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补肾健脾活血方干预过表达DKK1骨细胞对细胞活性及BMP2的影响 被引量：16
1
作者 王凡 黄宏兴 +3 位作者 王吉利 万雷 黄红 柴爽 《中国骨质疏松杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第6期711-714,718,共5页
目的用补肾健脾活血方干预过表达的DKK1腺病毒转染的成骨细胞,通过观察细胞的活性及BMP2的表达,研究补肾健脾活血方治疗骨质疏松的分子生物学机制。方法将培养细胞分成NC对照组,Ad-DKK1组两组。NC对照组由空载腺病毒转染;Ad-DKK-1组由... 目的用补肾健脾活血方干预过表达的DKK1腺病毒转染的成骨细胞,通过观察细胞的活性及BMP2的表达,研究补肾健脾活血方治疗骨质疏松的分子生物学机制。方法将培养细胞分成NC对照组,Ad-DKK1组两组。NC对照组由空载腺病毒转染;Ad-DKK-1组由包装过表达的DKK1腺病毒转染。每组分别用含药血清和空白血清干预。采用CKK-8检测细胞增殖,蛋白印记法检测BMP2的表达。结果各组细胞活性变化:空白血清和含药血清干预均能提高细胞活性。与空白血清分别干预的两组比较,含药血清分别干预后的两组,在24 h,48 h,72 h的细胞活性的增加倍数都较多;在采用蛋白印记法检测后,BMP2在含药血清分别干预的两组的相对表达量较空白血清分别干预的两组的相对表达量高(P<0.01,P<0.01),在NC对照组中含药血清干预与空白血清干预无明显差异。结论补肾健脾活血方含药血清可以提高细胞活性,提高BMP2的相对表达量,有利于成骨细胞的矿化,尤其在过表达DKK1干预后。补肾健脾活血方可能通过调控DKK1进而影响成骨细胞的代谢。 展开更多
关键词 中医中药 骨质疏松症 DKK1 BMP2 补肾健脾活血方
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沉默DKK1、Sost重组腺病毒载体的构建及其对MG63细胞增殖、ALP活性和钙离子浓度影响研究 被引量：11
2
作者 万雷 黄宏兴 +5 位作者 黄红 柴生颋 张志海 魏合伟 王凡 王吉利 《中国骨质疏松杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第11期1361-1369,共9页
目的构建Wnt信号通路抑制因子Dickkopf1(DKK1)、骨硬化蛋白Sclerostin(Sost)基因沉默重组腺病毒载体,观察其对MG63细胞增殖、碱性磷酸酶(ALP)活性和钙离子浓度影响作用。方法设计出特异性针对DKK1、Sost和无关对照序列(Scr),构建DKK1、S... 目的构建Wnt信号通路抑制因子Dickkopf1(DKK1)、骨硬化蛋白Sclerostin(Sost)基因沉默重组腺病毒载体,观察其对MG63细胞增殖、碱性磷酸酶(ALP)活性和钙离子浓度影响作用。方法设计出特异性针对DKK1、Sost和无关对照序列(Scr),构建DKK1、Sost沉默重组腺病毒载体,用q PCR法和蛋白印记(Western blot)法选出沉默效率最好的扩增DKK1、Sost沉默重组腺病毒载体,并用荧光显微镜观察计算病毒滴度。MG63细胞被分成空白对照组、沉默DKK1(Ad-sh DKK1)组、沉默Sost(Ad-sh Sost)组、沉默DKK1+Sost(Ad-sh DKK1+Ad-sh Sost)组4组,分别用优选出的沉默效率最好的sh DKK1和sh Sost腺病毒载体转染MG63细胞,采用四甲基偶氮唑蓝微量酶反应比色法(MTT)检测观察细胞增殖、考马斯亮蓝蛋白定量法测定ALP活性、流式分析法测定钙离子浓度。结果 1DKK1 p Ad-sh DKK1-1和Sost p Ad-GFP-shRNA-2沉默效率最高;2与空白对照组对比,沉默DKK1组、沉默Sost组、沉默DKK1+Sost组的细胞光吸收值(OD)、ALP活性测定值均升高,而钙离子浓度均降低,以沉默DKK1+Sost组变化最明显,组间比较具有统计学差异(P<0.01和P<0.05)。结论 DKK1、Sost沉默可促进MG63细胞增殖、提高ALP活性,降低钙离子浓度,尤以二者同时沉默时的作用最强。 展开更多
