特立帕肽通过mTORC2通路调控细胞骨架和黏附斑的观察研究 被引量：1

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作者 陈柏龄 吕中 +5 位作者 艾克热木江.木合热木 白晓春 邹学农 陈志鹏 林玮 袁伟权 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2019年第10期1534-1539,共6页

目的探讨特立帕肽通过mTORC2通路调控骨髓间充质干细胞的细胞骨架和黏附斑的变化的机制。方法从4~6周大的Sprague-Dawley大鼠中提取骨髓间充质干细胞并培养,使用不同浓度(1、10、20、50 nmol/L)的特立帕肽处理细胞。特立帕肽处理细胞后... 目的探讨特立帕肽通过mTORC2通路调控骨髓间充质干细胞的细胞骨架和黏附斑的变化的机制。方法从4~6周大的Sprague-Dawley大鼠中提取骨髓间充质干细胞并培养,使用不同浓度(1、10、20、50 nmol/L)的特立帕肽处理细胞。特立帕肽处理细胞后加入mTORC1抑制剂(20 nmol/L雷帕霉素)或mTORC1/2抑制剂(10μmol/L PP242)后观察现象。细胞迁移采用细胞迁移试验和伤口愈合试验。通过黏附实验观察细胞的黏附能力。蛋白表达的细胞骨架蛋白(β-actin)和黏着斑蛋白(vinculin)用免疫荧光检测。结果在不同浓度特立帕肽的处理下,大鼠的骨髓间充质干细胞相对于对照组呈现出更强的迁移和黏附能力(P <0.05);此外,与1 nmol/L的特立帕肽的浓度相比,10、20、50 nmol/L浓度的特立帕肽均能促进细胞迁移,且处理间差异无统计学意义(P> 0.05);在特立帕肽的刺激下,细胞更大,呈多边形,并且actin应力纤维倾向于有更强的粘连;而加入mTORC1/2抑制剂PP242的骨髓间充质干细胞能显著降低特立帕肽促进迁移和黏附的能力,并且细胞的黏着斑与肌动蛋白末端的骨架纤维较小;加入mTORC1抑制剂雷帕霉素对特立帕肽的抑制作用和则不明显。结论特立帕肽通过激活mTORC2通路调控细胞骨架和黏附斑的变化,进而促进细胞的迁移黏附。 展开更多

关键词 特立帕肽 mTORC2通路 骨髓间充质干细胞 细胞骨架

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骨肉瘤细胞外泌体激活肺组织成纤维细胞炎性信号通路

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作者 谢显彪 温丽丽 +5 位作者 吕东明 李洪波 刘伟海 邹雨桐 姚浩 沈靖南 《中山大学学报（医学科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2020年第4期509-514,共6页

【目的】本研究旨在研究骨肉瘤细胞来源外泌体对靶器官微环境的调控作用及其分子机制。【方法】提取骨肉瘤细胞143B外泌体并鉴定,通过PKH26荧光染色后经尾静脉注入裸鼠体内,24 h后提取肝、脾、肺、肾及脑组织,荧光显微镜下计数不同视野... 【目的】本研究旨在研究骨肉瘤细胞来源外泌体对靶器官微环境的调控作用及其分子机制。【方法】提取骨肉瘤细胞143B外泌体并鉴定,通过PKH26荧光染色后经尾静脉注入裸鼠体内,24 h后提取肝、脾、肺、肾及脑组织,荧光显微镜下计数不同视野红色荧光数量;通过免疫荧光检测不同类型细胞中外泌体摄取情况;143B外泌体与人肺成纤维细胞共培养,荧光显微镜检测摄取情况,进一步利用qPCR检测炎性因子IL-1β、IL-6及TNF-α表达水平,通过蛋白印迹法检测炎性信号通路NF-κB通路p-p65和MAPK通路p-ERK及p-p38的变化。【结果】143B细胞外泌体中TSG101、Flotillin-1、CD63、CD9表达,Calnexin表达缺失(P<0.05);电镜外泌体呈“茶托”样形状,大小为(141.92±52.85)nm;外泌体经裸鼠尾静脉注射后进入肺组织含量显著高于肝、肾、脾、脑等器官(P<0.05);外泌体与人肺成纤维细胞共培养后炎性因子IL-1β、IL-6及TNF-αmRNA水平明显升高(P<0.05),同时p-p65,p-ERK及pp38均显著上调(P<0.05)。【结论】骨肉瘤细胞外泌体可激活肺成纤维细胞NF-κB及MAPK炎性信号通路,进而促进炎性因子IL-1β、IL-6及TNF-α产生。 展开更多

