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广东人群CYP3A4基因rs28371759(20070T>C)位点多态性调查
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作者 王瑢 陈珂蕊 +2 位作者 刘晓媚 唐惠恩 何震宇 《中国临床药理学与治疗学》 CAS CSCD 2014年第11期1255-1258,共4页
目的:探讨广东人群CYP3A4基因rs28371759(20070T>C)位点的分布特点,为广东患者使用CYP3A4底物药提供理论参考依据。方法:以200名广东志愿者的口腔拭子DNA为模板,PCR扩增包含rs28371759多态位点的DNA片断,用限制性内切酶MspI消化PCR产... 目的:探讨广东人群CYP3A4基因rs28371759(20070T>C)位点的分布特点,为广东患者使用CYP3A4底物药提供理论参考依据。方法:以200名广东志愿者的口腔拭子DNA为模板,PCR扩增包含rs28371759多态位点的DNA片断,用限制性内切酶MspI消化PCR产物,通过聚丙烯酰胺凝胶电泳-银染获得样品的限制性酶切图谱用于判别基因型。结果:在受检的200例样品中,检出杂合子3例,余者皆为野生型纯合子。野生型纯合子、杂合子、突变型纯合子的频率分别为0.985、0.015、0,突变等位基因20070C即CYP3A4*18A的频率为0.007 5。结论:本研究得到了广东人群CYP3A4基因rs28371759位点的多态性分布情况,为研究CYP3A4基因多态性与临床药物效应的相互关系奠定了基础。 展开更多
关键词 广东人群 CYP3A4~*18A 多态性
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酸刺激前后唾液淀粉酶活性、流率和pH值的性别差异 被引量:5
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作者 杨泽民 林静 +3 位作者 陈龙辉 张敏 陈蔚文 杨小蓉 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第8期883-887,共5页
目的探讨唾液淀粉酶(sAA)活性、流率和pH值以及sAA活性与流率相关性的性别差异。方法采集105名健康志愿者酸刺激前后的唾液标本,测定其sAA活性、流率和pH值,分析sAA活性和流率的相关性,比较唾液测定指标之间的性别差异。结果柠檬酸刺激... 目的探讨唾液淀粉酶(sAA)活性、流率和pH值以及sAA活性与流率相关性的性别差异。方法采集105名健康志愿者酸刺激前后的唾液标本,测定其sAA活性、流率和pH值,分析sAA活性和流率的相关性,比较唾液测定指标之间的性别差异。结果柠檬酸刺激能增加sAA活性、流率和pH值,其中以流率增加最大(P<0.01);sAA活性、流率和pH值在酸刺激前后以及对刺激的反应(前后的差值)都不存在性别差异;女性在酸刺激前后sAA活性和流率之间以及sAA活性差值和流率差值之间都存在正相关(P<0.05),并且相关系数相对稳定;男性只在酸刺激后的sAA活性和流率之间表现正相关(P<0.01)。结论 sAA活性、流率和pH值在基础和应激状态下都没有性别差异,但是sAA活性和流率之间的相关性存在一定的性别差异。 展开更多
关键词 唾液 Α淀粉酶 流率 PH值 柠檬酸 性别
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奥氮平致体质量增加与HTR2C受体基因-759C/T多态性的关联研究 被引量:4
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作者 刘伟忠 何红波 +5 位作者 何震宇 黄惜妮 张敏玲 张杰 梅尚英 刘文宪 《医药导报》 CAS 北大核心 2013年第6期733-737,共5页
目的探讨奥氮平在治疗精神分裂症患者过程中出现的体质量增加与5-羟色胺2C(HTR2C)受体基因启动子区-759C/T(rs3813929)单核苷酸多态性的关系。方法选择首发精神分裂症患者181例,测定其接受奥氮平单药治疗前及治疗12周后的体质量、血糖... 目的探讨奥氮平在治疗精神分裂症患者过程中出现的体质量增加与5-羟色胺2C(HTR2C)受体基因启动子区-759C/T(rs3813929)单核苷酸多态性的关系。方法选择首发精神分裂症患者181例,测定其接受奥氮平单药治疗前及治疗12周后的体质量、血糖、三酰甘油、胆固醇指标,计算体质量指数(BMI),采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态(PCR-RFLP)技术检测各患者HTR2C受体基因-759C/T位点的半合子型或基因型,分析BMI的变化与-759C/T的相关性。