中药种质资源生物化学的学科探讨 被引量：5

1

作者 陈蔚文 徐晖 +5 位作者 詹若挺 杨锦芬 何瑞 刘嘉炜 严萍 马新业 《世界科学技术-中医药现代化》 北大核心 2014年第4期704-709,共6页

中药种质资源生物化学是现代科学技术迅速发展并不断向中药资源学渗透而产生的一门二级交叉学科,指利用生物化学及分子生物学、化学等技术手段,系统研究中药基原物种种质(简称:中药种质)的遗传变异、基因转录、蛋白表达与物质代谢,阐明... 中药种质资源生物化学是现代科学技术迅速发展并不断向中药资源学渗透而产生的一门二级交叉学科,指利用生物化学及分子生物学、化学等技术手段,系统研究中药基原物种种质(简称:中药种质)的遗传变异、基因转录、蛋白表达与物质代谢,阐明中药种质特征及其形成的分子调控机制,旨在为中药种质鉴别、优化,中药及药效活性成分的生产提供生物化学理论知识基础。本文就中药种质资源生物化学学科产生的时代背景、概念、意义、定位、研究内容等进行了论述,冀求广大同仁的共鸣与探讨。 展开更多

关键词 中药种质资源 生物化学 交叉学科

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溪黄草DNA条形码鉴定研究 被引量：4

2

作者 张慧晔 刘锋 +3 位作者 王德勤 詹若挺 马新业 陈蔚文 《世界科学技术-中医药现代化》 北大核心 2014年第7期1487-1490,共4页

目的:研究DNA条形码技术在溪黄草药材品种鉴定中的适用性。方法:选取rbcL、psbA-trnH、matK和ITS2等4个条形码标记,对41份溪黄草药材样品(含溪黄草Rabdosia serra、线纹香茶菜R.lophanthoides和纤花香茶菜R.lophanthoides var.gracilifl... 目的:研究DNA条形码技术在溪黄草药材品种鉴定中的适用性。方法:选取rbcL、psbA-trnH、matK和ITS2等4个条形码标记,对41份溪黄草药材样品(含溪黄草Rabdosia serra、线纹香茶菜R.lophanthoides和纤花香茶菜R.lophanthoides var.graciliflora)进行DNA提取、PCR扩增及双向测序,对测序结果进行质量检查、人工校对和序列拼接获取标准碱基序列信息,通过比较序列获得成功率以及物种鉴定力(TaxonGap法),筛选适合溪黄草基原鉴定的DNA条形码序列。结果:条形码序列获得成功率依次为rbcL(100%)、psbA-trnH(90.2%)、ITS2(87.8%)和matK(70.7%);物种鉴定力方面,rbcL、psbA-trnH和ITS2等3条序列均可有效鉴定不同物种,但不适于分辨种下单位。结论:综合考察序列易得性和物种鉴定力,rbcL可作为溪黄草品种鉴定的首选条形码。 展开更多

关键词 溪黄草 DNA条形码 RBCL 鉴定

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丁公藤扦插繁殖与组织培养研究 被引量：1

3

作者 杨锦芬 刘卉 +2 位作者 张月明 詹若挺 陈蔚文 《广东农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2012年第16期29-32,F0002,共5页

为了建立丁公藤扦插繁殖和组织培养方法,设计正交实验,考察插枝长度、插枝浸润和浇灌的生根液浓度对丁公藤扦插存活及出芽的影响,考察不同种类和浓度的植物激素以及来源于不同叶位的外植体对丁公藤愈伤组织诱导的影响。根据正交试验结果... 为了建立丁公藤扦插繁殖和组织培养方法,设计正交实验,考察插枝长度、插枝浸润和浇灌的生根液浓度对丁公藤扦插存活及出芽的影响,考察不同种类和浓度的植物激素以及来源于不同叶位的外植体对丁公藤愈伤组织诱导的影响。根据正交试验结果,丁公藤扦插繁殖的最优条件组合为:扦插前浸润生根液浓度为15%、插枝长度为10～12 cm、扦插后浇灌生根液浓度为0.1%,扦插后第43 d的最高存活率和出芽率分别达到87.5%和50%;诱导愈伤组织的最优培养基为MS+0.25 mg/L 2,4-D+1.0 mg/L6-BA+0.5 mg/L NAA+2 g/L Na2S2O3,室内培养的扦插苗第2位叶为诱导愈伤组织的最适外植体,诱导率最高达94.44%。建立了丁公藤扦插繁殖和愈伤组织诱导方法,为通过人工快繁缓解丁公藤资源紧缺提供了基础。 展开更多

关键词 丁公藤 扦插繁殖 组织培养 愈伤组织 正交试验

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基于psbA-trnH序列的鳞毛蕨属贯众药材基原植物的鉴定研究 被引量：1