关键词 外泌体 骨肉瘤 成纤维细胞 炎性信号通路

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粤港澳大湾区50岁以上人群骨质疏松调查研究 被引量：5

3

作者 赵胜利 温振兴 +5 位作者 莫小毅 张晓艳 利浩楠 张颖恺 符丹 陈柏龄 《中国骨质疏松杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第5期665-670,共6页

目的 基于双能X线骨密度仪(dual energy X-ray absorptiometry, DXA)测量骨密度(bone mineral density, BMD)分析粤港澳大湾区3所医院50岁以上人群骨量状态分布特征及骨质疏松患病率,为疾病区域个性化防治提供数据参考。方法 筛选2015年... 目的 基于双能X线骨密度仪(dual energy X-ray absorptiometry, DXA)测量骨密度(bone mineral density, BMD)分析粤港澳大湾区3所医院50岁以上人群骨量状态分布特征及骨质疏松患病率,为疾病区域个性化防治提供数据参考。方法 筛选2015年5月至2020年12月在粤港澳大湾区3所医院就诊的9122例50岁以上人员,采用DXA测量腰椎、全髋及股骨颈BMD T值,比较不同地区、不同年龄段人群骨质疏松患病率及骨量状态分布差异,分析以不同部位T值为参考对骨质疏松检出率的影响。结果 3所医院纳入人群骨质疏松总体患病率为30.7%,男性为12.9%(中国澳门最高,为44.0%),女性为34.6%(中国香港最高,为40.2%);骨质疏松患病率均随年龄增长而增加,女性各年龄段患病率高于男性;3所医院相同年龄段不同骨量状态人群构成具有各自特征,不同年龄段间存在差异;骨质疏松检出率以3个部位最低T值为参考时最高。结论 粤港澳大湾区3所医院50岁以上就诊人员骨质疏松患病率较高,各地区间不同骨量状态人群构成差异明显。在进行骨质疏松筛查时应综合多个部位T值信息以提高检出率,同时结合区域特点制定针对性防治策略。 展开更多

关键词 粤港澳大湾区 50岁以上 骨质疏松 患病率 检出率 流行病学

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福美加对去势骨质疏松大鼠长骨干骺端骨组织计量学和生物力学的影响 被引量：4

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作者 袁伟权 黎艺强 +4 位作者 陈志鹏 林玮 赵胜利 莫小毅 陈柏龄 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2020年第8期1005-1009,共5页

目的探讨福美加(阿仑膦酸钠维D3)对去势骨质疏松大鼠长骨干骺端骨组织计量学和生物力学的影响。方法30只3月龄雌性SD大鼠随机分为假手术组(Sham)、去卵巢组(OVX)和福美加组(ALN)。福美加治疗12周后,对所有大鼠进行骨密度测定,收集大鼠... 目的探讨福美加(阿仑膦酸钠维D3)对去势骨质疏松大鼠长骨干骺端骨组织计量学和生物力学的影响。方法30只3月龄雌性SD大鼠随机分为假手术组(Sham)、去卵巢组(OVX)和福美加组(ALN)。福美加治疗12周后,对所有大鼠进行骨密度测定,收集大鼠股骨和胫骨,用于骨组织计量学和生物力学指标的测定。结果ALN组股骨和L5椎体骨密度、胫骨骨质量参数(BV/TV、Tb.N、Tb.Th)明显大于OVX组(P<0.05)。Sham和ALN组股骨干及远端干骺端的最大载荷、破坏载荷和刚度明显高于OVX组(P<0.05)。OVX组与ALN组股骨干骺端弯曲试验最大载荷、破坏载荷的均值差异显著高于股骨干弯曲试验(P<0.05)。结论福美加可显著提高去势骨质疏松大鼠的骨密度、骨组织计量学参数和生物力学性能,且作用于长骨干骺端的效果大于长骨骨干。 展开更多