关键词 DKK1 SOST 沉默基因 重组腺病毒 MG63细胞
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椎体成形术治疗合并椎体内裂隙样变骨质疏松压缩骨折疗效的观察 被引量：5
3
作者 刘洪江 原超 +2 位作者 张文财 杨晓光 郭星 《中国骨质疏松杂志》 CAS CSCD 2011年第1期35-38,42,共5页
目的观察椎体成形术对治疗合并椎体内裂隙样变骨质疏松(OP)压缩骨折疗效。方法 33例患者分A、B两组,14例合并裂隙样变(积气或积液)的OVCF患者为A组;19例无裂隙样变的为B组,术前常规行X线、患椎CT、MRI检查,双侧穿刺行PVP,比较两组间术... 目的观察椎体成形术对治疗合并椎体内裂隙样变骨质疏松(OP)压缩骨折疗效。方法 33例患者分A、B两组,14例合并裂隙样变(积气或积液)的OVCF患者为A组;19例无裂隙样变的为B组,术前常规行X线、患椎CT、MRI检查,双侧穿刺行PVP,比较两组间术前疼痛,分析两组骨水泥注入量;术后1天、1周、1月局部疼痛缓解;观察两组后凸畸形纠正和骨水泥渗漏情况。结果两组间骨水泥注射量差异无统计学意义(P>0.05)。两组术前VAS值无统计学意义(P>0.05);除术后1 d外,A组VAS值与同期B组相比,A组疼痛缓解较B组差,有统计学意义(P<0.05)。两组后凸畸形矫正角度例数分布无统计学差异(P>0.05)。两组间骨水泥外漏率差异无统计学意义(P>0.05)。两组间骨水泥外漏类型分布差异有统计学意义(P<0.05)。结论合并与否IVC对PVP的疗效有一定影响;PVP纠正后凸畸形对合并与否IVC并无关系;后凸畸形的纠正度数并不能作为术后功能恢复的良好与否的判断标准;椎体内裂隙样变的存在与否对骨水泥外漏的类型有影响。 展开更多
关键词 椎体成形术 椎体内裂隙样变 骨质疏松 压缩骨折
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骨康含药血清对成骨细胞PDGF-AA表达影响的实验研究 被引量：8
4
作者 林一峰 刘庆思 《中国骨质疏松杂志》 CAS CSCD 2006年第5期459-461,共3页
目的观察中药骨康含药血清对新生大鼠成骨细胞血小板衍生生长因子-AA(PDGF-AA)基因表达的调控作用。方法将实验动物随机分成中药组、罗盖全组和蒸馏水组3组,通过体外分离和培养成骨细胞体系,运用逆转录法测定含药血清对成骨细胞PDGF-AA ... 目的观察中药骨康含药血清对新生大鼠成骨细胞血小板衍生生长因子-AA(PDGF-AA)基因表达的调控作用。方法将实验动物随机分成中药组、罗盖全组和蒸馏水组3组,通过体外分离和培养成骨细胞体系,运用逆转录法测定含药血清对成骨细胞PDGF-AA mRNA表达的影响。结果用10%的血清培养成骨细胞第7d时,与空白血清组相比,骨康含药血清组和罗盖全含药血清组对成骨细胞PDGF-AAmRNA表达的平均影响率分别为149·4%和177·7%。结论中药骨康含药血清能明显增强成骨细胞PDGF-AA mRNA的表达。 展开更多
关键词 骨康方 含药血清 成骨细胞 血小板衍生生长因子
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中药骨康治疗绝经后骨质疏松症卫生经济学分析 被引量：1
5
作者 黄宏兴 邓崇礼 +2 位作者 李颖 梁祖建 万雷 《中国骨质疏松杂志》 CAS CSCD 2008年第6期391-395,共5页
