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快速检测技术在果蔬食品安全控制上的研究应用进展 被引量:7
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作者 杨武英 孙远明 +1 位作者 周杨 吴民富 《安徽农业科学》 CAS 2012年第1期147-149,共3页
介绍了目前我国果蔬类食品中存在的主要食品安全问题,综述了化学比色、酶抑制技术、生物传感器、免疫学、分子生物学、生物芯片、ATP生物发光等食品安全快速检测技术在果蔬食品安全控制上的研究应用现状及发展趋势。
关键词 果蔬食品 食品安全 快速检测 研究应用
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抗克伦特罗单链抗体-碱性磷酸酶融合蛋白表达条件的初步研究 被引量:2
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作者 刘细霞 王弘 +4 位作者 杨金易 张宏斌 雷红涛 沈玉栋 孙远明 《食品工业科技》 CAS CSCD 北大核心 2010年第9期161-165,共5页
初步研究抗克伦特罗单链抗体-碱性磷酸酶融合蛋白(CBLscFv-AP)的表达条件,提高CBLscFv-AP融合蛋白的表达量。采用液体发酵法培养抗克伦特罗单链抗体-碱性磷酸酶融合蛋白(CBLscFv-AP)基因工程菌,研究不同宿主菌、初始pH、诱导时期、诱导... 初步研究抗克伦特罗单链抗体-碱性磷酸酶融合蛋白(CBLscFv-AP)的表达条件,提高CBLscFv-AP融合蛋白的表达量。采用液体发酵法培养抗克伦特罗单链抗体-碱性磷酸酶融合蛋白(CBLscFv-AP)基因工程菌,研究不同宿主菌、初始pH、诱导时期、诱导时间和培养基对CBLscFv-AP融合蛋白表达量的影响以及重组质粒的稳定性。选用E·coliBL21(DE3)pLysS为宿主菌,在初始pH为7·4的LB培养基中培养至A600nm为0·8~0·9时,诱导表达8h,为CBLscFv-AP融合蛋白最佳表达条件。而且重组质粒pBV220-scFv-phoA具有较好的结构稳定性。在该表达条件下,提高了CBLscFv-AP融合蛋白的表达量,为进行大规模发酵生产CBLscFv-AP融合蛋白奠定基础。 展开更多
关键词 克伦特罗 单链抗体 碱性磷酸酶 融合蛋白 表达条件
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大鼠尿液中壬基酚的代谢轮廓 被引量:9
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作者 王伟华 柳春红 +4 位作者 孙远明 林峰 张明明 王兆斌 张敏仪 《高等学校化学学报》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2011年第10期2280-2285,共6页
运用代谢组学方法研究了壬基酚对大鼠尿液代谢的影响,通过高效液相色谱-飞行时间质谱技术建立了大鼠尿样的代谢指纹图谱,用主成分分析法分析给药组与对照组代谢物指纹图谱的差异,通过t检验选取潜在的生物标志物及效应标志物,并结合代谢... 运用代谢组学方法研究了壬基酚对大鼠尿液代谢的影响,通过高效液相色谱-飞行时间质谱技术建立了大鼠尿样的代谢指纹图谱,用主成分分析法分析给药组与对照组代谢物指纹图谱的差异,通过t检验选取潜在的生物标志物及效应标志物,并结合代谢物数据库检索对其进行鉴定.结果表明,壬基酚给药后,尿液中含量变化显著的成分苯基葡萄糖苷酸、L-高半胱氨酸、3-硝基丙酸、肌酸酐、左旋肉碱及5-羟色胺等构成了大鼠尿液代谢的轮廓,它们在生物体内的变化可能对生殖系统、免疫系统、神经系统及脂肪的代谢造成一定的影响,从代谢的角度解释了环境雌激素壬基酚对生物体的危害,为毒理学研究提供了依据. 展开更多
关键词 壬基酚 代谢组学 高效液相色谱-飞行时间质谱 生物标志物
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基于定点突变的抗克百威单链抗体的亲和力成熟 被引量:4
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作者 邓龙 肖治理 +6 位作者 董洁娴 王弘 杨武英 谢曦 杨金易 沈玉栋 孙远明 《高等学校化学学报》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2012年第11期2486-2491,共6页
为获得亲和力更高的抗克百威(CBF)单链抗体(scFv),从抗CBF scFv氨基酸序列出发,通过同源模建获得抗体模型,找出抗体中的活性口袋区域,进而将小分子药物与抗体进行分子对接,发现疏水作用和氢键对于抗体亲和力具有重要作用.进一步对口袋... 为获得亲和力更高的抗克百威(CBF)单链抗体(scFv),从抗CBF scFv氨基酸序列出发,通过同源模建获得抗体模型,找出抗体中的活性口袋区域,进而将小分子药物与抗体进行分子对接,发现疏水作用和氢键对于抗体亲和力具有重要作用.进一步对口袋内亲水氨基酸残基HArg40和LHis38进行模拟替换,再进行分子对接分析,发现当以亮氨酸为突变氨基酸时,对接评分最高.在此基础上,通过构建突变scFv基因及可溶性表达,采用ELISA法对进化后的单链抗体(evoscFv)进行了鉴定.结果表明,evoscFv对CBF的IC50值为18.11μg/L,低于野生型抗体的27.25μg/L,亲和解离常数Kd为4.06×10-8mol/L,相对亲和力比野生型scFv提高了2.23倍,说明通过分子对接分析及对抗体活性口袋中氨基酸残基进行替换,获得了一个亲和力更高的突变体抗体. 展开更多
关键词 克百威 单链抗体 分子对接 定点突变 亲和力成熟
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