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土槿皮乙酸诱导脑胶质瘤细胞株U87阻滞于M期并发生凋亡 被引量:5
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作者 何露 温创宇 +3 位作者 王慧慧 杨湘玲 刘焕亮 李中 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第9期1574-1578,共5页
目的:通过研究土槿皮乙酸对脑胶质瘤细胞株U87增殖与凋亡的影响,探讨土槿皮乙酸对脑胶质瘤的潜在应用价值。方法:用不同浓度土槿皮乙酸处理U87细胞,并于不同时点观察细胞形态改变;采用MTS法对U87细胞进行细胞活力测定;采用流式细胞术和W... 目的:通过研究土槿皮乙酸对脑胶质瘤细胞株U87增殖与凋亡的影响,探讨土槿皮乙酸对脑胶质瘤的潜在应用价值。方法:用不同浓度土槿皮乙酸处理U87细胞,并于不同时点观察细胞形态改变;采用MTS法对U87细胞进行细胞活力测定;采用流式细胞术和Western blot法检测土槿皮乙酸对细胞周期的影响;采用Annexin V/PI双染流式细胞术检测细胞凋亡;利用Western blot法检测caspase通路相关蛋白(cleaved PARP、caspase-3、procaspase-9和caspase-8)的变化情况。结果:土槿皮乙酸明显抑制脑胶质瘤U87细胞的活力,能使细胞阻滞于M期,并通过caspase通路诱导细胞发生凋亡。结论:土槿皮乙酸能使脑胶质瘤细胞株U87细胞阻滞于M期,并诱导其凋亡。 展开更多
关键词 脑胶质瘤 土槿皮乙酸 细胞周期 细胞活力 细胞凋亡
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基于特征解构策略识别与颅脑损伤患者日常生活能力受损相关的急性期特征 被引量:5
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作者 刘迎 王婕妤 +4 位作者 朱陈淮玉 林心意 孙艺航 时燕薇 曾燕妮 《中山大学学报(医学科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2023年第6期949-957,共9页
【目的】寻找与创伤性颅脑损伤(TBI)预后相关的急性期特征。【方法】回顾性分析354名TBI患者的人口学、急性期和慢性期特征,使用传统的基于关联分析和预测模型的策略以及一种基于特征解构的创新的研究策略,识别与预后指标-慢性期日常生... 【目的】寻找与创伤性颅脑损伤(TBI)预后相关的急性期特征。【方法】回顾性分析354名TBI患者的人口学、急性期和慢性期特征,使用传统的基于关联分析和预测模型的策略以及一种基于特征解构的创新的研究策略,识别与预后指标-慢性期日常生活能力(ADL)受损相关的急性期特征。特征解构策略通过使用LASSO构建基于其他非ADL的慢性期指标预测ADL的模型,找到解释TBI人群ADL的关键慢性期特征维度,再分析与这些特征维度显著相关的人口学、急性期变量。【结果】特征解构策略将ADL在TBI人群中解构为“受伤后脑萎缩”“自知力受损程度”“四肢乏力”等慢性期特征维度,同时首次揭示了急性期特征与具体慢性期损伤特征的联系,如TBI患者昏迷时间长和GCS评分低时,慢性期“近记忆受损”的风险最大[scaled coma time OR95%CI=94.288(35.095,273.231);scaled GCS OR95%CI=0.068(0.030,0.147)];TBI患者有脑积水时,慢性期“自知力受损”和“定向力障碍”的风险最大[insight impairment OR95%CI=6.760(3.653,12.855);disorientation OR95%CI=6.538(3.530,12.490)]。所有策略均表明ADL受损最大的急性期风险因素为昏迷时间长、GCS评分低和有脑积水。【结论】本研究提出了一种新的建立TBI急性期特征和预后间关联的研究策略,识别了与预后指标ADL相关的人口学和急性期特征。 展开更多
