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高糖诱导人肾小球系膜细胞CTGF启动子去甲基化及基因表达
被引量：
6
1
作者
易斌
张浩
+3 位作者
周宏
蔡旭
孙剑
刘妍
《细胞与分子免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2011年第7期747-750,共4页
目的:观察高糖刺激和甲基化抑制剂5-氮杂-2-脱氧胞苷(5-aza-dCyd)对人肾小球系膜细胞(HMCs)结缔组织生长因子(CTGF)基因启动子的甲基化水平和基因表达的影响。方法:用不同终浓度的5-aza-dCyd(0、1、2、5、10μmol/L)刺激HMCs,于48h提取...
目的:观察高糖刺激和甲基化抑制剂5-氮杂-2-脱氧胞苷(5-aza-dCyd)对人肾小球系膜细胞(HMCs)结缔组织生长因子(CTGF)基因启动子的甲基化水平和基因表达的影响。方法:用不同终浓度的5-aza-dCyd(0、1、2、5、10μmol/L)刺激HMCs,于48h提取细胞基因组DNA、总RNA和蛋白质;用不同浓度的葡萄糖(5 mmol/L、30 mmol/L)刺激细胞,于0、24、48、72 h收集细胞;应用甲基化特异性PCR(MSP)检测细胞CTGF基因启动子甲基化状态,RT-PCR检测CTGFmRNA表达,Western blot检测CTGF蛋白表达。结果:不同浓度5-aza-dCyd处理HMCs 48 h后,0、1、2、5μmol/L5-aza-dCyd组CTGF基因启动子呈半甲基化状态,均有微量CTGFmRNA和蛋白的表达,差异无统计学意义(均P>0.05);10μmol/L5-aza-dCyd组甲基化条带阴性,呈完全去甲基化状态,CTGF mRNA和蛋白表达均增加,与0μmol/L组比较差异有统计学意义(P<0.01)。5 mmol/L葡萄糖组HMCs各时间点CTGF基因启动子均呈半甲基化状态,表达微量CTGFmRNA和蛋白质,差异无统计学意义(均P>0.05);30 mmol/L葡萄糖组CTGF启动子在0 h呈半甲基化状态,甲基化条带较强;24 h甲基化条带减弱,48 h甲基化条带阴性,呈完全去甲基化状态,24 h、48 h、72 h CTGF mRNA和蛋白质表达均增加,与5 mmol/L组相应时间点比较差异有统计学意义(均P<0.05)。结论:高糖和甲基化抑制剂5-aza-dCyd均可诱导人肾小球系膜细胞CTGF基因启动子的去甲基化并增加CTGF的表达,提示DNA甲基化可能参与了人肾小球系膜细胞CTGF基因表达的调控。
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关键词
高糖
系膜细胞
结缔组织生长因子
DNA甲基化
5-氮杂-2′-脱氧胞苷
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职称材料
丹参素对高糖刺激腹膜间皮细胞分泌纤维连接蛋白和Ⅰ型胶原的影响
被引量：
7
2
作者
张浩
徐奕
+4 位作者
王建文
张柯
易斌
刘妍
蔡旭
《中南大学学报（医学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2011年第1期44-50,共7页
目的:探讨丹参素对高糖刺激培养的腹膜间皮细胞(HPMCs)分泌纤维连接蛋白(FN)和I型胶原(Col-I)的影响。方法:以高糖刺激培养HPMCs,分别加用浓度为10,5,2.5,1.25,0.625mg/L的丹参素进行干预,并选取浓度为10mg/L的丹参素干预0,12,24,48,72h...
目的:探讨丹参素对高糖刺激培养的腹膜间皮细胞(HPMCs)分泌纤维连接蛋白(FN)和I型胶原(Col-I)的影响。方法:以高糖刺激培养HPMCs,分别加用浓度为10,5,2.5,1.25,0.625mg/L的丹参素进行干预,并选取浓度为10mg/L的丹参素干预0,12,24,48,72h;应用RT-PCR,ELISA法检测FN和Col-I蛋白及mRNA表达;RT-PCR、免疫荧光法检测血红素氧化酶-1(HO-1),内皮素-1(ET-1)蛋白及mRNA表达。结果:丹参素可显著降低高糖诱导的HPMCs细胞外基质FN和Col-I蛋白及mRNA表达,呈浓度依赖性及时间依赖性;丹参素可抑制高糖诱导的ET-1蛋白及mRNA表达,增加诱导型抗氧化酶HO-1蛋白及mRNA表达,呈浓度依赖性;丹参素不同时间组ET-1和HO-1蛋白及mRNA表达差异无统计学意义(P>0.05)。结论:丹参素可减少高糖诱导的腹膜间皮细胞FN和Col-I的分泌,其作用机制可能与拮抗氧化应激状态有关。
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关键词
氧化应激
纤维连接蛋白
I型胶原
内皮素-1
血红素氧化酶-1
丹参素
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职称材料
题名
高糖诱导人肾小球系膜细胞CTGF启动子去甲基化及基因表达
被引量：
6
1
作者
易斌
张浩
周宏
蔡旭
孙剑
刘妍
机构
中南大学湘雅三
医院
肾
内科
益阳市中心
医院
肾
内科
广东省第二人民医院肾内科
出处
《细胞与分子免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2011年第7期747-750,共4页
基金