4

作者 刘锋 蒋研风羊 +2 位作者 詹若挺 马新业 陈蔚文 《世界科学技术-中医药现代化》 北大核心 2014年第7期1482-1486,共5页

目的:研究psbA-trnH序列在近缘贯众基原物种鉴定中的有效性。方法:对常见鳞毛蕨属贯众基原物种psbA-trnH序列进行PCR扩增及测序,原始峰图通过CodonCode Aligner软件查看、拼接和校对,并根据GenBank注释截取标准条形码数据。利用TaxonGa... 目的:研究psbA-trnH序列在近缘贯众基原物种鉴定中的有效性。方法:对常见鳞毛蕨属贯众基原物种psbA-trnH序列进行PCR扩增及测序,原始峰图通过CodonCode Aligner软件查看、拼接和校对,并根据GenBank注释截取标准条形码数据。利用TaxonGap方法在实验物种范围(9物种19样品)和扩大范围(17物种44样品)内评估该序列的鉴定效率。结果:物种鉴定范围扩大后psbA-trnH序列鉴定成功率由100%(9/9)降至82.4%(14/17),种内异质性数值高于种间可分离性的比例,由11.1%(1/9)上升为52.9%(9/17)。结论:psbA-trnH序列可作为整体贯众同名异物品种鉴定的推荐条形码,实际应用中需注意种内采样代表性的问题。 展开更多

关键词 贯众 鳞毛蕨属 DNA条形码 PSBA-TRNH

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岗梅转录组及其乌索烷型三萜皂苷生物合成相关酶基因的发掘 被引量：11

5

作者 郑夏生 罗秀秀 +2 位作者 徐晖 詹若挺 陈蔚文 《世界科学技术-中医药现代化》 北大核心 2014年第7期1505-1512,共8页

目的:发掘与岗梅乌索烷型三萜皂苷生物合成相关的酶基因。方法:利用Illumina测序平台对岗梅根进行转录组测序,通过基因注释、同源分析、系统发生分析等生物信息学手段,发掘可能参与合成的单基因簇(Unigenes)。结果:在岗梅根转录组中发现... 目的:发掘与岗梅乌索烷型三萜皂苷生物合成相关的酶基因。方法:利用Illumina测序平台对岗梅根进行转录组测序,通过基因注释、同源分析、系统发生分析等生物信息学手段,发掘可能参与合成的单基因簇(Unigenes)。结果:在岗梅根转录组中发现了272条与萜类生物合成相关的Unigenes。这其中包括72条可能参与萜类生物合成上游途径的Unigenes,以及26条可能与三萜合成途径下游母核合成、氧化和糖基化相关的Unigenes。对其中部分Unigenes进行系统发生分析,进一步揭示了这些Unigenes与同源基因间的进化关系。利用酵母表达系统,鉴定了两个香树酯醇合酶IaAS1和IaAS2,其中IaAS1为少数以α-香树脂醇为主要产物的香树酯醇合酶之一。结论:本文从岗梅根转录组数据库中发掘到一系列可能与岗梅乌索烷型三萜皂苷生物合成相关的酶基因。对这些基因的进一步研究,有助于从分子水平揭示岗梅中乌索烷型三萜皂苷的生物合成途径。 展开更多

关键词 岗梅 转录组 三萜皂苷 生物合成 基因发掘

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药用植物青天葵的悬浮培养条件优化 被引量：5

6

作者 张晓丽 梁凌玲 +1 位作者 詹若挺 何瑞 《广东农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2012年第16期32-35,共4页

以悬浮细胞干重增加率、酶活力为考察指标,研究不同培养基、光照条件、蔗糖浓度、培养基pH值对药用植物青天葵细胞生长的影响,对青天葵悬浮细胞培养方法进行条件优化。结果表明,1/4MS和1/2MS培养物外观形态最佳,1/2MS组培养物干重增加... 以悬浮细胞干重增加率、酶活力为考察指标,研究不同培养基、光照条件、蔗糖浓度、培养基pH值对药用植物青天葵细胞生长的影响,对青天葵悬浮细胞培养方法进行条件优化。结果表明,1/4MS和1/2MS培养物外观形态最佳,1/2MS组培养物干重增加率最大,MDA含量最低,POD含量最高;暗培养条件有利于愈伤组织干重的增加;蔗糖浓度为1%时愈伤组织干重增加率显著高于其他处理组,pH6.0为青天葵悬浮培养的合适pH值,培养基中添加MES可明显提高干重增加率。 展开更多

关键词 青天葵 悬浮培养 组织培养

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加速老化对穿心莲种子萌发活力的影响 被引量：2

7

作者 童家赟 戴洁 何瑞 《广东农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2012年第14期20-21,28,共3页