目的探讨治疗绝经后骨质疏松症有良好成效比的药物,为卫生资源的合理使用提供理论依据。方法选取符合骨质疏松症诊断标准和排除标准的绝经后骨质疏松症患者95例,随机分为中药骨康治疗组和固邦对照组进行1年的治疗,采用成本-效果分析和成... 目的探讨治疗绝经后骨质疏松症有良好成效比的药物,为卫生资源的合理使用提供理论依据。方法选取符合骨质疏松症诊断标准和排除标准的绝经后骨质疏松症患者95例,随机分为中药骨康治疗组和固邦对照组进行1年的治疗,采用成本-效果分析和成本-效用分析的方法,统计两组治疗期间的门诊、检查及药物治疗的成本,并运用QUALEFFO-41量表分别进行治疗前后的生存质量调查。结果①以生存质量总评分为效果进行成本-效果分析(CEA),治疗组的CEA为:231.00,对照组为:366.15,治疗组的CEA较对照组低。②两组进行成本-效用分析(CUA)治疗组的CUA为:46403.92元/QALY,对照组为:72648.72元/QALY。③进行敏感度分析,治疗组治疗成本提高10%后,治疗组成本-效果比值和成本-效用比值仍比对照组低。结论两组以生存质量总评分为效果进行成本-效果分析,中药骨康比固邦有更佳的成本-效果比。两组都增加患者的质量调整生命年,具有良好的成本-效用比。与固邦相比,中药骨康有更好的成本-效用和成本-效果比。因此,中药骨康能比固邦以更少治疗成本获得更大的效益。 展开更多
关键词 绝经后骨质疏松症 中药骨康 成本-效果分析 成本-效用分析
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基于Wnt信号通路研究骨康方对过表达DKK1大鼠骨形成影响 被引量：6
6
作者 卢义 张文财 +1 位作者 万雷 黄宏兴 《中国骨质疏松杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第3期314-320,361,共8页
目的利用腺病毒过表达技术研究Wnt信号通路抑制因子Dickkopf1(DKK1)在大鼠骨形成中的作用并观察骨康方(补肾健脾活血方)对过表达DKK1转染大鼠骨形成的影响作用。方法选取成年SD大鼠18只,利用过表达DKK1(Ad-DKK1)腺病毒转染其中6只大鼠,... 目的利用腺病毒过表达技术研究Wnt信号通路抑制因子Dickkopf1(DKK1)在大鼠骨形成中的作用并观察骨康方(补肾健脾活血方)对过表达DKK1转染大鼠骨形成的影响作用。方法选取成年SD大鼠18只,利用过表达DKK1(Ad-DKK1)腺病毒转染其中6只大鼠,空载腺病毒(Ad-EV)转染另外6只大鼠,用生理盐水对剩余的6只大鼠进行注射并设为对照组(NC)。转染成功后,每组随机选3只给予骨康方干预,另外3只给予等体积生理盐水,观察大鼠骨密度、Wnt信号通路相关因子DKK1,LRP6,β-catenin,APC,RUNX2,OPG表达量的变化。结果腺病毒成功转染大鼠,Ad-DKK1转染组DKK1表达量明显高于Ad-EV组及NC组,Ad-DKK1组骨密度低于Ad-EV组及NC组(P<0.05);②中药干预后,Ad-DKK1组、Ad-EV组、NC组大鼠骨密度升高,Wnt信号通路抑制因子DKK1、APC表达量降低,Wnt信号通路成骨相关因子LRP6,β-catenin, RUNX2,OPG表达量升高(P<0.05)。结论①过表达DKK1可导致大鼠股骨骨密度降低;②骨康方干预后,大鼠股骨骨密度升高,LRP6,β-catenin, RUNX2,OPG表达量增加, DKK1、APC表达量降低。 展开更多
关键词 中医中药 骨形成 WNT通路 Wnt信号通路相关因子DKK1 骨康方
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XCT-790对沉默DKK1、Sost腺病毒载体转染MG63细胞中OPG、CTGF、FGF2、TNFα的影响研究 被引量：3
7
作者 李钊政 万雷 +3 位作者 乔荣勤 彭鹏豪 肖本浩 刘少津 《中国骨质疏松杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第7期841-845,共5页
