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大鼠骨髓间充质干细胞的分离培养及CM-Dil标记的脑内示踪
被引量：
10
1
作者
陈朝
黎奔
郭建文
《解放军医学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2010年第8期946-949,953,共5页
目的建立大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)的分离和培养方法 ,并探讨采用氯甲基苯甲酰胺(CM-Dil)对BMSCs进行体外标记和体内示踪的可行性。方法全骨髓贴壁法分离获取BMSCs,收集第3代细胞,流式细胞术检测CD34、CD44和CD29的表达率。加入CM-Di...
目的建立大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)的分离和培养方法 ,并探讨采用氯甲基苯甲酰胺(CM-Dil)对BMSCs进行体外标记和体内示踪的可行性。方法全骨髓贴壁法分离获取BMSCs,收集第3代细胞,流式细胞术检测CD34、CD44和CD29的表达率。加入CM-Dil对BMSCs进行体外标记,荧光倒置显微镜下观察24h、21d和30d时的标记情况,通过描绘生长曲线明确CM-Dil对体外培养BMSCs生长特性的影响。制作局灶性脑缺血大鼠模型,将CM-Dil标记的BMSCs立体定向移植至大脑纹状体区,于移植后7、14、21d取脑组织制备冰冻切片,荧光显微镜下观察标记细胞在脑内的存活及分布情况。结果 BMSCs贴壁培养至第3代后呈成纤维细胞样,形态均一、排列有序,CD34、CD44和CD29表达率分别为1.71%、80.32%和84.89%。体外CM-Dil标记24h的BMSCs发出红色荧光,标记率为100%;21d后,经传代培养的BMSCs荧光强度与24h时点相近,但30d后荧光有所淬灭。标记后细胞的生长、增殖特性未受影响,形态无改变。脑组织冰冻切片发现移植的BMSCs在7、14、21d时主要位于针道附近,并向周围扩散,数量逐渐减少,呈椭圆形或不规则形。结论通过贴壁培养可以从大鼠骨髓中分离培养出较纯的BMSCs。CM-Dil染色简单、有效、无细胞毒性,体外标记BMSCs的最长时限为21d,可作为BMSCs脑内定向移植的体内示踪方法 。
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关键词
骨髓
间质干细胞移植
脑缺血
氯甲基苯甲酰胺
荧光染料
在线阅读
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职称材料
三甲胺-N-氧化物在动脉粥样硬化发病机制中的研究进展
被引量：
12
2
作者
何花花
连新福
唐智群
《中南大学学报（医学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2017年第8期986-990,共5页
肠道菌群的代谢产物三甲胺-N-氧化物(trimethylamine-N-oxide,TMAO)是一种新发现的心血管疾病的危险因子。肠道菌群利用食物中的胆碱和左旋肉碱转化为三甲胺(trimethylamine,TMA),三甲胺在肝酶中氧化为TMAO,降低TMA可以刺激巨噬细胞逆...
肠道菌群的代谢产物三甲胺-N-氧化物(trimethylamine-N-oxide,TMAO)是一种新发现的心血管疾病的危险因子。肠道菌群利用食物中的胆碱和左旋肉碱转化为三甲胺(trimethylamine,TMA),三甲胺在肝酶中氧化为TMAO,降低TMA可以刺激巨噬细胞逆向转运胆固醇和抑制动脉粥样硬化形成。TMAO生成素单加氧酶3(flavin-containing monooxygenase 3,FMO3)是胆固醇代谢和胆固醇逆向转运的工具,降低FMO3可以减缓胆囊分泌胆汁,延缓肠道对胆固醇的吸收,并限制合成氧化型胆固醇和胆固醇酯。血液中TMAO可上调巨噬细胞内的清道夫受体,促使巨噬细胞内胆固醇累积和泡沫细胞的形成,进而促进血管斑块的形成并通过MAPK和细胞核因子κB通路促进血管炎性反应。TMAO集中作用于影响胆固醇代谢、胰岛素抵抗、促进血小板高聚集、增加血栓形成、促进血管炎症反应及直接导致动脉斑块形成等方面。降低TMAO水平可以潜在的预防或治疗动脉粥样硬化相关疾病,降低心脑血管疾病发病率。TMA/FMO3/TMAO通路是调节脂质代谢和炎症的主要通路。
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关键词
肠道菌群
三甲胺-N-氧化物
动脉粥样硬化
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职称材料
题名
大鼠骨髓间充质干细胞的分离培养及CM-Dil标记的脑内示踪
被引量：
10
1
作者
陈朝
黎奔
郭建文
机构
广州中医药大学
第二
临床
医学院
药剂科
广州中医药大学第二临床医学院神经内科
出处
《解放军医学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2010年第8期946-949,953,共5页