教育部高等院校博士点基金新教师项目(20080533l159)
文摘
目的:观察高糖刺激和甲基化抑制剂5-氮杂-2-脱氧胞苷(5-aza-dCyd)对人肾小球系膜细胞(HMCs)结缔组织生长因子(CTGF)基因启动子的甲基化水平和基因表达的影响。方法:用不同终浓度的5-aza-dCyd(0、1、2、5、10μmol/L)刺激HMCs,于48h提取细胞基因组DNA、总RNA和蛋白质;用不同浓度的葡萄糖(5 mmol/L、30 mmol/L)刺激细胞,于0、24、48、72 h收集细胞;应用甲基化特异性PCR(MSP)检测细胞CTGF基因启动子甲基化状态,RT-PCR检测CTGFmRNA表达,Western blot检测CTGF蛋白表达。结果:不同浓度5-aza-dCyd处理HMCs 48 h后,0、1、2、5μmol/L5-aza-dCyd组CTGF基因启动子呈半甲基化状态,均有微量CTGFmRNA和蛋白的表达,差异无统计学意义(均P>0.05);10μmol/L5-aza-dCyd组甲基化条带阴性,呈完全去甲基化状态,CTGF mRNA和蛋白表达均增加,与0μmol/L组比较差异有统计学意义(P<0.01)。5 mmol/L葡萄糖组HMCs各时间点CTGF基因启动子均呈半甲基化状态,表达微量CTGFmRNA和蛋白质,差异无统计学意义(均P>0.05);30 mmol/L葡萄糖组CTGF启动子在0 h呈半甲基化状态,甲基化条带较强;24 h甲基化条带减弱,48 h甲基化条带阴性,呈完全去甲基化状态,24 h、48 h、72 h CTGF mRNA和蛋白质表达均增加,与5 mmol/L组相应时间点比较差异有统计学意义(均P<0.05)。结论:高糖和甲基化抑制剂5-aza-dCyd均可诱导人肾小球系膜细胞CTGF基因启动子的去甲基化并增加CTGF的表达,提示DNA甲基化可能参与了人肾小球系膜细胞CTGF基因表达的调控。
关键词
高糖
系膜细胞
结缔组织生长因子
DNA甲基化
5-氮杂-2′-脱氧胞苷
Keywords
high glucose
mesangial cells
connective tissue growth factor
DNA methylation
5-aza-2′-deoxycytidine
分类号
R692.6 [医药卫生—泌尿科学]
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职称材料
题名
丹参素对高糖刺激腹膜间皮细胞分泌纤维连接蛋白和Ⅰ型胶原的影响
被引量：
7
2
作者
张浩
徐奕
王建文
张柯
易斌
刘妍
蔡旭
机构
中南大学湘雅三
医院
肾
内科
河北省唐山市唐山工人
医院
肾
内科
广东省第二人民医院肾内科
出处
《中南大学学报（医学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2011年第1期44-50,共7页
基金
湖南中医药科研计划项目(2008012)~~
文摘
目的:探讨丹参素对高糖刺激培养的腹膜间皮细胞(HPMCs)分泌纤维连接蛋白(FN)和I型胶原(Col-I)的影响。方法:以高糖刺激培养HPMCs,分别加用浓度为10,5,2.5,1.25,0.625mg/L的丹参素进行干预,并选取浓度为10mg/L的丹参素干预0,12,24,48,72h;应用RT-PCR,ELISA法检测FN和Col-I蛋白及mRNA表达;RT-PCR、免疫荧光法检测血红素氧化酶-1(HO-1),内皮素-1(ET-1)蛋白及mRNA表达。结果:丹参素可显著降低高糖诱导的HPMCs细胞外基质FN和Col-I蛋白及mRNA表达,呈浓度依赖性及时间依赖性;丹参素可抑制高糖诱导的ET-1蛋白及mRNA表达,增加诱导型抗氧化酶HO-1蛋白及mRNA表达,呈浓度依赖性;丹参素不同时间组ET-1和HO-1蛋白及mRNA表达差异无统计学意义(P>0.05)。结论:丹参素可减少高糖诱导的腹膜间皮细胞FN和Col-I的分泌,其作用机制可能与拮抗氧化应激状态有关。
关键词
氧化应激
纤维连接蛋白
I型胶原
内皮素-1
血红素氧化酶-1
丹参素
Keywords
oxdative stress
fibronectin
collagen-I
endothelin-1
heme oxygenase-1
Danshensu
分类号
R285.5 [医药卫生—中药学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
高糖诱导人肾小球系膜细胞CTGF启动子去甲基化及基因表达
易斌
张浩
周宏
蔡旭
孙剑
刘妍
《细胞与分子免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2011
6
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
丹参素对高糖刺激腹膜间皮细胞分泌纤维连接蛋白和Ⅰ型胶原的影响
张浩
徐奕
王建文
张柯
易斌
刘妍
蔡旭
《中南大学学报（医学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2011
7
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已选择
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参考文献
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