关键词 福美加 骨质疏松 干骺端 骨组织计量学 生物力学

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SDF-1/CXCR4激活ERK和PI3K/AKT通路介导髓核致炎根性疼痛 被引量：9

5

作者 魏明 高凤娇 +3 位作者 杨琳 孙来保 邹学农 黄文起 《中山大学学报（医学科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2021年第3期373-380,共8页

【目的】探讨基质细胞衍生因子1/趋化因子CXC受体4(SDF-1/CXCR4)通路在髓核致炎根性疼痛中的作用及机制。【方法】分为三部分:①26只大鼠随机分为假手术组和模型组,分别行假手术或髓核自体移植。Von Frey纤维丝测量大鼠机械撤足阈值(PWT... 【目的】探讨基质细胞衍生因子1/趋化因子CXC受体4(SDF-1/CXCR4)通路在髓核致炎根性疼痛中的作用及机制。【方法】分为三部分:①26只大鼠随机分为假手术组和模型组,分别行假手术或髓核自体移植。Von Frey纤维丝测量大鼠机械撤足阈值(PWT)的变化;Western blot法检测大鼠脊髓中SDF-1、CXCR4,磷酸化细胞外信号调节激酶(pERK)和磷酸化蛋白激酶B(pAKT)表达水平;免疫荧光染色定位SDF-1、CXCR4的表达细胞。②54只大鼠随机分为假手术组、模型组、溶剂组、AMD3100组、SDF-1中和抗体组、对照Ig G组。鞘内注射相应药物,测量大鼠PWT的变化和大鼠脊髓中pERK和pAKT的表达变化。③18只大鼠随机分为溶剂组、U0126组、LY294002组,鞘内注射相应药物,测量大鼠PWT的变化。【结果】①髓核自体移植使大鼠PWT下降(P<0.001),脊髓中SDF-1、CXCR4、pERK,pAKT表达上调(P<0.05),SDF-1主要与脊髓中神经元共表达,CXCR4与神经元和星形胶质细胞共表达。②鞘内注射SDF-1中和抗体或CXCR4抑制剂AMD3100升高髓核自体移植大鼠的PWT(P<0.05),并使髓核自体移植大鼠脊髓中pERK和pAKT表达下调(P<0.05)。③鞘内给予MEK抑制剂U0126或PI3K抑制剂LY294002可升高髓核自体移植大鼠PWT(P<0.05)。【结论】SDF-1/CXCR4通过激活ERK和PI3K/AKT通路介导髓核致炎根性疼痛。 展开更多

关键词 腰椎间盘突出症 髓核 根性疼痛 基质细胞衍生因子1 CXCR4

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缺氧诱导因子-1α与基质金属蛋白酶-2在慢性压迫性颈脊髓损伤大鼠模型中的表达及意义 被引量：3

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作者 程星 龙厚清 +3 位作者 徐晶辉 王晓波 黄阳亮 李佛保 《中国脊柱脊髓杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第3期258-264,共7页

