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一种神经元体外缺氧诱导凋亡模型的建立
被引量:
6
1
作者
臧林泉
苏兴文
+2 位作者
邱鹏新
伍宇平
颜光美
《中国病理生理杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2007年第6期1244-1245,1248,共3页
目的:在不改变细胞生长环境条件下,建立一种体外培养大鼠皮层神经元缺氧诱导细胞凋亡模型。方法:取新生鼠培养第8d的皮层神经元,采用不改变原培养基成分,将细胞置于缺氧环境(密闭容器内,抽取成真空并维持30min,然后充95%N2、5%CO2)中分...
目的:在不改变细胞生长环境条件下,建立一种体外培养大鼠皮层神经元缺氧诱导细胞凋亡模型。方法:取新生鼠培养第8d的皮层神经元,采用不改变原培养基成分,将细胞置于缺氧环境(密闭容器内,抽取成真空并维持30min,然后充95%N2、5%CO2)中分别培养0.5、1.0、2.0、4.0、8.0、12.0和24h后,于不同时间取出,Hochest33258神经元核染色观察凋亡小体及凋亡细胞核,抽提DNA琼脂糖电泳检测DNA梯形条带,以明确导致皮层神经元凋亡的缺氧时间。结果和结论:缺氧0.5h后即可见DNA梯形条带形成,缺氧1h后即可见神经元细胞核固缩、细胞核凋亡小体形成。在不改变细胞培养基及其它成分的条件下,平均缺氧1h即可诱导体外培养的神经元细胞凋亡,成功地建立起一种体外培养大鼠皮层神经元缺氧诱导神经元凋亡模型,而且重复性好,可以作为体外缺氧/缺血诱导神经元凋亡的良好平台。
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关键词
神经元
缺氧
细胞凋亡
模型
动物
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职称材料
噬菌体随机肽库淘选肺癌细胞NCI-H1299特异性结合多肽
被引量:
5
2
作者
石磊
潘雪刁
+7 位作者
王军业
潘琴
巫玮
金桂芳
房思练
侯炳忠
何兴祥
臧林泉
《中国药理学通报》
CAS
CSCD
北大核心
2009年第3期300-304,共5页
目的利用噬菌体展示肽库筛选出与肺癌NCI-H1299细胞特异性结合的多肽,鉴定其特异性和亲和力,为寻找肺癌早期诊断和治疗标志物打下基础。方法以肺癌细胞NCI-H1299为靶细胞,肺二倍体成纤维细胞MRC-5为吸附细胞,在37℃下对噬菌体随机十二...
目的利用噬菌体展示肽库筛选出与肺癌NCI-H1299细胞特异性结合的多肽,鉴定其特异性和亲和力,为寻找肺癌早期诊断和治疗标志物打下基础。方法以肺癌细胞NCI-H1299为靶细胞,肺二倍体成纤维细胞MRC-5为吸附细胞,在37℃下对噬菌体随机十二肽库进行三轮减性筛选,挑取单克隆ELISA初步鉴定噬菌体克隆亲和力;阳性克隆提取质粒,测序后合成多肽,鉴定多肽的亲和力及特异性。结果经ELISA初步鉴定,随机挑选的20个单克隆中,其中6号对NCI-H1299亲和力最高,将其命名为PhageZS6。细胞免疫荧光试验进一步证明,合成的相应多肽FITCZS6对NCI-H1299具有高亲和力。结论利用噬菌体随机十二肽成功筛选出与肺癌细胞具有较高亲和力的多肽ZS6,为肺癌的早期诊断和靶向治疗奠定基础。
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关键词
噬菌体肽库
多肽
肺癌
NCI—H1299
减性筛选
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职称材料
噬菌体肽库与NCI-H1299细胞筛选肺癌特异性结合多肽ZS-9的初步研究
被引量:
1
3
作者
王军业
石磊
+4 位作者
戴淑琴
潘琴
巫玮
臧林泉
戎铁华
《中国病理生理杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2009年第5期868-872,共5页
目的:利用噬菌体肽库与肺癌NCI-H1299细胞筛选出肺癌特异性结合的多肽,研究其亲和力和特异性。方法:以肺癌细胞NCI-H1299为靶细胞,肺二倍体成纤维细胞MRC-5为吸附细胞,与噬菌体随机十二肽库进行三轮筛选,挑取单克隆扩增并测序,进行生物...
