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醋柴胡多糖的分离纯化及协同抗肝癌活性的研究 被引量:4
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作者 刘志芬 王小双 +4 位作者 李苹 吴亚运 刘丽娟 赵瑞芝 赵亚 《天然产物研究与开发》 北大核心 2025年第1期40-51,共12页
对醋柴胡多糖(polysaccharide from vinegar-baked Bupleuri Radix,VBRBP)进行分离纯化,初步分析其结构特征并探究其联合化疗药的协同抗肝癌活性。通过水提醇沉、膜分离及纤维素层析从醋柴胡中分离纯化得到醋柴胡均一多糖,采用高效凝胶... 对醋柴胡多糖(polysaccharide from vinegar-baked Bupleuri Radix,VBRBP)进行分离纯化,初步分析其结构特征并探究其联合化疗药的协同抗肝癌活性。通过水提醇沉、膜分离及纤维素层析从醋柴胡中分离纯化得到醋柴胡均一多糖,采用高效凝胶渗透色谱法、PMP柱前衍生化法、傅里叶变换红外光谱、气质联用和核磁共振波谱等方法对醋柴胡均一多糖进行结构鉴定,并测定其联合不同化疗药物对HepG2和Huh7两种肝癌细胞株的增殖抑制作用。结果表明,经过分离纯化得到的醋柴胡均一多糖5-1(polysaccharide 5-1 from vinegar-baked Bupleuri Radix,VBRBP5-1)是一种中性多糖,相对分子量为30.78 kDa,由甘露糖、半乳糖醛酸、葡萄糖、半乳糖和阿拉伯糖组成,摩尔比为1.96∶2.38∶58.48∶22.85∶14.32;主链是由1-α-D-葡萄糖、1,6-α-D-葡萄糖、1,4,6-α-D-葡萄糖、1,4-α-D-葡萄糖、1,3,6-β-D-半乳糖残基构成,支链主要含有1-β-D-半乳糖、1,4-β-D-半乳糖和1-α-L-阿拉伯糖、1,3,5-α-L-阿拉伯糖、1,5-α-L-阿拉伯糖残基片段。VBRBP5-1能增强10-羟基喜树碱、甲氨蝶呤和顺铂对肝癌细胞的抑制率,显示出协同增效作用,其中对顺铂的协同增效作用在两种肝癌细胞中均优于其他抗肿瘤药物。本研究解析了VBRBP5-1的结构并探索了其协同抗肝癌活性,为醋柴胡多糖的构效关系阐释及后续深入开发和利用提供参考。 展开更多
关键词 醋柴胡 均一多糖 结构表征 协同抗肝癌
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山柰酚通过Met/PI3K/Akt/mTOR通路诱导非小细胞肺癌NCI-H1650细胞发生自噬进而影响其增殖 被引量:6
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作者 朱志明 周绮纯 +7 位作者 王娟娟 邓芷茵 唐青 吴万垠 王晰 万信良 莫瀚丹 王苏美 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第11期965-972,共8页
目的:探讨山柰酚诱导人非小细胞肺癌(NSCLC)NCI-H1650细胞发生自噬及其机制。方法:常规培养NCI-H1650细胞,用不同浓度山柰酚处理细胞,用CCK-8法、MTT法以及EdU法检测山柰酚对NCI-H1650细胞增殖能力的影响,用自噬双标记腺病毒mCherry-EGF... 目的:探讨山柰酚诱导人非小细胞肺癌(NSCLC)NCI-H1650细胞发生自噬及其机制。方法:常规培养NCI-H1650细胞,用不同浓度山柰酚处理细胞,用CCK-8法、MTT法以及EdU法检测山柰酚对NCI-H1650细胞增殖能力的影响,用自噬双标记腺病毒mCherry-EGFR-LC3感染实验检测山柰酚对NCI-H1650细胞发生自噬的影响,用WB法检测山柰酚处理后NCI-H1650细胞中自噬相关蛋白及Met/PI3K/Akt/mTOR信号通路相关蛋白的表达,用qPCR法检测山柰酚处理后NCI-H1650细胞中Met mRNA的表达。采用荧光素酶标记A549-luc细胞建立裸鼠移植瘤模型后用山柰酚进行处理,用活体动物成像技术观察移植瘤生长情况,用WB法检测移植瘤组织中自噬相关蛋白以及Met/PI3K/Akt/mTOR信号通路相关蛋白的表达。结果:山柰酚能显著抑制NCI-H1650细胞的增殖能力(P<0.05),山柰酚处理后NCI-H1650细胞内的自噬小体数量明显增加(P<0.05)、自噬标志蛋白LC3B和beclin1表达均明显上调(均P<0.05)、P62表达明显下调(P<0.05),山柰酚可明显抑制NCI-H1650细胞中Met mRNA和蛋白的表达(均P<0.05)、抑制p-PI3K p85、PI3K p85、p-Akt和p-mTOR蛋白表达(均P<0.05)。山柰酚抑制A549细胞裸鼠移植瘤的生长(P<0.05)和影响其体内自噬、Met/PI3K/Akt/mTOR通路相关蛋白的表达(均P<0.05)。结论:山柰酚通过影响Met/PI3K/Akt/mTOR通路诱导NSCLC NCI-H1650细胞发生自噬,进而抑制其增殖能力。 展开更多
关键词 山柰酚 非小细胞肺癌 NCI-H1650细胞 A549细胞 细胞自噬 Met/PI3K/Akt/mTOR通路 增殖
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