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毛叶芋兰不同组织qRT-PCR内参基因选择与验证 被引量:1
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作者 池珈仪 刘舒璇 +2 位作者 向思诗 詹若挺 何瑞 《热带作物学报》 北大核心 2025年第1期35-43,共9页
毛叶芋兰(Nervilia plicata)是一种珍稀南药,目前对其有效成分及其分子调控机理鲜有报道。实时荧光定量PCR(real-time quantitative PCR,qRT-PCR)在植物基因表达分析中得到了广泛应用,但在毛叶芋兰中缺少研究,限制了相关工作的开展。在... 毛叶芋兰(Nervilia plicata)是一种珍稀南药,目前对其有效成分及其分子调控机理鲜有报道。实时荧光定量PCR(real-time quantitative PCR,qRT-PCR)在植物基因表达分析中得到了广泛应用,但在毛叶芋兰中缺少研究,限制了相关工作的开展。在前期工作基础上,本研究从毛叶芋兰转录组数据库中筛选出Actin、GAPDH、TUA、UBC、UBQ、EF-1α、EF-1β、CYP、RPL共9个常见管家基因,以毛叶芋兰叶片、叶柄和球茎3个组织部位为材料,开展qRT-PCR内参基因的筛选工作。经过9个基因在不同组织的表达水平、稳定性和综合分析,筛选出最适合的内参基因,并选择毛叶芋兰花青素合成途径关键基因NpDFR、Np3GT进行验证。结果发现:EF-1α和CYP的表达稳定性相近,整体稳定性最好。2个内参基因单独或共同使用时,NpDFR、Np3GT在不同组织的表达情况与转录组测序结果基本一致,表明其均可用作qRT-PCR的内参基因。本研究结果为进一步开展毛叶芋兰药效相关基因的分子作用机理研究提供依据。 展开更多
关键词 毛叶芋兰 内参基因 实时荧光定量PCR 表达稳定性
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长叶香茶菜乙醇提取物的化学成分
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作者 赵双双 萧晓吉 +4 位作者 古敬锋 刘靖 詹若挺 刘军民 刘子琪 《植物资源与环境学报》 北大核心 2025年第4期117-120,共4页
为进一步探究长叶香茶菜[Isodon walkeri(Arn.) H. Hara]的化学成分,采用多种技术对长叶香茶菜乙醇提取物的石油醚和乙酸乙酯部分的化学成分进行了分离纯化和结构鉴定。共分离鉴定出10个化合物,分别为豆甾醇、阿魏酸二十二烷基酯、macro... 为进一步探究长叶香茶菜[Isodon walkeri(Arn.) H. Hara]的化学成分,采用多种技术对长叶香茶菜乙醇提取物的石油醚和乙酸乙酯部分的化学成分进行了分离纯化和结构鉴定。共分离鉴定出10个化合物,分别为豆甾醇、阿魏酸二十二烷基酯、macrophynin E、6,12,15-三羟基-5,8,11,13-松香四烯-7-酮、β-胡萝卜苷、熊果酸、蓟黄素、迷迭香酸、咖啡酸、牡荆素。这些化合物均首次从长叶香茶菜中分离获得,并且,阿魏酸二十二烷基酯首次从香茶菜属[Isodon(Benth.) Kudo]中分离获得。 展开更多
关键词 长叶香茶菜 化学成分 分离纯化 结构鉴定
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林下套种及不同种植密度对广藿香生长、生理特性及品质的影响
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作者 包韵滋 钟文轩 +6 位作者 冯丽琼 陈梓倩 赖志明 倪燕妹 王丽平 詹若挺 陈立凯 《广东农业科学》 2025年第3期43-53,共11页
【目的】研究林下套种及不同种植密度对广藿香生长、生理特性和品质的影响,为优化广藿香生态种植提供理论依据。【方法】建立广藿香-澳洲坚果套种种植模式,设置单作对照组(CK:4株/m^(2),行株距50 cm×50 cm)和林下套作试验组。在套... 【目的】研究林下套种及不同种植密度对广藿香生长、生理特性和品质的影响,为优化广藿香生态种植提供理论依据。【方法】建立广藿香-澳洲坚果套种种植模式,设置单作对照组(CK:4株/m^(2),行株距50 cm×50 cm)和林下套作试验组。在套种试验组中,设计梯度密度试验:XT1(4株/m^(2),行株距50 cm×50 cm)、XT2(5株/m^(2),行株距50 cm×50 cm,“品”字型种植)和XT3(6.67株/m^(2),行株距30 cm×50 cm)。测定广藿香移栽生长180 d的鲜质量、干质量、茎粗、株高等生长指标;测定超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化物酶(POD)、过氧化氢酶(CAT)活性和丙二醛(MDA)含量;利用GC-MS测定广藿香醇含量,HPLC测定广藿香酮含量,并通过水蒸气蒸馏法测定广藿香挥发油得率。