目的:利用噬菌体肽库与肺癌NCI-H1299细胞筛选出肺癌特异性结合的多肽,研究其亲和力和特异性。方法:以肺癌细胞NCI-H1299为靶细胞,肺二倍体成纤维细胞MRC-5为吸附细胞,与噬菌体随机十二肽库进行三轮筛选,挑取单克隆扩增并测序,进行生物信息学分析、比对;利用ELISA、细胞免疫化学、组织免疫化学方法测定多肽的亲和力和特异性。结果:经过三轮减性筛选发现,随机挑选的9个单克隆中,其中1个对NCI-H1299和A549均具有较高亲和力,将其命名为ZS-9,测序结果为CAT AAT AAG CAT CTT CCG TCT ACG CAG CCT CTT GCG,根据测序结果推导出ZS-9的氨基酸序列HNKHLPSTQPLA,生物信息学分析表明ZS-9的氨基酸序列与美国国立生物技术信息中心(NCBI)GenBank DNA序列数据库和Swiss-Prot蛋白数据库中的已知基因和蛋白无同源性,表明我们筛选到一种新的肺癌相关抗原的配体。结论:利用噬菌体随机十二肽成功筛选出与肺癌细胞NCI-H1299和A549具有较高亲和力的多肽ZS-9,为肺癌的早期诊断和靶向治疗奠定基础。
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关键词
噬菌体肽库
肺肿瘤
NCI—H1299细胞
多肽ZS-9
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职称材料
题名
一种神经元体外缺氧诱导凋亡模型的建立
被引量:
6
1
作者
臧林泉
苏兴文
邱鹏新
伍宇平
颜光美
机构
广东药学院药科学院药理教研室
中山大学基础医
学院
药理
教研室
出处
《中国病理生理杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2007年第6期1244-1245,1248,共3页
基金
国家自然科学基金资助项目(No.30572177
No.30472010)
文摘
目的:在不改变细胞生长环境条件下,建立一种体外培养大鼠皮层神经元缺氧诱导细胞凋亡模型。方法:取新生鼠培养第8d的皮层神经元,采用不改变原培养基成分,将细胞置于缺氧环境(密闭容器内,抽取成真空并维持30min,然后充95%N2、5%CO2)中分别培养0.5、1.0、2.0、4.0、8.0、12.0和24h后,于不同时间取出,Hochest33258神经元核染色观察凋亡小体及凋亡细胞核,抽提DNA琼脂糖电泳检测DNA梯形条带,以明确导致皮层神经元凋亡的缺氧时间。结果和结论:缺氧0.5h后即可见DNA梯形条带形成,缺氧1h后即可见神经元细胞核固缩、细胞核凋亡小体形成。在不改变细胞培养基及其它成分的条件下,平均缺氧1h即可诱导体外培养的神经元细胞凋亡,成功地建立起一种体外培养大鼠皮层神经元缺氧诱导神经元凋亡模型,而且重复性好,可以作为体外缺氧/缺血诱导神经元凋亡的良好平台。
关键词
神经元
缺氧
细胞凋亡
模型
动物
Keywords
Neurons
Anoxia
Apoptosis
Models, animal
分类号
R743.3 [医药卫生—神经病学与精神病学]
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职称材料
题名
噬菌体随机肽库淘选肺癌细胞NCI-H1299特异性结合多肽
被引量:
5
2
作者
石磊
潘雪刁
王军业
潘琴
巫玮
金桂芳
房思练
侯炳忠
何兴祥
臧林泉
机构
广东药学院药科学院药理教研室
中山大学附属肿瘤医院
中山大学附属第六医院
中山大学附属第五医院
广东
药学院
临床医
学院
出处
《中国药理学通报》
CAS
CSCD
北大核心
2009年第3期300-304,共5页
基金
国家自然科学基金资助项目(No30572177)
教育部重点基金资助项目(No208105)
文摘
目的利用噬菌体展示肽库筛选出与肺癌NCI-H1299细胞特异性结合的多肽,鉴定其特异性和亲和力,为寻找肺癌早期诊断和治疗标志物打下基础。方法以肺癌细胞NCI-H1299为靶细胞,肺二倍体成纤维细胞MRC-5为吸附细胞,在37℃下对噬菌体随机十二肽库进行三轮减性筛选,挑取单克隆ELISA初步鉴定噬菌体克隆亲和力;阳性克隆提取质粒,测序后合成多肽,鉴定多肽的亲和力及特异性。结果经ELISA初步鉴定,随机挑选的20个单克隆中,其中6号对NCI-H1299亲和力最高,将其命名为PhageZS6。细胞免疫荧光试验进一步证明,合成的相应多肽FITCZS6对NCI-H1299具有高亲和力。结论利用噬菌体随机十二肽成功筛选出与肺癌细胞具有较高亲和力的多肽ZS6,为肺癌的早期诊断和靶向治疗奠定基础。
