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Lithocarols类化合物生物合成基因litI的表达及其启动子功能分析
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作者 李梦然 叶伟 +3 位作者 李赛妮 张维阳 李建军 章卫民 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第6期310-318,共9页
【目的】Lithocarols为新型的多异戊烯基二苯甲酮类化合物,具有良好的抗肿瘤活性。对lithocarols生物合成基因litI进行克隆和表达纯化,并对该基因的启动子进行功能鉴定,为lithocarols的生物合成及转录调控奠定分子生物学基础。【方法】... 【目的】Lithocarols为新型的多异戊烯基二苯甲酮类化合物,具有良好的抗肿瘤活性。对lithocarols生物合成基因litI进行克隆和表达纯化,并对该基因的启动子进行功能鉴定,为lithocarols的生物合成及转录调控奠定分子生物学基础。【方法】将litI基因扩增后进行原核表达,采用镍亲和层析初步纯化目的蛋白LitI,利用生物信息学方法分析该蛋白的性质和结构。同时扩增litI基因启动子片段,构建荧光素酶表达系统,分析启动子的转录活性,利用PlantCARE启动子分析网站对litI基因启动子的功能组件进行预测。【结果】LitI蛋白为亲水性蛋白,其相对分子量为51 kD,二级结构包括51.32%的α-螺旋、8.99%的延伸链、3.95%的β-转角以及35.75%无规则卷曲。litI基因启动子具有较强的转录活性且在大肠杆菌中具有启动氨苄青霉素抗性基因表达的功能,其功能组件包含TATA box和CAAT box。【结论】通过异源表达获得了LitI蛋白,分析了其性质和结构,并鉴定了具有较强转录活性的litI基因启动子片段。 展开更多
关键词 Phomopsis lithocarpus 多异戊烯基二苯甲酮类化合物 生物合成基因 启动子 异源表达 生物信息学
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氨基纤维素功能材料的合成与应用 被引量:1
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作者 贾家海 陈铭杰 +7 位作者 施庆珊 谢小保 李海明 王兴 周景蓬 刘燕韶 张凤山 郭延柱 《高分子材料科学与工程》 EI CAS CSCD 北大核心 2023年第4期163-172,共10页
氨基化改性可有效地破坏纤维素固有的结晶结构,赋予纤维素一定的碱性,改善纤维素的水溶性,极大地提升了纤维素的利用价值。文中对氨基纤维素的合成路径及结构特征进行了归纳总结。通过具体实例分析,总结了氨基纤维素在吸附、生物医药、... 氨基化改性可有效地破坏纤维素固有的结晶结构,赋予纤维素一定的碱性,改善纤维素的水溶性,极大地提升了纤维素的利用价值。文中对氨基纤维素的合成路径及结构特征进行了归纳总结。通过具体实例分析,总结了氨基纤维素在吸附、生物医药、催化剂和酶蛋白固载领域的应用,提出了氨基纤维素绿色合成、生物相容性分析、仿生材料设计等研究发展方向。期望为氨基纤维素的利用提供理论参考,为氨基纤维素的研究提供方向。 展开更多
关键词 纤维素 氨基 改性 合成 功能材料
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一种新型酰基转移酶GPAT的克隆、表达与酶学性质研究
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作者 刘珊 叶伟 +3 位作者 朱牧孜 李赛妮 邓张双 章卫民 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第11期257-266,共10页
Lithocarpins为分离自海洋真菌Phomopsis lithocarpus的聚酮类新骨架化合物,具有开发成为新型抗肿瘤药物先导化合物的潜力。基于基因组测序和生物信息学分析预测了lithocarpins的生物合成基因簇,对其中的未知功能基因g7779进行扩增,并... Lithocarpins为分离自海洋真菌Phomopsis lithocarpus的聚酮类新骨架化合物,具有开发成为新型抗肿瘤药物先导化合物的潜力。基于基因组测序和生物信息学分析预测了lithocarpins的生物合成基因簇,对其中的未知功能基因g7779进行扩增,并在大肠杆菌中进行表达,利用镍亲和层析柱进行纯化,通过质谱测序、生物信息学分析及酶活力检测等方法,对纯化的蛋白进行了功能分析。结果表明:基因g7779表达的蛋白是一个兼具较强的酰基转移酶活性和一定的谷丙转氨酶活性的新型双功能酶(glutamic-pyruvic transaminase-acyltransferase,GPAT),纯度达到98.6%。结构分析显示,该蛋白由326个氨基酸残基组成,其分子量为36 kD,其二级结构包括55.52%α-螺旋、29.45%无规则卷曲、9.82%延伸链和5.21%β-转角;酰基转移酶活性分析表明,GPAT对底物乙酰辅酶A的最适反应温度为35℃,当pH为7.0时酶活最高,在40℃时的热稳定性较好,在此温度下处理2 h后,残留酶活力仍大于80%,而在50℃下热稳定性较差,处理30 min后残留酶活力低于10%;其酶动力学常数Km=761.57μmol/L,最大反应速率Vmax=29370μmol/(mg·min)。研究结果将为后续阐明lithocarpins生物合成途径提供分子生物学依据。 展开更多
关键词 海洋真菌 Phomopsis lithocarpus 异源表达 酰基转移酶 酶学性质 生物信息学
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中国大陆一个新记录种——卵孢原球盖菇
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作者 文华枢 邢佳慧 +4 位作者 宋斌 李挺 邓旺秋 李泰辉 莫美华 《中国食用菌》 2021年第2期6-10,共5页
对采自广东云开山国家级自然保护区的标本进行研究,经鉴定为中国大陆新记录种——卵孢原球盖菇(Protostropharia ovalispora Yen W.Wang&S.S.Tzean)。根据标本的形态特征,并结合ITS分子系统学分析,描述了该物种的主要特征为菌盖凸... 对采自广东云开山国家级自然保护区的标本进行研究,经鉴定为中国大陆新记录种——卵孢原球盖菇(Protostropharia ovalispora Yen W.Wang&S.S.Tzean)。根据标本的形态特征,并结合ITS分子系统学分析,描述了该物种的主要特征为菌盖凸镜形至扁半球形,表面具黏液;菌褶直生;菌柄表面黏;担孢子椭圆形至长椭圆形。 展开更多
关键词 卵孢原球盖菇 新记录种 球盖菇科 中国大陆
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