【结果】与CK相比,套种后XT1、XT2和XT3处理的广藿香地上部鲜质量、干质量和一级分枝数分别显著增加38.03%、23.96%和58.82%。随着种植密度的增加,广藿香鲜质量和干质量呈先降低后增加的趋势。林下套种和种植密度的增加均显著提高广藿香CAT和SOD活性,同时MDA含量分别显著降低64.35%、76.97%和76.47%。林下套种对广藿香醇含量无显著影响,但广藿香酮含量显著增加18.56%。与XT1相比,XT2和XT3处理后广藿香酮含量和广藿香挥发油得率均显著降低。相关性分析表明,广藿香单株鲜质量、干质量与一级分枝数呈正相关;广藿香醇含量与株高、茎粗呈正相关;广藿香酮含量与茎粗呈正相关。主成分分析显示,广藿香与澳洲坚果林下套种模式的得分顺序为:XT1>CK>XT2>XT3。【结论】林下套种及不同种植密度对广藿香的生长、生理特性和品质有重要影响。与澳洲坚果套种并保持4株/m^(2)、行株距50 cm×50 cm的种植密度,可获得优质高产的广藿香。 展开更多
关键词 广藿香 林下套种 种植密度 农艺性状 抗氧化酶活性 广藿香醇
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吴茱萸果实和叶挥发油成分的GC-MS分析
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作者 杨秋燕 彭苑霞 +2 位作者 陆华强 尹丽 曹亮启 《广东蚕业》 2024年第11期10-13,共4页
为探索吴茱萸果实和叶的挥发油成分,挖掘其挥发油的利用价值,文章采用水蒸气蒸馏法提取吴茱萸果实和叶的挥发油,通过气相色谱-质谱联用技术(GC-MS)对挥发油进行定性分析,采用面积归一化法对各化合物进行相对定量分析。分析结果显示,从... 为探索吴茱萸果实和叶的挥发油成分,挖掘其挥发油的利用价值,文章采用水蒸气蒸馏法提取吴茱萸果实和叶的挥发油,通过气相色谱-质谱联用技术(GC-MS)对挥发油进行定性分析,采用面积归一化法对各化合物进行相对定量分析。分析结果显示,从吴茱萸果实和叶的挥发油中鉴定到共同的化合物一共18种,其中具有显著药理作用的芳樟醇(果实5.59%,叶0.26%)、橙花叔醇(果实0.66%,叶2.83%)、β-榄香烯(果实6.89%,叶1.45%)在果实和叶挥发油中的相对含量差异较大。研究结果为吴茱萸不同部位挥发油的进一步合理开发利用提供参考依据。 展开更多
关键词 吴茱萸 果实 挥发油 GC-MS
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一种阳春砂新栽培类型的鉴定 被引量:7
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作者 蒋烨 苏景 +4 位作者 汤丽云 徐杰 陈汝平 邓汝荣 何国振 《广西植物》 CSCD 北大核心 2017年第5期554-564,共11页
该研究对3个阳春砂栽培类型长果、圆果、仲华,海南砂和1个疑似阳春砂新栽培类型锦秋进行了植物学性状观察、RAPD分子鉴定,并测定了各砂仁种质的活性成分。结果表明:锦秋叶缘具有双边波状和单边波状两种现象,表现出处于长果、圆果与海南... 该研究对3个阳春砂栽培类型长果、圆果、仲华,海南砂和1个疑似阳春砂新栽培类型锦秋进行了植物学性状观察、RAPD分子鉴定,并测定了各砂仁种质的活性成分。结果表明:锦秋叶缘具有双边波状和单边波状两种现象,表现出处于长果、圆果与海南砂之间;锦秋叶舌的长度和开花物候期也介于海南砂和长果、圆果之间;果实的性状方面比较复杂,锦秋果实呈胖圆状与圆果、海南砂相似,不同于长果和仲华的长圆形;果实黑褐色,不同于长果、圆果的红色而与仲华和海南砂相近;果刺尖锐状与长果、圆果和仲华的相似,不同于海南砂的平钝形果刺。锦秋与仲华除果实形状外的生物学性状指标都相似。从91个引物中随机筛选出3个多态性丰富的引物,多态性比率为91.2%,显示该物种遗传变异较高;各个样品间的相似系数在0.235 3~0.970 6之间,说明五种砂仁种质是有差别的;聚类分析显示样品可分为3类,海南砂聚为一大类;长果、圆果、仲华和锦秋聚为另一大类,该大类中的长果和圆果聚为一小类,仲华和锦秋聚为另一小类。聚类分析结果表明,锦秋是不同于已知三种栽培类型的阳春砂新栽培类型。锦秋种子千粒重最大、挥发油含量最高,但其乙酸龙脑酯含量与其它砂仁种质无差异。 展开更多
关键词 锦秋 阳春砂 种质 鉴定 生物学性状 RAPD
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蜜远志配方颗粒质量标准的研究 被引量:2
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作者 潘杰 甘杰华 +3 位作者 郑晓英 张辉 严萍 詹若挺 《中成药》 CAS CSCD 北大核心 2017年第4期751-755,共5页