关键词
噬菌体肽库
多肽
肺癌
NCI—H1299
减性筛选
Keywords
phage library
peptides
lung cancer
NCI-H1299
subtract biopanning
分类号
R-05 [医药卫生]
R322.11 [医药卫生—人体解剖和组织胚胎学]
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职称材料
题名
噬菌体肽库与NCI-H1299细胞筛选肺癌特异性结合多肽ZS-9的初步研究
被引量:
1
3
作者
王军业
石磊
戴淑琴
潘琴
巫玮
臧林泉
戎铁华
机构
华南肿瘤学国家重点实验室
中山大学肿瘤防治中心胸科
广东药学院药科学院药理教研室
中山大学检验科
出处
《中国病理生理杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2009年第5期868-872,共5页
基金
教育部重点科研课题基金资助项目(No:208105)
广东省科技计划项目(No.2008B030303008)
+1 种基金
广东药学院人才启动基金资助项目(No.2006)
广东药学院师资建设"中青年骨干教师"专项经费资助项目
文摘
目的:利用噬菌体肽库与肺癌NCI-H1299细胞筛选出肺癌特异性结合的多肽,研究其亲和力和特异性。方法:以肺癌细胞NCI-H1299为靶细胞,肺二倍体成纤维细胞MRC-5为吸附细胞,与噬菌体随机十二肽库进行三轮筛选,挑取单克隆扩增并测序,进行生物信息学分析、比对;利用ELISA、细胞免疫化学、组织免疫化学方法测定多肽的亲和力和特异性。结果:经过三轮减性筛选发现,随机挑选的9个单克隆中,其中1个对NCI-H1299和A549均具有较高亲和力,将其命名为ZS-9,测序结果为CAT AAT AAG CAT CTT CCG TCT ACG CAG CCT CTT GCG,根据测序结果推导出ZS-9的氨基酸序列HNKHLPSTQPLA,生物信息学分析表明ZS-9的氨基酸序列与美国国立生物技术信息中心(NCBI)GenBank DNA序列数据库和Swiss-Prot蛋白数据库中的已知基因和蛋白无同源性,表明我们筛选到一种新的肺癌相关抗原的配体。结论:利用噬菌体随机十二肽成功筛选出与肺癌细胞NCI-H1299和A549具有较高亲和力的多肽ZS-9,为肺癌的早期诊断和靶向治疗奠定基础。
关键词
噬菌体肽库
肺肿瘤
NCI—H1299细胞
多肽ZS-9
Keywords
Phage library
Lung neoplasms
NCI -H1299 cells
Peptides ZS -9
分类号
Q7 [生物学—分子生物学]
R73 [医药卫生—肿瘤]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
一种神经元体外缺氧诱导凋亡模型的建立
臧林泉
苏兴文
邱鹏新
伍宇平
颜光美
《中国病理生理杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2007
6
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职称材料
2
噬菌体随机肽库淘选肺癌细胞NCI-H1299特异性结合多肽
石磊
潘雪刁
王军业
潘琴
巫玮
金桂芳
房思练
侯炳忠
何兴祥
臧林泉
《中国药理学通报》
CAS
CSCD
北大核心
2009
5
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下载PDF
职称材料
3
噬菌体肽库与NCI-H1299细胞筛选肺癌特异性结合多肽ZS-9的初步研究
王军业
石磊
戴淑琴
潘琴
巫玮
臧林泉
戎铁华
《中国病理生理杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2009
1
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职称材料
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