目的研究ERRα抑制剂(XCT-790)对沉默Wnt信号通路抑制因子Dickkopf1(DKK1)、骨硬化蛋白Sclerostin(Sost)重组腺病毒载体转染MG63细胞中OPG、CTGF、FGF2、TNFα的影响。方法本实验将培养好的MG63细胞分为空白对照组、沉默DKK1组、沉默Sos... 目的研究ERRα抑制剂(XCT-790)对沉默Wnt信号通路抑制因子Dickkopf1(DKK1)、骨硬化蛋白Sclerostin(Sost)重组腺病毒载体转染MG63细胞中OPG、CTGF、FGF2、TNFα的影响。方法本实验将培养好的MG63细胞分为空白对照组、沉默DKK1组、沉默Sost组、沉默(DKK1+Sost)组、XCT-790处理空载腺病毒组、XCT-790处理沉默DKK1组、XCT-790处理沉默Sost组、XCT-790处理沉默(DKK1+Sost)组,根据组别不同分别用包装好的沉默DKK1、Sost腺病毒载体转染MG63细胞,应用Western blot检测MG63细胞中OPG、CTGF、FGF2、TNFα蛋白的表达量。结果 (1)与空白对照组对比,沉默DKK1、Sost、DKK1+Sost可以提高OPG、CTGF、FGF2表达量(P<0.05),降低TNFα表达量(P<0.05);XCT-790干预MG63细胞可降低OPG、CTGF、FGF2表达量(P<0.05),增加TNFα表达量(P<0.05);(2)与沉默DKK1、Sost、DKK1+Sost组比较,XCT-790处理沉默DKK1、Sost、DKK1+Sost组可降低因沉默DKK1、Sost、DKK1+Sost而增加OPG、CTGF、FGF2的表达量的作用(P<0.05),增加因沉默DKK1、Sost、DKK1+Sost而降低TNFα的表达量(P<0.05)。结论 XCT-790可以降低MG63细胞中OPG、CTGF、FGF2表达量,升高TNFα表达量;还可以调节因沉默DKK1、Sost、DKK1+Sost而改变的MG63细胞中OPG、CTGF、FGF2及TNFα的表达量。 展开更多
关键词 XCT-790 Dickkopf1 SOST MG63细胞
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补肾健脾中药复方对去势大鼠骨骼肌线粒体通透转孔调控的研究 被引量：3
8
作者 李颖 吴伙燕 +1 位作者 黄宏兴 白波 《中国骨质疏松杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第12期1131-1134,共4页
目的探讨补肾健脾中药复方干预去势大鼠骨骼肌线粒体通透转孔的影响。方法 48只6月龄的雌性SD大鼠随机分为空白组、模型组、中药组、西药组。治疗12周后收集左侧股骨、股直肌分别行骨矿含量、骨密度测量,同时进行骨骼肌线粒体通透转换... 目的探讨补肾健脾中药复方干预去势大鼠骨骼肌线粒体通透转孔的影响。方法 48只6月龄的雌性SD大鼠随机分为空白组、模型组、中药组、西药组。治疗12周后收集左侧股骨、股直肌分别行骨矿含量、骨密度测量,同时进行骨骼肌线粒体通透转换孔的检测。结果最后纳入研究的动物40只。模型组的骨密度值和骨矿含量均低于空白组,其差异有统计学意义(P<0.05);中药组和西药组的骨密度值均高于模型组,其差异有统计学意义(P<0.05)。在骨骼肌线粒体通透转换孔方面,空白组的OD比值均相应高于模型组的OD比值,其差异有统计学意义(P<0.05)。经过药物干预后,观察组的OD比值与对照组的OD比值均相应低于同一时间点的模型组OD比值,其差异有统计学意义(P<0.05)。结论补肾健脾中药复方对去势大鼠有明显的治疗作用,能明显提高骨密度;而且能在一定程度抑制骨骼肌细胞的凋亡。 展开更多
关键词 去势大鼠 中药复方 线粒体通透转换孔 骨骼肌
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