目的建立蜜远志配方颗粒(蜜远志)的质量标准。方法 TLC法定性鉴别细叶远志皂苷和远志口山酮Ⅲ,HPLC法定量测定细叶远志皂苷、远志口山酮Ⅲ、3,6’-二芥子酰基蔗糖含有量。结果 TLC斑点清晰,分离度好。细叶远志皂苷、远志口山酮Ⅲ、3,6’... 目的建立蜜远志配方颗粒(蜜远志)的质量标准。方法 TLC法定性鉴别细叶远志皂苷和远志口山酮Ⅲ,HPLC法定量测定细叶远志皂苷、远志口山酮Ⅲ、3,6’-二芥子酰基蔗糖含有量。结果 TLC斑点清晰,分离度好。细叶远志皂苷、远志口山酮Ⅲ、3,6’-二芥子酰基蔗糖分别在0.010 2~1.023 9 mg/mL(R^2=0.999 1)、0.004 0~0.495 6 mg/mL(R^2=0.999 3)、0.005 0~0.545 2 mg/mL(R^2=0.999 3)范围内呈良好的线性关系,平均加样回收率分别为101.29%、97.61%、102.73%,RSD分别为1.99%、0.90%、1.57%。结论该方法稳定可行,可用于蜜远志配方颗粒的质量控制。 展开更多
关键词 蜜远志配方颗粒 细叶远志皂苷 远志口山酮Ⅲ 3 6’-二芥子酰基蔗糖 TLC HPLC
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青天葵EBP1基因原核表达载体的构建 被引量:2
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作者 黄琼林 何瑞 +1 位作者 詹若挺 陈蔚文 《安徽农业科学》 CAS 2012年第16期8852-8854,8964,共4页
[目的]构建青天葵器官大小调控基因——Erb3结合蛋白(Erb3-binding protein,EBP1)编码基因的原核表达载体,以期为通过原核表达体系鉴定该基因的功能奠定基础。[方法]将引入酶切位点的NfEBP1基因的PCR产物及表达载体pET-28、pET-16b分别... [目的]构建青天葵器官大小调控基因——Erb3结合蛋白(Erb3-binding protein,EBP1)编码基因的原核表达载体,以期为通过原核表达体系鉴定该基因的功能奠定基础。[方法]将引入酶切位点的NfEBP1基因的PCR产物及表达载体pET-28、pET-16b分别进行双酶切,之后连接相应的酶切产物,热击转化到E.coli Top10细胞,通过菌落PCR、测序和酶切筛选阳性重组子。将确认的阳性重组子质粒转化至E.coli BL21表达宿主菌,并对其进行双酶切验证。[结果]构建了重组表达质粒pET-28-NfEBP1-1188和pET-16-NfEBP1-1188,其转化E.coli BL21表达宿主细胞后,分别获得含有2个载体的工程菌。[结论]该研究成功构建了青天葵EBP1基因的原核表达载体,为后续通过原核表达体系鉴定该基因的功能奠定了基础。 展开更多
关键词 青天葵 Erb3结合蛋白 原核表达载体
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不同来源威灵仙常春藤皂苷元和齐墩果酸的含量测定 被引量:3
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作者 李璐 林文华 +2 位作者 严萍 詹若挺 潘华峰 《安徽农业科学》 CAS 2013年第7期2910-2911,2940,共3页
[目的]测定不同来源威灵仙药材中常春藤皂苷元和齐墩果酸的含量。[方法]采用反相高效液相色潽法,色谱条件为:色谱柱为Waters XbridgeTM-C18(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为乙腈-水(90∶10,V/V),体积流量为1 ml/min,检测波长为205 nm... [目的]测定不同来源威灵仙药材中常春藤皂苷元和齐墩果酸的含量。[方法]采用反相高效液相色潽法,色谱条件为:色谱柱为Waters XbridgeTM-C18(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为乙腈-水(90∶10,V/V),体积流量为1 ml/min,检测波长为205 nm,柱温为25℃。[结果]计算得常春藤皂苷元的回归方程为Y=7×106X-429 884,R2=0.999 8,齐墩果酸的回归方程为Y=8×106X-94 259,R2=0.999 1,表明常春藤皂苷元在2.008~25.100 ng/ml范围内,齐墩果酸在2.238~22.380 ng/ml浓度范围内与峰面积有良好的线性关系。不同来源的威灵仙药材齐墩果酸含量基本大于0.3%;来源于两广的威灵仙品种粉灵仙中常春藤皂苷元含量较高,其他来源的威灵仙药材中常春藤皂苷元含量极低。[结论]该方法简单、准确、稳定,可用于威灵仙药材质量评价;不同来源的威灵仙药材在含量上存在较大差异,其中来源于两广的粉灵仙含量较高。 展开更多
关键词 威灵仙(RADIX ET RHIZOMA CLEMATIDIS) 常春藤皂苷元 齐墩果酸 含量测定
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