关键词 创伤性颅脑损伤 日常生活能力 预测模型 LASSO 急性期
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转突变型A53Tα-突触核蛋白基因的帕金森模型小鼠中脑的全基因组甲基化测序分析 被引量:3
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作者 吴婷 刘琳 +1 位作者 黎昭 林贤 《中山大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2020年第1期53-59,共7页
[目的]研究帕金森氏病(PD)致病基因SNCA在A53T位置突变后对转基因小鼠中脑多巴胺,神经元DNA甲基化修饰的影响。[方法]分别取转突变的人源α-突触核蛋白(hα-syn)即hA53Tα-syn基因小鼠和对照组小鼠的中脑组织,采用重亚硫酸盐测序法(BS-s... [目的]研究帕金森氏病(PD)致病基因SNCA在A53T位置突变后对转基因小鼠中脑多巴胺,神经元DNA甲基化修饰的影响。[方法]分别取转突变的人源α-突触核蛋白(hα-syn)即hA53Tα-syn基因小鼠和对照组小鼠的中脑组织,采用重亚硫酸盐测序法(BS-seq)分别对12月龄的转基因小鼠和非转基因(nTg)小鼠进行全基因组甲基化分析,随后筛选出差异甲基化区域(D MR)用于GO富集分析。[结果]通过对比分析,我们总计发现481个DMR,其中高甲基化与低甲基化DMR分别有257和224个,包括与泛素降解途径相关的Ubqln2、HECTD4、Rnf157基因,丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶PINK1等基因。富集结果显示,差异甲基化基因总共映射到545个GO子条目,且主要富集于解剖结构发育、树突发育、神经系统发育、神经元投射等条目。[结论]帕金森致病基因SNCA在A53T位置的突变可诱导小鼠中脑多巴胺神经元DNA甲基化改变。 展开更多
关键词 帕金森氏病 Α-突触核蛋白 甲基化修饰 全基因组
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高密度脂蛋白的水平与功能 被引量:7
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作者 莫志伟 欧志君 区景松 《生理科学进展》 CAS CSCD 北大核心 2018年第4期247-252,共6页
传统观念在发生变化,胆固醇长期被认为是损伤心血管系统的重要危害因素,需要控制摄入,但最近这个观念被修改。过往认为高密度脂蛋白(high density lipoprotein,HDL)可保护心血管,但通过升高血浆高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)水平来降低心... 传统观念在发生变化,胆固醇长期被认为是损伤心血管系统的重要危害因素,需要控制摄入,但最近这个观念被修改。过往认为高密度脂蛋白(high density lipoprotein,HDL)可保护心血管,但通过升高血浆高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)水平来降低心血管事件的发生率并没有得到理想的效果。遗传学研究发现影响HDL-C水平的基因座的单核苷酸多态性与冠心病的风险无明显相关性。与HDL功能和活性密切相关分子的遗传变异对心血管疾病的意义更大,并且多种表观遗传分子参与HDL功能的调控,与HDL-C水平相比,HDL的功能可能更关键。冠心病、糖尿病、慢性肾病、类风湿性关节炎和心脏外科手术等疾病状态下HDL中的多种成分发生改变,其胆固醇逆向转运、抗炎、抗氧化、内皮保护等正常功能受到不同程度的损害,导致其正常心血管保护作用丧失,甚至损害心血管。因此,探究疾病状态下HDL对心血管损伤的具体机制有利于心血管疾病的防治。 展开更多