目的 :探讨缺氧诱导因子-1α(hypoxia inducible factor-1α,HIF-1α)和基质金属蛋白酶-2(matrix metalloproteinases-2,MMP-2)在慢性压迫性颈脊髓损伤大鼠模型中的表达及意义。方法 :将80只成年SD大鼠随机分为假手术组和慢性压迫性颈... 目的 :探讨缺氧诱导因子-1α(hypoxia inducible factor-1α,HIF-1α)和基质金属蛋白酶-2(matrix metalloproteinases-2,MMP-2)在慢性压迫性颈脊髓损伤大鼠模型中的表达及意义。方法 :将80只成年SD大鼠随机分为假手术组和慢性压迫性颈脊髓损伤组(脊髓压迫组),每组40只。大鼠麻醉后充分显露C5和C6椎板,切除C5左侧半椎板,显露硬脊膜,脊髓压迫组在C6椎板和硬脊膜之间置入吸水后可膨胀聚氨酯薄板(1×3×1mm);假手术组只显露硬脊膜不置入压迫物。两组分别通过BBB(Basso Beattie Bresnahan)评分和体感诱发电位(somatosensory evoked potential,SEP)检测评估脊髓功能;于造模后7d、28d、42d和70d时处死大鼠取颈脊髓组织进行HIF-1α及MMP-2免疫组化染色,检测其在各时间点的表达量(IOD值),采用独立样本t检验比较两组各时间点的差异,分析HIF-1α、MMP-2与脊髓功能变化的相关性。结果:造模后7d时,两组BBB评分无显著性差异;SEP潜伏期显著性延长,波幅显著性降低;HIF-1α显著性降低,MMP-2显著性升高。28d时脊髓压迫组BBB评分显著性低于假手术组,SEP潜伏期与7d比较显著性延长(P<0.05)、波幅显著性降低(P<0.05),HIF-1α表达显著性增高(P<0.05),而MMP-2表达显著性降低(P<0.05)。42d时,脊髓压迫组BBB评分、SEP潜伏期和波幅与28d时比较无显著性差异,HIF-1α表达显著性增高(P<0.05),而MMP-2表达显著性降低(P<0.05);70d时脊髓压迫组神经功能较28d时显著性改善,BBB评分显著性增高(P<0.05),SEP潜伏期显著性缩短(P<0.05)、波幅显著性升高(P<0.05);HIF-1α表达较前显著性降低,而MMP-2表达升高,但与假手术组比较仍有显著性差异(P<0.05)。HIF-1α表达量与BBB评分呈显著性负相关(r=-0.458,P<0.05),MMP-2表达量与BBB评分呈显著性正相关(r=0.903,P<0.05)。结论:大鼠慢性压迫性脊髓损伤后具有一定程度的自我修复能力,HIF-1α、MMP-2表达变化与慢性脊髓压迫性损伤后神经功能改善相关。 展开更多

关键词 脊髓损伤 慢性压迫 缺氧诱导因子-1Α 基质金属蛋白酶-2 大鼠

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INI1诱导上皮样肉瘤细胞向脂肪方向分化

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作者 谢显彪 温丽丽 +3 位作者 吕东明 邹雨桐 姚浩 彭挺生 《中山大学学报（医学科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2020年第5期690-696,共7页

【目的】本研究旨在探讨INI1在上皮样肉瘤细胞中作用及机制。【方法】利用Western blot检测并比较上皮样肉瘤细胞中INI1表达水平;免疫组化检测上皮样肉瘤组织标本中INI1的表达;利用Tet-on系统重建上皮样肉瘤细胞VA-ES-BJ中INI1表达;诱导... 【目的】本研究旨在探讨INI1在上皮样肉瘤细胞中作用及机制。【方法】利用Western blot检测并比较上皮样肉瘤细胞中INI1表达水平;免疫组化检测上皮样肉瘤组织标本中INI1的表达;利用Tet-on系统重建上皮样肉瘤细胞VA-ES-BJ中INI1表达;诱导VA-ES-BJ细胞中INI1表达后检测细胞形态、增殖、脂肪相关分子标志,进一步Western blot检测脂肪分化相关转录因子表达及油红染色检测向脂肪方向分化的程度。【结果】在上皮样肉瘤细胞和临床标本中均存在INI1蛋白表达缺失的现象(P<0.05)。通过Tet-on系统在VA-ES-BJ细胞中成功重建INI1表达,经过强力霉素诱导后出现INI1表达上调。持续诱导INI1表达,VA-ES-BJ细胞形态发生改变,胞浆出现大量空泡;细胞增殖速度明显抑制(P<0.05);检测上皮来源细胞标记物,发现Cytokeratin明显下调(P<0.05);检测脂肪细胞相关标志物,发现瘦蛋白、脂联素、脂蛋白脂酶表达明显上调(P<0.05);进一步检测诱导INI1表达后脂肪分化相关转录因子PPAR-γ和CEBP-α表达均明显上调(P<0.05),油红染色呈显著阳性。【结论】上皮样肉瘤中存在INI1蛋白表达缺失现象,重建INI1表达通过上调转录因子PPAR-γ和CEBP-α表达,进而诱导上皮样肉瘤细胞向脂肪方向分化。 展开更多