结果 181例患者经奥氮平治疗后平均体质量增加(4.33±4.15)kg或超过基础体质量的(7.1±6.3)%,体质量变化范围为0~22 kg或0%~38%,平均BMI变化值为(1.52±1.48)kg.(m2)-1。92例男患者突变型半合子(-759T)频率为13.0%,89例女患者突变型纯合子(-759T/T)频率为0%,杂合子频率(-759C/T)为29.2%。-759C/C野生型纯合子女患者和-759C半合子男患者经奥氮平治疗后体质量增加更明显。结论 HTR2C受体基因启动子-759C/T单核苷酸多态性与奥氮平治疗导致患者体质量增加相关联,携带-759T等位基因可能是限制体质量增加的保护因子。 展开更多
关键词 奥氮平 体质量增加 5-羟色胺 基因多态性
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一种从唾液中快速提取基因组DNA的方法 被引量:4
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作者 杨泽民 林静 +2 位作者 陈龙辉 张敏 陈蔚文 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第5期548-553,共6页
目的探索一种快速、有效且对人体无创伤的基因组DNA提取方法。方法比较碘化钾法和口腔拭子基因组DNA提取试剂盒法对新鲜和室温放置1周的唾液标本的基因组DNA提取和TP53、PRB-3基因PCR扩增效果。同时采集99名健康儿童和成人的唾液标本验... 目的探索一种快速、有效且对人体无创伤的基因组DNA提取方法。方法比较碘化钾法和口腔拭子基因组DNA提取试剂盒法对新鲜和室温放置1周的唾液标本的基因组DNA提取和TP53、PRB-3基因PCR扩增效果。同时采集99名健康儿童和成人的唾液标本验证碘化钾法提取唾液基因组DNA的稳定性。结果两种DNA提取方法都能从新鲜唾液标本中获得高质量的基因组DNA,其中碘化钾法的得率和D260/D280分别为(1.91±0.15)μg和1.99±0.05,试剂盒法分别为(2.64±0.34)μg和1.81±0.02。对于室温放置1周的唾液标本,两种提取方法获得的DNA虽然降解明显,但是对TP53和PRB-3基因都能扩增正确大小的目的片段。碘化钾法提取的99名健康儿童和成人的唾液基因组DNA虽然个体差异明显[得率为(1.89±0.46)μg],但是DNA质量稳定可靠(D260/D280为1.96±0.10)。结论碘化钾法提取唾液基因组DNA不仅廉价、高效,而且对人体无创伤,非常适合大范围分子流行病学研究。 展开更多
关键词 唾液 碘化钾DNA提取 聚合酶链反应
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Preproghrelin基因Leu72Met多态性与广州地区汉族人群2型糖尿病的相关性研究 被引量:6
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作者 崔炳权 何震宇 林元藻 《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第7期1067-1070,共4页
目的:探讨Preproghrelin基因Leu72Met多态性与广州地区汉族人群2型糖尿病(Type 2 diabetes mellitus,T2DM)的相关性。方法:以广州地区汉族人群中的95位非糖尿病的正常人(对照组)和102位2型糖尿病人(T2DM组)为研究对象,采用PCR扩增目的... 目的:探讨Preproghrelin基因Leu72Met多态性与广州地区汉族人群2型糖尿病(Type 2 diabetes mellitus,T2DM)的相关性。方法:以广州地区汉族人群中的95位非糖尿病的正常人(对照组)和102位2型糖尿病人(T2DM组)为研究对象,采用PCR扩增目的片段、限制性内切酶BseNⅠ酶切,Native-PAGE分离和银染分析,确定各组Preproghrelin基因Leu72Met多态基因型,比较分析各组间基因型、等位基因频率分布的差异。结果:对照组和T2DM组的基因型频率分布符合Hardy-Weinberg平衡。在对照组95例样本中,CC68例、AC27例,AA0例;基因型频率分别为:0.716、0.284、0;在T2DM组102例样本中,CC71例、AC25例、AA6例,基因型频率分别为:0.696、0.245、0.059。组间基因型和等位基因频率差异无统计学意义。结论:Preproghrelin基因Leu72Met多态性与T2DM之间无显著的相关性。但在T2DM组中检测到AA基因型而对照组中未发现,提示等位基因A在T2DM发生中有某种作用,将进一步研究。 展开更多