关键词 高密度脂蛋白 高密度脂蛋白胆固醇 胆固醇
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奇正消痛贴抑制完全弗氏佐剂引起的炎性痛和神经炎症 被引量:8
5
作者 周利君 桂文珊 刘先国 《中国疼痛医学杂志》 CAS CSCD 2016年第4期250-258,共9页
目的:观察奇正消痛贴膏(qizheng pain-relieving plaster,QZPRP)对慢性炎症痛过程中背根神经节(dorsal root ganglion,DRG)和脊髓背角免疫活动异常的影响。方法:成年SD大鼠足跖注射完全弗氏佐剂(complete freund's adjuvant,CFA)建... 目的:观察奇正消痛贴膏(qizheng pain-relieving plaster,QZPRP)对慢性炎症痛过程中背根神经节(dorsal root ganglion,DRG)和脊髓背角免疫活动异常的影响。方法:成年SD大鼠足跖注射完全弗氏佐剂(complete freund's adjuvant,CFA)建立炎性痛模型。建模后3 d患侧足跖分别包扎QZPRP。用up-down方法和Plantar test分别检测机械痛敏和热痛敏。用ELISA,免疫荧光法和Western blot检测免疫活动。结果:足底使用QZPRP可明显抑制CFA引起的机械痛敏和热痛敏,并促进水肿的恢复,而单纯使用溶剂和药粉无效。QZPRP抑制CFA引起的DRG巨噬细胞浸润、脊髓背角小胶质细胞和星形胶质细胞的激活、DRG和脊髓背角TNF-α上调和SFKs磷酸化。注射CFA上调DRG和脊髓背角的IL-10,QZPRP使其进一步升高。结论:皮肤施加QZPRP可通过抑制痛觉通路的异常免疫活动发挥抗炎镇痛作用,其免疫调节的机制尚有待研究。 展开更多
关键词 慢性炎性痛 奇正消痛贴膏 Src-家族激酶 巨噬细胞 肿瘤坏死因子 白介素-10
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源于尿道上皮细胞的诱导多能干细胞构建阿尔茨海默病研究模型 被引量:2
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作者 王旎 刘舜杰 +3 位作者 孟洋阳 雷清锋 韦睿 李中 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第3期487-494,共8页
目的:阿尔茨海默病(AD)是常见的神经退行性疾病之一,目前仍未有理想的研究模型,这使得其发病机制尚不完全清楚。因此,本研究将利用非侵袭性方法收集的尿道上皮细胞重编程为诱导多能干细胞(iPSC)从而构建AD疾病研究模型。方法:本研究选取... 目的:阿尔茨海默病(AD)是常见的神经退行性疾病之一,目前仍未有理想的研究模型,这使得其发病机制尚不完全清楚。因此,本研究将利用非侵袭性方法收集的尿道上皮细胞重编程为诱导多能干细胞(iPSC)从而构建AD疾病研究模型。方法:本研究选取3名男性AD患者作为实验组和2名正常男性作为对照者组,通过分离实验组和对照组的尿道上皮细胞,并将其重编程成为iPSC,利用碱性磷酸酶染色、RT-qPCR及畸胎瘤形成实验等验证其干细胞特性。随后将iPSC定向神经分化成为神经细胞,采用ELISA方法验证AD特异性标志物的表达水平。同时,将BACE1基因在iPSC细胞系中过表达,采用ELISA方法验证AD特异性标志物的表达水平,以上实验每组研究对象均进行2~3次重复实验。结果:尿道上皮细胞被成功地重编程成iPSC,且具有分化为三种不同胚层来源组织的多能性。定向分化患者来源的神经细胞分泌AD标志物的水平与正常对照比较没有显著差异(P>0.05)。但是,过表达BACE1后的iPSC细胞系和分化的神经细胞,AD相关标志物表达水平较对照组显著增高(P<0.05),说明该细胞系作为AD模型的可行性。结论:本研究成功地将AD患者的尿道上皮细胞重编程为iPSC,并将其与正常来源的iPSC进行比较,观察到患者来源的iPSC具有相对正常的蛋白表达谱,提示该细胞的临床应用价值。同时,过表达BACE1基因的iPSC能检测到高表达的AD相关标志物,提示该细胞可以作为研究AD发病机制的细胞模型。 展开更多
