目的探讨GABA及其受体在心肌梗死缺血再灌注损伤过程中的心肌保护机制。方法取自SD大鼠的原代心室肌细胞,根据不同干预分为6组:空白对照组(BC组)无任何干预措施;空白模型组(BM组)模拟缺血再灌注模型,缺糖缺氧培养6 h后,恢复正常含糖及...目的探讨GABA及其受体在心肌梗死缺血再灌注损伤过程中的心肌保护机制。方法取自SD大鼠的原代心室肌细胞,根据不同干预分为6组:空白对照组(BC组)无任何干预措施;空白模型组(BM组)模拟缺血再灌注模型,缺糖缺氧培养6 h后,恢复正常含糖及氧浓度培养3 h;干预组包括:在缺糖缺氧及复糖复氧开始时给予GABA 100μmol/L(GBAB组)、GABABR激动剂巴氯芬100μmol/L(Baclofen组)、TLR4拮抗剂E5564 100μmol/L(E5564组)以及GABABR拮抗剂CGP35348 100μmol/L(CGP35348组)。MTT方法检测心肌细胞活力,RT-qPCR方法检测心肌细胞GABABR及TLR4基因表达。ELISA法检测上清液TNF-α、CKMB。结果缺血再灌注损伤前后,心肌细胞活力严重受损,重要保护因子GABABR基因表达显著下调(0.72 vs 0.23,P <0.001),而关键促炎因子TLR4基因表达显著升高(1.40 vs 1.60,P <0.05),CKMB、TNF-α均显著升高(4.70±3.08 vs 34.10±13.75,25.50±9.78vs 68.75±12.97,P <0.001)。与BM组比较,Baclofen组GABABR、TLR4基因表达变化均无统计学差异,其炎性指标CKMB、TNF-α均显著下降(19.46±8.43 vs 34.10±13.75,47.31±14.79 vs 68.75±12.97,P <0.01);CGP35348组因失去GABABR保护,其结果与BM组基本一致。结论 GABA及其受体通过抑制促炎细胞因子来减轻炎症反应,从而在心肌梗死缺血再灌注损伤过程中起到心肌保护作用。TLR4通路在该心肌保护机制中可能发挥重要调节作用。展开更多
文摘目的探讨GABA及其受体在心肌梗死缺血再灌注损伤过程中的心肌保护机制。方法取自SD大鼠的原代心室肌细胞,根据不同干预分为6组:空白对照组(BC组)无任何干预措施;空白模型组(BM组)模拟缺血再灌注模型,缺糖缺氧培养6 h后,恢复正常含糖及氧浓度培养3 h;干预组包括:在缺糖缺氧及复糖复氧开始时给予GABA 100μmol/L(GBAB组)、GABABR激动剂巴氯芬100μmol/L(Baclofen组)、TLR4拮抗剂E5564 100μmol/L(E5564组)以及GABABR拮抗剂CGP35348 100μmol/L(CGP35348组)。MTT方法检测心肌细胞活力,RT-qPCR方法检测心肌细胞GABABR及TLR4基因表达。ELISA法检测上清液TNF-α、CKMB。结果缺血再灌注损伤前后,心肌细胞活力严重受损,重要保护因子GABABR基因表达显著下调(0.72 vs 0.23,P <0.001),而关键促炎因子TLR4基因表达显著升高(1.40 vs 1.60,P <0.05),CKMB、TNF-α均显著升高(4.70±3.08 vs 34.10±13.75,25.50±9.78vs 68.75±12.97,P <0.001)。与BM组比较,Baclofen组GABABR、TLR4基因表达变化均无统计学差异,其炎性指标CKMB、TNF-α均显著下降(19.46±8.43 vs 34.10±13.75,47.31±14.79 vs 68.75±12.97,P <0.01);CGP35348组因失去GABABR保护,其结果与BM组基本一致。结论 GABA及其受体通过抑制促炎细胞因子来减轻炎症反应,从而在心肌梗死缺血再灌注损伤过程中起到心肌保护作用。TLR4通路在该心肌保护机制中可能发挥重要调节作用。
