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猪轮状病毒重组VP6*蛋白的原核表达及间接ELISA检测方法的建立
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作者 高力国 申翰钦 +3 位作者 陈诒全 陈胜 蔺文成 陈峰 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第9期4021-4028,共8页
旨在建立猪轮状病毒(porcine rotavirus,PoRV)的抗体检测方法。本研究以PoRV截短的VP6*(aa149-332)蛋白作为检测抗原,建立PoRV抗体的间接ELISA检测方法。结果显示:截短的重组VP6*(aa149-332)以包涵体和可溶性两种形式存在,大小为22.5 k... 旨在建立猪轮状病毒(porcine rotavirus,PoRV)的抗体检测方法。本研究以PoRV截短的VP6*(aa149-332)蛋白作为检测抗原,建立PoRV抗体的间接ELISA检测方法。结果显示:截短的重组VP6*(aa149-332)以包涵体和可溶性两种形式存在,大小为22.5 ku。优化后的ELISA反应条件:VP6*(aa149-332)包被量为25 ng·孔^(-1),抗原4℃过夜包被,5%脱脂奶粉溶液37℃封闭2 h,待检血清1∶400稀释、37℃孵育30 min,酶标羊抗鼠IgG二抗1∶24000稀释、37℃孵育30 min,显色15 min。试验确定阴阳性临界值OD_(450 nm)=0.418,可检测到抗体的最大稀释度为1∶3200,批内和批间重复变异系数均小于10%,并具有较好的特异性。28份血清与Western blot结果符合率为96.42%。ELISA OD_(450 nm)值与中和抗体效价log2相关系数R^(2)=0.8785。综上所述,本研究建立的PoRV抗体间接ELISA具有较高的特异性和敏感性,可应用于PoRV的临床血清样本抗体检测。 展开更多
关键词 猪轮状病毒 VP6*蛋白 间接ELISA 原核表达
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一种氯霉素高灵敏消线法检测试纸条的制备 被引量:3
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作者 宁军 李娜 +2 位作者 严雨倩 付麟 周兴华 《食品安全导刊》 2021年第20期165-168,共4页
本文对氯霉素进行丁二酸酐衍生得到半抗原,将半抗原与载体蛋白BSA偶联作为免疫原,氯霉素与偶连载体蛋白OVA作为筛选抗原,获得氯霉素单克隆抗体,IC_(50)值为0.010 6 ng/mL,线性范围为0.002 3~0.049 5 ng/mL,特异性好,与相关药物没有交叉... 本文对氯霉素进行丁二酸酐衍生得到半抗原,将半抗原与载体蛋白BSA偶联作为免疫原,氯霉素与偶连载体蛋白OVA作为筛选抗原,获得氯霉素单克隆抗体,IC_(50)值为0.010 6 ng/mL,线性范围为0.002 3~0.049 5 ng/mL,特异性好,与相关药物没有交叉。在此抗原抗体的基础上制备胶体金试纸条,对鸡肉样本进行添加回收试验,消线法检测限为0.1 μg/kg,与目前市场上主流的比色法判读试纸条相比,消线法判读更加快速,不需要使用读数仪辅助判读,为农产品质量安全提供有力保障。 展开更多
关键词 氯霉素 单克隆抗体 胶体金免疫层析试纸条 消线法 检测
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猪病毒性腹泻灭活疫苗对仔猪保护力研究 被引量:5
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作者 何玲 钟采灵 +5 位作者 王凤国 梁桂益 麦凯杰 孙华 陈瑞爱 黄红亮 《中国动物保健》 2023年第12期108-109,共2页
PEDV引起的产房仔猪腹泻是目前危害养猪业的主要三大传染病(ASF、PRRS、PED)之一,给养猪业造成巨大的经济损失。疫苗免疫仍然是防控PEDV的主要手段。为了提高疫苗的保护效果,本研究小组对PEDV疫苗在病毒含量、佐剂等方面进行了大幅改进... PEDV引起的产房仔猪腹泻是目前危害养猪业的主要三大传染病(ASF、PRRS、PED)之一,给养猪业造成巨大的经济损失。疫苗免疫仍然是防控PEDV的主要手段。为了提高疫苗的保护效果,本研究小组对PEDV疫苗在病毒含量、佐剂等方面进行了大幅改进,本文总结了改进后的疫苗免疫怀孕母猪,初生仔猪从母猪乳汁获得被动保护的研究结果,表明该疫苗为产房仔猪PED的防控提供了更有效的措施。 展开更多
关键词 PED PEDV 疫苗
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HPLC-UV法测定中兽药散剂中非法添加吗啉胍的方法研究 被引量:1
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作者 余军军 张桂君 +4 位作者 宁军 叶渭源 章敏 蓝棋浩 韦田 《中兽医医药杂志》 2020年第4期93-95,共3页
建立扶正解毒散、荆防解毒散、黄连解毒散、麻黄鱼腥草散、清瘟败毒散等中兽药散剂中违规添加吗啉胍的检测方法。样品经超纯水溶解、超声10 min,静置、过滤,取滤液进行高效液相色谱定量分析。结果发现吗啉胍在1.0~50.0μg/mL浓度范围内... 建立扶正解毒散、荆防解毒散、黄连解毒散、麻黄鱼腥草散、清瘟败毒散等中兽药散剂中违规添加吗啉胍的检测方法。样品经超纯水溶解、超声10 min,静置、过滤,取滤液进行高效液相色谱定量分析。结果发现吗啉胍在1.0~50.0μg/mL浓度范围内线性关系良好(R2=1.000);添加回收率为75.2%~115.3%,检测限为10 mg/kg,定量限为20 mg/kg。该方法操作简便,阴性样品无干扰,可用于上述5种中兽药散剂中非法添加吗啉胍的定量测定。 展开更多
关键词 中兽药散剂 吗啉胍 高效液相色谱法 检测
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