关键词 阿尔茨海默病 尿道上皮细胞 诱导多能干细胞 神经分化 BACE1基因
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构建具有突触传递潜能的iPSC源性抑制性神经网络组织 被引量:2
7
作者 彭历芝 位庆帅 +5 位作者 马瑗锾 许金海 蒋斌 曾园山 曾湘 丁英 《中山大学学报(医学科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2023年第1期18-25,共8页
【目的】利用人诱导多能干细胞(hiPSCs)定向分化为γ-氨基丁酸能(GABA)神经前体细胞后种植到脱细胞视神经(DON)材料内,以构建出具有突触形成潜能的hiPSC源性抑制性神经网络组织。为研究与治疗修复中枢神经系统损伤提供一种新的组织工程... 【目的】利用人诱导多能干细胞(hiPSCs)定向分化为γ-氨基丁酸能(GABA)神经前体细胞后种植到脱细胞视神经(DON)材料内,以构建出具有突触形成潜能的hiPSC源性抑制性神经网络组织。为研究与治疗修复中枢神经系统损伤提供一种新的组织工程产品。【方法】采用分步定向诱导和组织工程构建技术相结合的方法。将hiPSCs体外定向诱导为GABA能神经前体细胞(hNPCs)后,种植于DON材料上三维培养,在特定神经元诱导环境下,将其进一步分化为GABA能神经元。应用透射电镜和全细胞膜片钳技术分别检测hiPSCs分化的神经元之间能否形成类突触结构,以及这些神经元是否具有自发性抑制性突触后电流。从结构与功能角度证实这些hiPSCs分化的神经元可形成具有突触传递潜能的抑制性神经网络组织。【结果】在体外将hiPSCs成功诱导出GABA能表型的抑制性神经元,且其培养28 d仍保持良好活力。透射电镜下,观察到三维材料上hiPSC源性神经细胞突起之间形成许多的细胞连接,其中一些为类突触样结构,表现为:一侧细胞突起的细胞膜稍增厚并且其内侧面胞质含有少量囊泡,形成类突触前成分的结构;其对侧为另一个细胞突起的细胞膜局部增厚,形成类突触后膜的结构。全细胞膜片钳检测可记录到已分化的hiPSC源性神经细胞具有产生动作电位和自发性抑制性突触后电流的能力。【结论】本研究结果表明,在体外诱导hiPSCs定向分化为GABA能神经前体细胞后种植到DON材料内三维培养,可成功构建成具有突触传递潜能的hiPSC源性抑制性神经网络组织,这将为后期研究与治疗中枢神经系统损伤提供一种新型干细胞组织工程来源的神经组织。 展开更多
关键词 人诱导多能干细胞 Γ-氨基丁酸能神经元 神经网络组织
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电针督脉经穴联合成体干细胞移植策略在修复脊髓损伤中的研究进展 被引量:8
8
作者 曾园山 《中山大学学报(医学科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2017年第6期801-807,847,共8页
本文以电针督脉经穴、内源性神经营养因子表达、移植的成体干细胞源性神经元与脊髓宿主神经元环路整合修复脊髓损伤为主线,概述了电针督脉经穴联合成体干细胞移植改善脊髓损伤组织微环境重建神经元传导通路机制—电针督脉经穴刺激全横... 本文以电针督脉经穴、内源性神经营养因子表达、移植的成体干细胞源性神经元与脊髓宿主神经元环路整合修复脊髓损伤为主线,概述了电针督脉经穴联合成体干细胞移植改善脊髓损伤组织微环境重建神经元传导通路机制—电针督脉经穴刺激全横断脊髓损伤或脊髓脱髓鞘损伤的大鼠脊膜支传入神经纤维将信息传入脊髓,激活脊髓组织细胞合成和分泌神经营养素-3(NT-3),介导表达NT-3受体Trk C的外源性神经干细胞(NSC)和骨髓间充质干细胞(MSC)在全横断脊髓损伤/移植处或脊髓脱髓鞘损伤/移植处存活、分化和迁移,替换和保护受损伤的宿主神经元、改善受损伤组织微环境、促进神经纤维再生及其髓鞘形成、改善大脑皮层运动诱发电位以及瘫痪肢体的运动功能。 展开更多