关键词 整合酶相互作用分子1 上皮样肉瘤 分化

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蛇床子素通过抑制髓核致炎大鼠脊髓背角CXCL1/CXCR2的表达发挥抗炎镇痛作用 被引量：12

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作者 高凤娇 杨琳 +4 位作者 张嘉明 魏明 贺秋兰 邹学农 孙来保 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第3期347-354,共8页

目的研究蛇床子素(osthole,Ost)对大鼠髓核源性神经根痛的抗炎镇痛作用。方法雄性SD大鼠60只随机分为3组:髓核致炎组(NP组,n=36)、Sham组(n=12)、Blank组(n=12),检测术前和术后3、7、14、21、28 d的50%MWT;q-PCR检测术后各时间点脊髓背... 目的研究蛇床子素(osthole,Ost)对大鼠髓核源性神经根痛的抗炎镇痛作用。方法雄性SD大鼠60只随机分为3组:髓核致炎组(NP组,n=36)、Sham组(n=12)、Blank组(n=12),检测术前和术后3、7、14、21、28 d的50%MWT;q-PCR检测术后各时间点脊髓背角CXCL1、CXCR2和TNF-α的mRNA水平,Western blot检测术后各时间点脊髓背角CXCL1/CXCR2的蛋白水平。另外雄性SD大鼠64只髓核致炎后随机均分为4组:生理盐水组(NP+NS),DMSO组(NP+DMSO),Ost组(NP+Ost),CXCL1中和抗体组(NP+AF-515),于术后d 3经硬膜外注射相应药物50μL。给药前后多个时点均检测50%MWT。于术后d 7取L5脊髓背角,通过Western blot检测各组脊髓背角CXCL1/CXCR2的蛋白水平。结果NP组术后各时间点的50%MWT较Sham组均降低(P<0.05)。NP组术后各时间点脊髓背角CX-CL1、CXCR2和TNF-α的mRNA水平均较Sham组升高(P<0.05),且NP组术后各时间点脊髓背角CXCL1/CXCR2的蛋白水平较Sham组升高(P<0.05)。NP+Ost组给药后50%MWT比给药前升高(P<0.05),NP+AF515组在给药后3 h 50%MWT升高,持续到给药后12 h(P<0.05)。NP+Ost组术后7d脊髓背角CXCL1/CXCR2蛋白表达降低(P<0.05)。结论脊髓背角CXCL1/CXCR2可能参与了大鼠髓核源性神经根痛的发生发展,蛇床子素通过抑制脊髓背角CXCL1/CXCR2的表达而缓解髓核致炎大鼠神经根性疼痛。 展开更多

关键词 蛇床子素 CXCL1 CXCR2 脊髓背角 炎性神经根痛 髓核

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蛇床子素对髓核致炎神经根痛大鼠脊髓背角p38 MAPK表达的影响 被引量：10

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作者 张嘉明 易增兴 +5 位作者 林世清 王益敏 蔡哲 魏明 孙来保 邹学农 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第2期237-243,共7页