基金
广东省自然科学基金(06301402)
教育部博士点基金(20070572004)
同济大学"中医大师传承人才培养项目"(国中医药函[2008]185号)
文摘
目的建立大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)的分离和培养方法 ,并探讨采用氯甲基苯甲酰胺(CM-Dil)对BMSCs进行体外标记和体内示踪的可行性。方法全骨髓贴壁法分离获取BMSCs,收集第3代细胞,流式细胞术检测CD34、CD44和CD29的表达率。加入CM-Dil对BMSCs进行体外标记,荧光倒置显微镜下观察24h、21d和30d时的标记情况,通过描绘生长曲线明确CM-Dil对体外培养BMSCs生长特性的影响。制作局灶性脑缺血大鼠模型,将CM-Dil标记的BMSCs立体定向移植至大脑纹状体区,于移植后7、14、21d取脑组织制备冰冻切片,荧光显微镜下观察标记细胞在脑内的存活及分布情况。结果 BMSCs贴壁培养至第3代后呈成纤维细胞样,形态均一、排列有序,CD34、CD44和CD29表达率分别为1.71%、80.32%和84.89%。体外CM-Dil标记24h的BMSCs发出红色荧光,标记率为100%;21d后,经传代培养的BMSCs荧光强度与24h时点相近,但30d后荧光有所淬灭。标记后细胞的生长、增殖特性未受影响,形态无改变。脑组织冰冻切片发现移植的BMSCs在7、14、21d时主要位于针道附近,并向周围扩散,数量逐渐减少,呈椭圆形或不规则形。结论通过贴壁培养可以从大鼠骨髓中分离培养出较纯的BMSCs。CM-Dil染色简单、有效、无细胞毒性,体外标记BMSCs的最长时限为21d,可作为BMSCs脑内定向移植的体内示踪方法 。
关键词
骨髓
间质干细胞移植
脑缺血
氯甲基苯甲酰胺
荧光染料
Keywords
bone marrow
mesenchymal stem cell transplantation
brain ischemia
3
3＇-dioactadecyl-5
5＇-di（4-sulfophenyl）oxacarbocyanine
fluorescent dyes
分类号
R457.7 [医药卫生—治疗学]
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职称材料
题名
三甲胺-N-氧化物在动脉粥样硬化发病机制中的研究进展
被引量：
12
2
作者
何花花
连新福
唐智群
机构
广州中医药大学第二临床医学院神经内科
广东省
中医
院珠海医院
神经
内科
四川
大学
华西口腔医院特诊科
出处
《中南大学学报（医学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2017年第8期986-990,共5页
文摘
肠道菌群的代谢产物三甲胺-N-氧化物(trimethylamine-N-oxide,TMAO)是一种新发现的心血管疾病的危险因子。肠道菌群利用食物中的胆碱和左旋肉碱转化为三甲胺(trimethylamine,TMA),三甲胺在肝酶中氧化为TMAO,降低TMA可以刺激巨噬细胞逆向转运胆固醇和抑制动脉粥样硬化形成。TMAO生成素单加氧酶3(flavin-containing monooxygenase 3,FMO3)是胆固醇代谢和胆固醇逆向转运的工具,降低FMO3可以减缓胆囊分泌胆汁,延缓肠道对胆固醇的吸收,并限制合成氧化型胆固醇和胆固醇酯。血液中TMAO可上调巨噬细胞内的清道夫受体,促使巨噬细胞内胆固醇累积和泡沫细胞的形成,进而促进血管斑块的形成并通过MAPK和细胞核因子κB通路促进血管炎性反应。TMAO集中作用于影响胆固醇代谢、胰岛素抵抗、促进血小板高聚集、增加血栓形成、促进血管炎症反应及直接导致动脉斑块形成等方面。降低TMAO水平可以潜在的预防或治疗动脉粥样硬化相关疾病,降低心脑血管疾病发病率。TMA/FMO3/TMAO通路是调节脂质代谢和炎症的主要通路。
关键词
肠道菌群
三甲胺-N-氧化物
动脉粥样硬化
Keywords
intestinal flora trimethylamine-N-oxide atherosclerosis
分类号
R543.5 [医药卫生—心血管疾病]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
大鼠骨髓间充质干细胞的分离培养及CM-Dil标记的脑内示踪
陈朝
黎奔
郭建文
《解放军医学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2010
10
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职称材料
2
三甲胺-N-氧化物在动脉粥样硬化发病机制中的研究进展
何花花
连新福
唐智群
《中南大学学报（医学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2017
12
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