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低浓度β-淀粉样蛋白抑制小鼠视网膜色素上皮细胞P-糖蛋白的功能性表达 被引量:1
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作者 张跃红 饶志波 +2 位作者 刘娟 唐浩英 卢敏 《眼科新进展》 CAS 北大核心 2015年第9期801-805,共5页
目的探讨低浓度β淀粉样蛋白(amyloidβ-protein,Aβ)对原代培养小鼠视网膜色素上皮(retinal pigment epithelium,RPE)细胞P-糖蛋白(P-glycoprotein,P-gp)表达和活性的影响。方法应用0.3μmol·L-1Aβ1-42处理RPE细胞4 h、8 h、12 h... 目的探讨低浓度β淀粉样蛋白(amyloidβ-protein,Aβ)对原代培养小鼠视网膜色素上皮(retinal pigment epithelium,RPE)细胞P-糖蛋白(P-glycoprotein,P-gp)表达和活性的影响。方法应用0.3μmol·L-1Aβ1-42处理RPE细胞4 h、8 h、12 h和24 h后,采用实时定量real-time PCR和Western blotting检测P-gp在基因和蛋白水平的表达;分别在细胞培养液中加入孕烯醇酮X受体原形配体16-α-氰基孕烯诺龙(pregnenolone 16-alpha-carbonitrile,PCN)和P-gp特异性抑制剂PSC833后,孵育罗丹明123,然后用流式细胞仪检测各组细胞内罗丹明123的荧光强度来验证Aβ1-42对RPE细胞P-gp活性的影响。结果Aβ1-42处理细胞4 h、8 h、12 h和24 h后mdr1表达量分别减至空白对照组的(71.25±8.35)%(P>0.05)、(61.38±7.37)%(P<0.05)、(47.51±8.97)%(P<0.01)和(41.23±9.06)%(P<0.01);P-gp表达量在4个时间点分别减至空白对照组的(81.71±5.27)%(P>0.05)、(53.64±4.58)%(P<0.05)、(51.29±6.02)%(P<0.05)和(49.82±7.24)%(P<0.05)。罗丹明123积蓄实验结果显示,应用PCN后,细胞内罗丹明123的荧光强度随着时间延长而减少,而应用PSC833后,细胞内罗丹明123的荧光强度随着时间延长而增加。结论低浓度Aβ1-42处理小鼠RPE细胞,可抑制P-gp的表达与活性。P-gp可能是干预早期年龄相关性黄斑变性中Aβ清除的潜在靶点。 展开更多
关键词 β淀粉样蛋白 P-糖蛋白 视网膜色素上皮 年龄相关性黄斑变性
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