关键词 电针 督脉经穴 神经营养素-3 神经干细胞 骨髓间充质干细胞 移植 脊髓损伤 脊髓脱髓鞘
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食欲素B增强外膝体纤维投射至视皮层第6b层锥体细胞的突触传递 被引量:1
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作者 童昕 黄梦瑶 蒋斌 《中山大学学报(医学科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2020年第2期201-209,共9页
[目的]探究食欲素B(Orexin B)调控外膝体(LGN)纤维投射至视皮层(visual cortex,VC)第6层b亚层(L6b)中的食欲素B敏感神经元(Orexin敏感神经元)的突触传递作用.[方法]选用P25~P30的C57小鼠,脑立体定位注射CTB555或者ChR2-EGFP,分别标记VC... [目的]探究食欲素B(Orexin B)调控外膝体(LGN)纤维投射至视皮层(visual cortex,VC)第6层b亚层(L6b)中的食欲素B敏感神经元(Orexin敏感神经元)的突触传递作用.[方法]选用P25~P30的C57小鼠,脑立体定位注射CTB555或者ChR2-EGFP,分别标记VC中L6b反馈投射到LGN的神经细胞和源自LGN前馈投射至L6b的神经纤维.膜片钳的方法记录CTB555标记的L6b中的神经细胞的突触后电流(EPSC),电刺激皮层白质或蓝光刺激ChR2-EGFP(Channelrhodopsin 2-Enhanced Green Fluorescent Protein)标记的LGN投射到VC的神经纤维.[结果]从L6b反馈投射至LGN的神经细胞中,92.5%为锥体神经元,且这些锥体神经细胞中有63.3%的细胞对Orexin B受体激动剂敏感.电刺激或光刺激LGN前馈投射至L6b的神经纤维,Orexin B增强L6b中Orexin敏感细胞的突触后NMDAR电流[电刺激:(125.1±3.7)%,光刺激:(123.8±3.8)%,在OX2R阻断剂的存在下,Orexin B对突触后电流振幅的效应消失,具有明显统计学意义,P<0.05],因此,OrexinB增强LGN——Orexin敏感神经细胞之间的突触传递.[结论]Orexin B增强外膝体(LGN)纤维投射至视皮层L6b中的锥体细胞之间的突触传递. 展开更多
关键词 视皮层第6b层 食欲素B 外膝体 兴奋性突触传递
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兴奋性hiPSC源性类神经网络组织的构建
10
作者 苏琪淞 李戈 +5 位作者 许金海 蒋斌 位庆帅 曾湘 曾园山 朱平 《中山大学学报(医学科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2023年第4期625-633,共9页
【目的】将人诱导多能干细胞源性神经前体细胞(hiPSC-NPCs)种植于去细胞视神经(DON)上,在体外构建一种具有突触传递功能的类神经网络组织,为神经组织损伤的修复提供一种有效途径。【方法】通过定向诱导和组织工程技术,联合应用hiPSCs和3... 【目的】将人诱导多能干细胞源性神经前体细胞(hiPSC-NPCs)种植于去细胞视神经(DON)上,在体外构建一种具有突触传递功能的类神经网络组织,为神经组织损伤的修复提供一种有效途径。【方法】通过定向诱导和组织工程技术,联合应用hiPSCs和3D DON支架,构建一种新的类神经网络组织。定向诱导人诱导多能干细胞(hiPSCs)向人神经前体细胞(hNPCs)及神经元方向分化,使用免疫荧光染色鉴定细胞分化效率。制备3D DON支架,借助扫描电镜、Tunnel染色,鉴定支架形貌及细胞相容性。