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Rac1-siRNA表达质粒的构建及Rac1对SW480细胞单克隆形成的影响
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作者 南清振 高蕾 +2 位作者 肖冰 张振书 姜泊 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第6期1339-1342,共4页
目的构建针对Rac1的siRNA表达载体,并观察其对大肠癌SW480细胞中Rac1蛋白表达的抑制作用,同时研究Rac1蛋白表达抑制后细胞在体外软琼脂糖中单克隆形成情况。方法化学合成用于产生针对Rac1的发卡状RNA的寡核苷酸,各64个碱基,退火后插入... 目的构建针对Rac1的siRNA表达载体,并观察其对大肠癌SW480细胞中Rac1蛋白表达的抑制作用,同时研究Rac1蛋白表达抑制后细胞在体外软琼脂糖中单克隆形成情况。方法化学合成用于产生针对Rac1的发卡状RNA的寡核苷酸,各64个碱基,退火后插入线性化的pSUPER载体的H1启动子下游。重组载体经限制性酶切和测序。把构建的载体转染大肠癌细胞系SW480,观察其对Rac1蛋白表达的干扰作用,软琼脂糖体外克隆形成实验研究SW480抑制Rac1蛋白表达后的效果。结果限制性酶切和序列测定表明成功构建了可以表达针对Rac1的发卡状RNA表达载体,该载体表达的发卡状RNA在SW480细胞中能够有效的下调Rac1蛋白的表达。体外软琼脂单克隆形成实验显示,抑制Rac1蛋白表达后,形成的单克隆数目明显减少,直径也明显缩小。结论成功构建了针对Rac1的发卡状RNA表达载体;体外软琼脂单克隆实验表明Rac1蛋白对SW480细胞克隆形成数目及大小有明显影响,说明Rac1蛋白在大肠癌的体外生长过程中具有重要作用。 展开更多
关键词 RAC1 RNA干扰 软琼脂单克隆形成 SW480细胞
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检测X线照射肝癌细胞株HepG2可溶性肿瘤坏死因子受体-p75的临床意义
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作者 高蕾 陈龙华 +2 位作者 戴九龙 南清振 白岚 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第4期714-716,共3页
目的研究X线照射在体外培养人肝癌细胞株HepG2后sTNFR-p75变化情况。方法ELISA法检测培养上清中sTNFR-p75水平,流式细胞仪分析细胞凋亡率,光镜及透射电镜观察细胞形态变化。结果X线照射后肝癌HepG2细胞培养上清sTNFR-p75水平显著低于照... 目的研究X线照射在体外培养人肝癌细胞株HepG2后sTNFR-p75变化情况。方法ELISA法检测培养上清中sTNFR-p75水平,流式细胞仪分析细胞凋亡率,光镜及透射电镜观察细胞形态变化。结果X线照射后肝癌HepG2细胞培养上清sTNFR-p75水平显著低于照射前sTNFR-p75水平(P<0.01);光镜及透射电镜发现细胞体积缩小,变圆,胞浆浓缩,核固缩深染凋亡小体形成;流式细胞仪分析细胞凋亡率显著增高(P<0.05)。结论X线可通过抑制sTNFR-p75脱落到上清中,诱导细胞凋亡,增强照射肿瘤的杀伤作用。 展开更多
关键词 X线 肝癌 肿瘤坏死因子受体 细胞凋亡
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复方苦参注射液对鼻咽癌CNE-2细胞的放射增敏作用 被引量:3
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作者 郑剑霄 詹文婷 +4 位作者 周晓春 孔怡琳 高蕾 李工 王苏美 《吉林大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2019年第6期1384-1388,I0020,共6页
目的:观察复方苦参注射液对人鼻咽癌CNE-2细胞放射敏感性的影响,并探讨其作用机制。方法:常规体外培养人鼻咽癌CNE-2细胞,采用四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测不同浓度复方苦参注射液分别处理CNE-2细胞24、48和72 h后时细胞增殖抑制率,计算... 目的:观察复方苦参注射液对人鼻咽癌CNE-2细胞放射敏感性的影响,并探讨其作用机制。方法:常规体外培养人鼻咽癌CNE-2细胞,采用四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测不同浓度复方苦参注射液分别处理CNE-2细胞24、48和72 h后时细胞增殖抑制率,计算复方苦参注射液对CNE-2细胞的半数抑制浓度(IC 50)。CNE-2细胞分为对照组(不照射、不给药)、放射组(给予剂量为2和4 GyX射线照射)和联合组(给予不同浓度复方苦参注射液处理后再接受X射线照射)。MTT法检测各组CNE-2细胞增殖抑制率,流式细胞术检测各组CNE-2细胞凋亡率,克隆形成试验检测各组CNE-2细胞存活率。结果:不同浓度复方苦参注射液处理CNE-2细胞24、48和72 h后,细胞增殖抑制率较未经复方苦参注射液处理的CNE-2细胞升高(P<0.05),且呈剂量依赖性;复方苦参注射液处理48 h时细胞增殖抑制率高于24 h时(P<0.05)。放射组CNE-2细胞凋亡率高于对照组(P<0.05),联合组CNE-2细胞凋亡率较放射组升高(P<0.05);联合组CNE-2细胞存活率低于放射组(P<0.05)。结论:复方苦参注射液能促进放射线诱导的鼻咽癌CNE-2细胞凋亡,从而对CNE-2细胞具有放射增敏作用。 展开更多
关键词 复方苦参注射液 细胞凋亡 放射增敏 鼻咽肿瘤
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