考察了室温和低温贮藏2年的穿心莲种子经41℃、100%R.H.条件下加速老化1~7 d后的萌发活力和萌发过程中幼苗生长量的变化,结果表明：室温贮藏种子的发芽率为0;低温贮藏种子发芽率为93.5%,且老化1~2 d后萌发活力未见显著变化,老化3~4 d后... 考察了室温和低温贮藏2年的穿心莲种子经41℃、100%R.H.条件下加速老化1~7 d后的萌发活力和萌发过程中幼苗生长量的变化,结果表明：室温贮藏种子的发芽率为0;低温贮藏种子发芽率为93.5%,且老化1~2 d后萌发活力未见显著变化,老化3~4 d后则加速了萌发,老化5~7 d萌发活力和幼苗株高显著下降。因此,低温贮藏是实际可行的方法,对穿心莲种子批进行活力检测时需要老化5 d以上。 展开更多

关键词 穿心莲 种子活力 加速老化 贮藏

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两种桃金娘科不同属植物叶挥发油成分GC-MS分析及其抗肺癌A549、H460细胞增殖活性 被引量：1

8

作者 李武国 苏乔 +9 位作者 魏洁书 梁绮文 刘翠婷 朱烨妍 赵广银 李雯雯 黄浩机 李文英 曹伟杰 詹若挺 《食品工业科技》 CAS CSCD 北大核心 2018年第15期260-265,273,共7页

为了比较分析莲雾叶、白千层叶挥发油成分的异同,并研究其对人肺癌A549、H460细胞增殖活性的影响,本研究利用水蒸气蒸馏法提取莲雾叶、白千层叶挥发油成分,以气相色谱-质谱联用(GC-MS)法比较分析其化学成分,采用MTT法评价其对人肺癌A549... 为了比较分析莲雾叶、白千层叶挥发油成分的异同,并研究其对人肺癌A549、H460细胞增殖活性的影响,本研究利用水蒸气蒸馏法提取莲雾叶、白千层叶挥发油成分,以气相色谱-质谱联用(GC-MS)法比较分析其化学成分,采用MTT法评价其对人肺癌A549、H460细胞增殖活性的影响。GC-MS分析结果显示,从莲雾叶挥发油中分离鉴定了38种化合物,主要成分为石竹烯、à-芹子烯、β-桉叶烯、(+)-δ-杜松烯和蓝桉醇等;从白千层叶挥发油中分离鉴定了28种化合物,主要成分为桉树脑、(1)-2,6,6-三甲基双环[3.1.1]庚-2-烯、α-松油醇、D-柠檬烯和表蓝桉醇等;两种挥发油含有13种共有化合物,其保留时间基本一致,相对含量相差0.3~27倍;两种挥发油中含量较高的五种化合物的结构、相对含量均不相同。MTT法测试结果表明,作用24 h后,莲雾叶挥发油在浓度为40 mg/L时,对人肺癌细胞A549的细胞增殖能力产生显著的抑制作用(p<0.05),在浓度为60 mg/L时,对人肺癌细胞H460的细胞增殖能力产生极显著的抑制作用(p<0.001),并呈剂量依赖性,抑制作用随着浓度的增大而增强,其IC50值分别为49.99、65.70 mg/L;白千层叶挥发油对人肺癌A549、H460细胞均无明显生长抑制作用(p>0.05)。综上所述,莲雾、白千层同属于桃金娘科,但其干燥叶挥发油所含化合物种类及相对含量以及对人肺癌细胞A549、H460的细胞增殖能力所产生的影响均不相同。 展开更多

关键词 莲雾 白千层 挥发油 气相色谱-质谱联用法 肺癌

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基于rbcL条形码的鸡血藤真伪鉴别 被引量：6

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作者 黄琼林 马新业 +1 位作者 詹若挺 陈蔚文 《江苏农业科学》 北大核心 2016年第6期57-60,共4页

为了建立鸡血藤基于rbcL基因的DNA条形码鉴别体系,为其资源保护和用药安全提供分子依据,采用商业试剂盒提取鸡血藤样品的基因组DNA,以及rbcL通用引物进行PCR扩增和测序;并从GenBank数据库获取鸡血藤混伪品的rbcL基因序列。采用DNAMAN、C... 为了建立鸡血藤基于rbcL基因的DNA条形码鉴别体系,为其资源保护和用药安全提供分子依据,采用商业试剂盒提取鸡血藤样品的基因组DNA,以及rbcL通用引物进行PCR扩增和测序;并从GenBank数据库获取鸡血藤混伪品的rbcL基因序列。采用DNAMAN、Clustal X软件进行序列比对分析,MEGA 5.1软件构建系统发生树。结果表明:获取的鸡血藤及其混伪品rbcL序列均为498 bp,GC含量分布在40.0%~44.4%间,存在64处变异,种间遗传距离远远大于种内遗传距离。基于rbcL基因的系统发生树能很好地区分鸡血藤及其混伪品。因此,rbcL基因可用作鸡血藤及其混伪品鉴别的DNA序列。 展开更多