将诱导的hiPSC-NPCs种植于DON支架中,借助免疫荧光染色、扫描电镜、透射电镜和膜片钳对构建的类神经网络组织进行形态学观察和功能学鉴定。【结果】①免疫细胞化学染色结果提示,诱导的hiPSC-NPCs在体外大部分向神经元方向分化,成功构建了一种以神经元为主的神经网络。②扫描电镜和免疫组织化学结果提示,在体外成功构建了一种以兴奋性神经元为主的类神经网络组织。③免疫组织化学染色、透射电镜和膜片钳结果提示,构建的类神经网络组织能够传递兴奋性突触信息。【结论】利用天然来源的具有均匀孔道分布的DON生物支架材料和hiPSC-NPCs的有机结合,构建了一种以兴奋性神经元为主的具有突触传递功能的类神经网络组织,这种神经网络可作为脊髓损伤(spinal cord injury,SCI)等神经组织损伤后组织替换疗法的有利工具,具有广阔的临床应用前景。 展开更多
关键词 人诱导多能干细胞源性神经前体细胞 去细胞视神经 突触 兴奋性神经元 类神经网络组织
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食欲素B增强视皮层第2/3层传入到第6b层锥体神经细胞的突触传递
11
作者 黄梦瑶 童昕 蒋斌 《中山大学学报(医学科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2020年第3期379-388,共10页
【目的】研究小鼠视皮层第6b层中对食欲素(Orexin B)敏感的神经元的细胞类型以及食欲素调控其敏感神经元中来自第2/3层传入的突触传递和机制。【方法】用生物细胞素(biocytin)标记小鼠视皮层第6b层中被Orexin B受体激动剂直接兴奋的神... 【目的】研究小鼠视皮层第6b层中对食欲素(Orexin B)敏感的神经元的细胞类型以及食欲素调控其敏感神经元中来自第2/3层传入的突触传递和机制。【方法】用生物细胞素(biocytin)标记小鼠视皮层第6b层中被Orexin B受体激动剂直接兴奋的神经细胞,双光子显微镜下观察这些神经元的细胞形态;外膝体注射逆行标记荧光染料(CTB555)标记小鼠视皮层第6b层中反馈投射到外膝体的神经元,电刺激视皮层第2/3层传递到第6b中由CTB555标记的、反馈投射到外膝体的神经元的传入神经通路,并记录兴奋性突触后电流(EPSC)。【结果】在视皮层第6b层中58.1%的锥体细胞和52.9%的多极细胞是Orexin B敏感的神经元;Orexin B能增强第6b层中经CTB555标记的、反馈投射到外膝体的神经元中来自第2/3层的传入纤维的突触传递。这种增强作用可分别被Orexin B2型受体阻断剂[Ctr:(119.33±2.51)%,n=15 cells,7 mice;TCS OX229:(103.17±2.75)%,n=30 cells,10 mice;P<0.001]、磷脂酶C抑制剂[Ctr:(125.51±1.4)%,n=11 cells,5 mice;U173332:(103.89±1.04)%,n=10 cells,5 mice;P<0.001]、细胞内Ca2+螯合剂[Ctr:(125.54±1.53)%,n=11 cells,5 mice;BAPTA:(102.86±1.7)%,n=9 cells,4 mice;P<0.001]和mGluR5受体拮抗剂所阻断[Ctr:(126.14±3.87)%,12 cells,5 mice;MPEP:(106.32±2.65)%,n=12 cells,6 mice;P<0.001]。【结论】小鼠视觉皮层第6b层中,大部分锥体神经元和多极神经元是Orexin B敏感的神经元,第6b层中反馈投射到外膝体的神经元细胞膜上的食欲素受体被激活后可以通过激活细胞内磷脂酶C的活性而增强来自第2/3层的传入的突触传递。 展开更多
关键词 视皮层 第6b层 OREXIN B OREXIN B敏感神经元 兴奋性突触传递
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