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uPAR在类风湿关节炎成纤维样滑膜细胞中的功能及机制 被引量:6
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作者 刘岩 潘云峰 +2 位作者 方霖楷 郭欣 吴云婷 《中山大学学报(医学科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2014年第2期200-206,共7页
【目的】采用RNA干扰(RNAi)技术阻断类风湿关节炎(RA)成纤维样滑膜细胞(FLS)尿激酶型纤溶酶原激活物受体(uPAR)基因的表达,探讨uPAR基因沉默后对RA-FLS功能产生的影响及有关机制。【方法】收集行关节置换术或滑膜清理术的RA患者的滑膜组... 【目的】采用RNA干扰(RNAi)技术阻断类风湿关节炎(RA)成纤维样滑膜细胞(FLS)尿激酶型纤溶酶原激活物受体(uPAR)基因的表达,探讨uPAR基因沉默后对RA-FLS功能产生的影响及有关机制。【方法】收集行关节置换术或滑膜清理术的RA患者的滑膜组织,组织块法培养RA-FLS。通过阳离子脂质体转染的方法,转染体外合成的特异性uPARsiRNA;利用荧光定量PCR法和Western blotting法检测uPAR沉默效果;CCK8法检测细胞增殖抑制率;流式细胞技术检测细胞周期改变;Transwell趋化小室测定细胞的迁移能力;Western blotting技术分析沉默uPAR基因对RA-FLS中PI3K/AKT通路的影响。【结果】uPAR-siRNA能有效阻断RA-FLS中uPAR基因在mRNA和蛋白水平上的表达。沉默uPAR基因后,细胞48、72、96 h增殖抑制率分别为(17.51±2.27)%、(28.62±4.82)%、(22.91±5.78)%,显著高于对照组(P<0.05);uPARsiRNA干扰后,被阻滞于G0/G1期的细胞增加,而S和G2/M期的细胞减少;Transwell趋化小室结果显示:与对照组相比,特异性干扰组的RA-FLS迁移细胞数(35±11)相比空白对照组(138±21)和NC-siRNA组(136±19)明显减少(P<0.05);转染后的RA-FLS相对于对照组,PI3K、AKT、GSK3β的磷酸化水平显著降低(P<0.05)。【结论】uPAR在RA-FLS的增殖、周期及迁移中起重要作用,这可能与其对PI3KAKT通路的激活有关。 展开更多
关键词 UPAR 类风湿关节炎 成纤维样滑膜细胞 RNA干扰 增殖 迁移 PI3K/AKT
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强直性脊柱炎患者外周血单个核细胞亲环素A的表达及意义 被引量:2
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作者 黄志祥 邓伟明 +3 位作者 谭锦辉 曾昭球 邱可为 李天旺 《中山大学学报(医学科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2013年第6期922-925,共4页
【目的】探讨强直性脊柱炎(AS)患者外周血单个核细胞(PBMC)亲环素A(CyPA)表达水平及其与病情活动性指标的联系。【方法】纳入年龄与性别相匹配的新诊断AS患者及健康志愿者(HV)各30例,于空腹状态采集血样,并记录患者的毕氏AS疾病活动指数... 【目的】探讨强直性脊柱炎(AS)患者外周血单个核细胞(PBMC)亲环素A(CyPA)表达水平及其与病情活动性指标的联系。【方法】纳入年龄与性别相匹配的新诊断AS患者及健康志愿者(HV)各30例,于空腹状态采集血样,并记录患者的毕氏AS疾病活动指数(BASDAI)、毕氏AS功能指数(BASFI)、红细胞沉降率(ESR)及C反应蛋白(CRP)。Western blot及半定量逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测PBMC中CyPA蛋白及mRNA表达,Pearson相关分析了解AS患者PBMC中CyPA蛋白水平与病情活动性指标的相关性。【结果】AS患者PBMC中CyPA蛋白及mRNA半定量值分别为0.98±0.28及0.77±0.10,均显著高于HV的0.30±0.21及0.17±0.11(P<0.05)。Pearson相关分析则提示AS患者PBMC中CyPA蛋白与ESR(r=0.521,P<0.05)及CRP(r=0.394,P<0.05)均呈正相关。【结论】AS患者PBMC中CyPA表达较HV上调,且与ESR及CRP密切关联,提示CyPA可能在AS发病及炎症活动过程中起调节作用。 展开更多
关键词 强直性脊柱炎 外周血单个核细胞 亲环素A 红细胞沉降率 C反应蛋白
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