目的研究蛇床子素(osthole,Ost)对髓核致炎神经根痛大鼠脊髓背角p38 MAPK信号相关通路表达的影响。方法♂成年SD大鼠156只随机分为5组:Blank组(n=36)、Sham组(n=36)、手术模型组(NP,n=36)、DMSO组(n=24)、蛇床子素组(Ost组,n=24),检测... 目的研究蛇床子素(osthole,Ost)对髓核致炎神经根痛大鼠脊髓背角p38 MAPK信号相关通路表达的影响。方法♂成年SD大鼠156只随机分为5组:Blank组(n=36)、Sham组(n=36)、手术模型组(NP,n=36)、DMSO组(n=24)、蛇床子素组(Ost组,n=24),检测所有大鼠术前1 d,术后1、2、6、7、12、14、21、28 d的50%机械痛阈值(mechanical withdrawal threshold,MWT)。DMSO组和Ost组于术后d2经硬膜外腔分别注射100 m L·L^(-1)DMSO和20 g·L^(-1)蛇床子素,体积均为50μL。分别于术后7、14 d取出术侧腰段脊髓背角,Western blot检测p-p38、IL^(-1)8、IL^(-1)8R蛋白的表达,q PCR检测IL^(-1)8 mRNA表达。结果与Blank组相比,Sham组在术后1 d 50%MWT降低(P<0.05),而NP组、DMSO组及Ost组术后各时点的50%MWT降低(P<0.05);术后d 7 p-p38、IL^(-1)8蛋白及IL^(-1)8 mRNA表达上调(P<0.05),而IL^(-1)8R蛋白在术后d 14表达上调(P<0.05);硬膜外给予蛇床子素后,与DMSO组相比,Ost组各个时间点的50%MWT升高,持续至术后28 d(P<0.05),同时,术后d 7伴有p-p38、IL^(-1)8蛋白及IL^(-1)8 mRNA表达下降;术后d 14,IL^(-1)8R蛋白表达降低(P<0.05);p-p38蛋白相对浓度和IL^(-1)8 mRNA含量进行相关性分析,Spearman秩相关系数R=0.9(P<0.05)。结论髓核致炎大鼠脊髓背角p-p38蛋白及IL^(-1)8可能参与了早期炎性痛形成,而IL^(-1)8R在疼痛的维持中发挥作用,蛇床子素长期有效缓解髓核致炎大鼠神经根痛,可能与抑制p38 MAPK信号相关通路有关。 展开更多

关键词 蛇床子素 脊髓背角 p38 MAPK信号通路 IL-18 IL-18R 神经根炎性痛

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微纳米生物活性玻璃诱导牙本质再矿化研究 被引量：4

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作者 唐洁吟 王刚 +2 位作者 刘聪 邹学农 陈晓峰 《无机材料学报》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2022年第4期436-444,共9页

封闭牙本质小管能有效减轻牙齿过敏症。本研究以不同粒径的微纳米生物活性玻璃球(MNBGs)为分散质、海藻酸钠–磷酸盐缓冲溶液为分散液,制备了用于牙本质脱敏治疗的MNBGs糊剂(MNBGP)。在牙本质切片表面进行体外矿化并系统评价了糊剂与牙... 封闭牙本质小管能有效减轻牙齿过敏症。本研究以不同粒径的微纳米生物活性玻璃球(MNBGs)为分散质、海藻酸钠–磷酸盐缓冲溶液为分散液,制备了用于牙本质脱敏治疗的MNBGs糊剂(MNBGP)。在牙本质切片表面进行体外矿化并系统评价了糊剂与牙本质的结合性能,以及糊剂体外诱导牙本质再矿化、封闭牙本质小管的能力。研究结果表明,不同粒径MNBGs制备的糊剂均能与牙本质界面紧密结合,粒径较小的MNBGs在脱矿牙本质切片表面分布更加均匀。MNBGP在人工唾液(AS)中能较好地诱导牙本质再矿化形成磷灰石(HA)以堵塞封闭牙本质小管,脱矿牙本质切片表面形成的HA层随矿化时间延长而增厚,矿化28 d HA层的厚度可达到5~10μm。MNBGs的尺寸影响其诱导牙本质再矿化的效果,当颗粒大小与牙本质小管直径匹配时,MNBGs可以更好地封闭牙本质小管。因此, MNBGP具有良好的治疗牙本质过敏的应用前景。 展开更多

关键词 牙本质过敏 微纳米生物活性玻璃 磷灰石 再矿化

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miR-145反向调节WT-p53对前列腺癌细胞EMT和干细胞特性的抑制作用 被引量：2

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作者 陈松 郭玮 +1 位作者 江展庆 刘琦 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2018年第4期526-531,共6页

