562细胞基因表达的变化。方法提取As2O3处理前后K562细胞的总RNA,纯化为mRNA后再反转录为cDNA。cDNA经限制性内切酶Sau3AI切割后,cDNA片段分别用Cy3和Cy5标记,与自制的包含348个基因片段的胎盘库芯片杂交。结果杂交结果经扫描和软件分析,发现了11个差异表达的基因片段,其中有3个基因片段与细胞凋亡密切相关。结论 我们构建的胎盘库基因芯片可以成功地用于研究药物作用前后基因表达的变化。 展开更多
关键词 基因表达 基因芯片 基因芯片 三氧化二砷 K562细胞 凋亡
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用于HIV诊断的Oligo基因芯片研制 被引量:3
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作者 温颖 马文丽 +4 位作者 李凌 吴清华 徐秋林 张海燕 郑文岭 《第一军医大学学报》 CSCD 北大核心 2005年第3期293-297,共5页
目的研制快速筛查诊断HIV病毒的Oligo芯片。方法以HIV-1B亚型U26942全基因组序列为靶序列,利用DNA Club、Oligo 6.0、BLAST、Alignment等生物信息学软件,设计高度特异、长度均一、具近似熔解温度(Tm)的Oligo 探针,并制备成Oligo芯片。B(... 目的研制快速筛查诊断HIV病毒的Oligo芯片。方法以HIV-1B亚型U26942全基因组序列为靶序列,利用DNA Club、Oligo 6.0、BLAST、Alignment等生物信息学软件,设计高度特异、长度均一、具近似熔解温度(Tm)的Oligo 探针,并制备成Oligo芯片。B(U26942)、C(U46016)、F(AF075703)、G(AF061640)四种亚型质粒分别经RD-梯度PCR与随机特异性引物PCR,经荧光标记后与芯片杂交,扫描芯片后进行统计学分析。结果与结论获得22条60 mer 探针,Oligo芯片特异性、敏感性及稳定性好,为进一步应用提供了条件。 展开更多
关键词 HIV Oligo芯片 RD PCR
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两种氨基修饰的基因芯片表面制备方法比较 被引量:2
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作者 吴清华 马文丽 +4 位作者 王洪敏 毛向明 张宝 李凌 郑文岭 《第一军医大学学报》 CSCD 北大核心 2005年第7期794-798,共5页
目的探讨两种氨基化方法修饰玻片表面的过程及其在基因芯片制备中应用的可行性。方法玻片经清洗、硅烷化后,一种用多组分多氨化合物包被,经次亚苯基二异硫氰酸盐表面活化;另一种方法采用的包被剂是丙烯酸-丙烯酰胺单体,活化剂是碳二亚胺... 目的探讨两种氨基化方法修饰玻片表面的过程及其在基因芯片制备中应用的可行性。方法玻片经清洗、硅烷化后,一种用多组分多氨化合物包被,经次亚苯基二异硫氰酸盐表面活化;另一种方法采用的包被剂是丙烯酸-丙烯酰胺单体,活化剂是碳二亚胺/N-羟基琥珀亚胺酯官能团分子。将被修饰好的玻片用于λ噬菌体基因组DNA芯片的制备,并进行杂交检测分析。结果经两种方法修饰后玻片表面分别形成分支结构和聚合物涂层,与商业化的芯片比较发现,两种芯片杂交、扫描检测后显示所得点阵的杂交信号均匀、稳定、清晰,杂交点饱满、同一性好。结论两种方法修饰的玻片用于制备基因芯片均取得了成功,其中丙烯酸-丙烯酰胺聚合物包被法处理过程简单、成本低廉、能大规模生产,是一种较理想的芯片表面制备方法。 展开更多
关键词 基因芯片 氨基修饰 表而化学 Λ噬菌体
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