关键词 Preproghrelin基因 Leu72Met多态性 2型糖尿病(T2DM)
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原花青素对PC12细胞氧化应激损伤保护作用的细胞周期调控机制 被引量:3
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作者 梅寒芳 李荷 朱家勇 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第17期1809-1812,共4页
目的观察原花青素对过氧化氢诱导体外培养大鼠嗜铬细胞瘤PC12细胞氧化损伤及细胞周期阻滞的保护作用,并探讨细胞周期调控基因c-Abl和plk1在其中的作用。方法采用MTT法观察不同浓度原花青素对100μmol/L过氧化氢诱导6 h的PC12细胞增殖率... 目的观察原花青素对过氧化氢诱导体外培养大鼠嗜铬细胞瘤PC12细胞氧化损伤及细胞周期阻滞的保护作用,并探讨细胞周期调控基因c-Abl和plk1在其中的作用。方法采用MTT法观察不同浓度原花青素对100μmol/L过氧化氢诱导6 h的PC12细胞增殖率的影响。采用流式细胞仪检测原花青素对诱导的PC12细胞周期分布的影响,Western blot检测不同浓度原花青素对诱导的PC12细胞c-Abl和plk1基因蛋白表达水平的影响。结果与对照组比较,过氧化氢显著降低PC12细胞增殖率(P<0.01)、显著增高PC12细胞S期分布比例(P<0.01)、显著诱导c-Abl和plk1基因蛋白水平表达增强(P<0.01)。与过氧化氢诱导组比较,原花青素剂量依赖性提高PC12细胞的增殖率(P<0.01)、缓解过氧化氢诱导的细胞周期S期阻滞(P<0.01)、降低c-Abl和plk1基因蛋白水平的表达(P<0.01)。结论原花青素对过氧化氢诱导的PC12细胞氧化损伤具有保护作用,其机制可能是通过缓解过氧化氢诱导的细胞周期S期阻滞、降低细胞周期调控相关基因c-Abl和plk1的蛋白表达水平来实现的。 展开更多
关键词 原花青素 过氧化氢 PC12细胞 plk1基因 c-Abl基因
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漆酶Lac1338的酶学特性测定及定向突变对其酶解染料影响 被引量:4
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作者 张雪玲 陈小利 李荷 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第7期170-177,共8页
为了获得表达量高、热稳定性好的漆酶,通过密码子优化合成漆酶基因lac1338、连接到pET-32a(+)载体上并在Escherichia coli BL21(DE3)中表达,获得HIS-Lac1338蛋白。酶学性质测定结果显示,以ABTS为底物时,HIS-Lac1338的比活力高达22.8 U/m... 为了获得表达量高、热稳定性好的漆酶,通过密码子优化合成漆酶基因lac1338、连接到pET-32a(+)载体上并在Escherichia coli BL21(DE3)中表达,获得HIS-Lac1338蛋白。酶学性质测定结果显示,以ABTS为底物时,HIS-Lac1338的比活力高达22.8 U/mg,Km和Vmax分别为567μmol/L和2.8 mmol/(L·min·g);HIS-Lac1338的最适反应温度为55℃,最适pH为6.0;在55℃以下保温2 h能保留50%的酶活性,在pH 4-8范围内孵育4 h仍保留50%以上的活性;HIS-Lac1338对Cu^(2+)抗性强,Ca^(2+)、Na^+、K^+对HIS-Lac1338有促进作用,而Co^(2+)、Fe^(2+)、Hg^(2+)、Ag^+等重金属离子对HIS-Lac1338有抑制作用。易错PCR方法得到的Lac1338的突变酶Lac16与HIS-Lac1338相比,对酸性紫7、溴酚蓝、考马斯亮蓝的降解率分别由10.9%、20%和25%提高到90.5%、67.8%和85%。结果表明,HIS-Lac1338具有较好的温度及pH稳定性,而通过易错PCR技术定向突变获得的突变酶Lac16的染料降解率大大提高。 展开更多
关键词 漆酶 克隆表达 酶学性质 定向进化 染料降解
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