目的通过改变miR-145在前列腺癌(PCa)细胞中的表达,揭示miR-145反向调节野生型p53(WT-p53)抑制前列腺癌细胞EMT和干细胞特性的作用机制。方法本研究采用低表达WT-p53的PCa骨转移细胞系PC-3作为研究对象,使其外源性表达WT-p53,在细胞生... 目的通过改变miR-145在前列腺癌(PCa)细胞中的表达,揭示miR-145反向调节野生型p53(WT-p53)抑制前列腺癌细胞EMT和干细胞特性的作用机制。方法本研究采用低表达WT-p53的PCa骨转移细胞系PC-3作为研究对象,使其外源性表达WT-p53,在细胞生物学层面检测其迁移、侵袭、黏附等转移相关能力的变化,在分子生物学层面检测其Fibronectin、E-Cadherin和Vimentin等EMT表征蛋白的表达水平;同时通过观察其肿瘤球的形成能力变化,检测WT-p53上调对PC-3干细胞特性的影响。最后用miR-145的拮抗分子反向验证上述过程。结果 PC-3细胞高表达外源性WT-p53后,其迁移和侵袭能力受到了显著抑制,同时其黏附能力也明显增强。在分子层面,高表达WT-p53抑制了PC-3细胞中Fibronectin和Vimentin的表达,并同时上调了E-Cadherin的表达水平,表明PC-3的EMT受到了抑制。另一方面,高表达WT-p53的PC-3细胞的肿瘤球形成能力明显下降,表明PC-3的干细胞特性得到了有效抑制。更为重要的是,miR-145的拮抗分子能够逆转WT-p53对PC-3细胞侵袭性、EMT和干性的抑制作用。结论 WT-p53的突变甚至缺失可能促进PCa的骨转移,而这一过程可能是通过(至少部分通过)抑制miR-145的表达从而促进癌细胞的EMT和干性表达来完成。 展开更多

关键词 微小RNA 前列腺癌 骨转移 上皮-间充质化 干细胞特性

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Ⅰ型胶原/海藻酸钠/透明质酸复合水凝胶用于血管组织工程细胞负载与3D培养 被引量：1

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作者 谢航 刘纯 +1 位作者 胡灏 王志伟 《材料工程》 EI CAS CSCD 北大核心 2022年第11期26-33,共8页

胶原、海藻酸钠和透明质酸是天然来源的高分子材料,具有良好的细胞相容性与生物安全性,在细胞培养、组织工程、药物负载等方面具有广泛应用。单纯的胶原力学性能较差,将胶原与海藻酸钠制备成复合水凝胶材料后,可以通过调节海藻酸钠与Ca^... 胶原、海藻酸钠和透明质酸是天然来源的高分子材料,具有良好的细胞相容性与生物安全性,在细胞培养、组织工程、药物负载等方面具有广泛应用。单纯的胶原力学性能较差,将胶原与海藻酸钠制备成复合水凝胶材料后,可以通过调节海藻酸钠与Ca^(2+)交联程度来改变水凝胶支架的力学性能和孔隙率,模拟细胞培养的力学环境和细胞微环境。本研究通过PIUMA纳米压痕仪和DHR流变仪表征Ⅰ型胶原/海藻酸钠/透明质酸水凝胶的杨氏模量和溶胶-凝胶转变温度。并将内皮细胞与间充质干细胞在水凝胶微环境内进行3D培养,倒置荧光显微镜观察细胞培养0,3,5,7 d时细胞的活力情况,表征Ⅰ型胶原/海藻酸钠/透明质酸水凝胶的细胞相容性,并在内皮细胞与间充质干细胞培养0,1,4,6 d时,观察内皮细胞的迁移、成血管情况,在培养1,6,9 d时,观察内皮细胞的生长扩散情况。结果表明:水凝胶杨氏模量为(600±81)Pa,水凝胶的溶胶-凝胶转变温度为23.2℃。细胞培养0,3,5,7 d时,活力持续增强,培养4,6 d时,观测到共培养下内皮细胞的迁移,培养1,6,9 d时,水凝胶内的内皮细胞球体持续生长扩散。本工作表明,Ⅰ型胶原/海藻酸钠/透明质酸水凝胶对内皮细胞与间充质干细胞具有良好的细胞相容性,可用于细胞3D培养的理想支架材料。水凝胶的杨氏模量和溶胶-凝胶转变温度对细胞活力无损害,可作为研究血管新生的相关体外模型,在血管组织工程研究中具有重要的应用前景。 展开更多

关键词 细胞3D培养 Ⅰ型胶原 海藻酸钠 水凝胶微环境

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