关键词 鸡血藤 rbcL条形码 鉴别 混伪品

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青天葵独脚金内酯信号转导关键基因D14的克隆与亚细胞定位分析 被引量：3

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作者 李炎坤 卓一南 +1 位作者 曾湘达 何瑞 《热带作物学报》 CSCD 北大核心 2019年第3期504-513,共10页

D14基因是独脚金内酯信号转导途径的关键基因,其编码的蛋白能够使SLs释放出活性小分子物质而发挥调节腋芽起始的功能。本研究根据其他物种的D14基因从青天葵转录组数据中筛选获得2条高度同源的片段,命名为NfD14a和NfD14b。应用RT-PCR和R... D14基因是独脚金内酯信号转导途径的关键基因,其编码的蛋白能够使SLs释放出活性小分子物质而发挥调节腋芽起始的功能。本研究根据其他物种的D14基因从青天葵转录组数据中筛选获得2条高度同源的片段,命名为NfD14a和NfD14b。应用RT-PCR和RACE技术,克隆获得NfD14a和NfD14b的cDNA全长序列,GenBank登录号分别为MH028026、MH028027。NfD14a基因全长1206 bp,ORF为861 bp,编码286个氨基酸;NfD14b基因全长1082 bp,ORF为813bp,编码270个氨基酸。对NfD14的编码蛋白序列进行了生物信息学分析,结果表明:NfD14a和NfD14b均属于a/b折叠蛋白水解酶超家族成员(Abhydrolase superfamily),但系统进化分析结果表明两者同源性不高。利用一步快速克隆的方法构建了植物表达载体35S::NfD14a-EGFP和35S::NfD14b-EGFP,并分别获得其工程菌。瞬时表达结果表明,NfD14a和NfD14b均定位在烟草原生质体的细胞核和细胞质。本研究通过对NfD14基因全长cDNA序列的克隆与亚细胞定位分析,为青天葵独脚金内酯信号转导途径调控植物分枝生长发育机制的研究奠定基础。 展开更多

关键词 青天葵 独脚金内酯 D14 RACE克隆

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基于植物代谢组学和网络药理学分析预测鸡骨草药材的质量标志物 被引量：7

11

作者 徐月阳 史军杰 +3 位作者 彭丽华 方碧烟 陈炜璇 成金乐 《世界科学技术-中医药现代化》 CSCD 北大核心 2023年第6期1972-1986,共15页

目的基于植物代谢组学分析鸡骨草药材的次生代谢产物,并结合多元统计学和网络药理学预测分析鸡骨草药材的质量标志物(Q-Marker)。方法建立UPLC-Q-TOF-MS分析方法,分析11批次鸡骨草药材的化学成分,确定其共有成分。通过聚类分析(HCA)、... 目的基于植物代谢组学分析鸡骨草药材的次生代谢产物,并结合多元统计学和网络药理学预测分析鸡骨草药材的质量标志物(Q-Marker)。方法建立UPLC-Q-TOF-MS分析方法,分析11批次鸡骨草药材的化学成分,确定其共有成分。通过聚类分析(HCA)、主成分分析(PCA)和偏最小二乘判别分析(OPLS-DA)确认造成11批次鸡骨草药材分类的主要差异成分,再运用网络药理学构建“核心成分-核心靶点-核心通路”网络,筛选预测鸡骨草药材的潜在Q-Marker,并进行分子对接验证其活性。结果11批次鸡骨草药材中含有39个共有成分,主要为三萜皂苷类、黄酮类、生物碱类等。经聚类分析和主成分分析显示11批次鸡骨草药材分为4类,后经偏最小二乘判别分析发现其中9个化学成分在分类中起重要作用。网络药理学分析结果表明,以上9个成分为活性成分,作用于166个靶点,通过蛋白质互作(PPI)筛选得到29个核心靶点,其中4个化学成分相思子碱、下箴刺桐碱、大豆皂苷Ⅰ、精氨酸与核心靶点的关联度高,结合QMarker理念及分子对接结果,初步预测相思子碱和下箴刺桐碱为鸡骨草药材的Q-Marker。结论利用植物代谢组学结合多元统计学和网络药理学预测分析鸡骨草药材的Q-Marker,为鸡骨草药材的质量控制与评价提供数据参考,为进一步科学开发鸡骨草药材提供研究思路。 展开更多

关键词 鸡骨草药材 质量标志物 植物代谢组学 网络药理学 相思子碱 下箴刺桐碱

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