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长链非编码核糖核酸肺腺癌转移相关转录本1和核旁斑组装转录本1在低氧预适应小鼠海马神经保护中的作用研究
1
作者 侯海东 闫磊 +4 位作者 王丽平 杨静 桂玉成 杜永强 邵国 《中国脑血管病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第8期525-536,共12页
目的探索长链非编码核糖核酸(lncRNA)肺腺癌转移相关转录本1(MALAT1)和核旁斑组装转录本1(NEAT1)在低氧预适应(HPC)小鼠海马细胞中的表达及其与神经保护的关系。方法(1)将36只雄性美国癌症研究所(ICR)小鼠按照随机数字表法完全随机分为3... 目的探索长链非编码核糖核酸(lncRNA)肺腺癌转移相关转录本1(MALAT1)和核旁斑组装转录本1(NEAT1)在低氧预适应(HPC)小鼠海马细胞中的表达及其与神经保护的关系。方法(1)将36只雄性美国癌症研究所(ICR)小鼠按照随机数字表法完全随机分为3组:对照组、低氧组和低氧预处理组,每组12只。对照组小鼠不进行低氧暴露,低氧组小鼠低氧暴露1次,低氧预处理组小鼠低氧暴露4次。低氧处理结束后立即将所有小鼠脱颈椎处死并分离海马组织分组保存。(2)将HT22细胞培养于含10%胎牛血清和100 U/ml青霉素-链霉素的培养基,细胞汇合率大于90%时将其转移至24孔板中培养后分2批进行处理。通过转染试剂将6 pmol的乱序小干扰核糖核酸(siRNA)、MALAT1 siRNA(siMALAT1)、siNEAT1、siMALAT1+siNEAT1分别一一对应转染至第一批HT22细胞的阴性对照组、siMALAT1组、siNEAT1组、siMALAT1+siNEAT1组细胞中,空白组不做任何处理;然后在正常条件下(5%CO_(2)和95%空气)培养48 h;第二批HT22细胞中,利用转染试剂分别将6 pmol的乱序siRNA、乱序siRNA、siMALAT1、siMALAT1、siNEAT1、siNEAT1分别一一对应转染至阴性对照组、阴性对照+氧糖剥夺-再灌注(OGD/R)组、siMALAT1组、siMALAT1+OGD/R组、siNEAT1组、siNEAT1+OGD/R组的HT22细胞中,转染后48 h将阴性对照组、siMALAT1组、siNEAT1组HT22细胞在正常条件下(5%CO_(2)和95%空气)继续培养,将阴性对照+OGD/R组、siMALAT1+OGD/R组、siNEAT1+OGD/R组细胞进行OGD/R处理,即低氧条件下(1%O_(2)+5%CO_(2)+94%N_(2))暴露8 h,之后再进行正常条件下培养16 h。(3)通过实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)及蛋白免疫印迹法测定各组小鼠海马组织中MALAT1、NEAT1、N-甲基-D-天冬氨酸受体亚基2B(NR2B)信使核糖核酸(mRNA)、NR2B蛋白水平的相对表达量和各组HT22细胞转染处理后NR2B mRNA、NR2B蛋白水平的相对表达量及各组HT22细胞转染和OGD/R后的血影蛋白分解产物、活化半胱氨酸蛋白酶蛋白3的相对表达量,并计算各组HT22细胞存活率。结果(1)3组小鼠海马中MALAT1(F=43.92)、NEAT1(F=506.40)、NR2B mRNA(F=50.64)及NR2B蛋白(F=41.24)的相对表达量差异均有统计学意义(均P<0.05)。与对照组相比,低氧组MALAT1[(1.68±0.06)比(1.00±0.08)]、NR2B mRNA[(1.26±0.06)比(1.00±0.01)]及NR2B蛋白[(1.47±0.05)比(1.00±0.01)]的相对表达量均增加(均P<0.05),而NEAT1[(1.02±0.10)比(1.00±0.03)]的相对表达量组间差异无统计学意义(P>0.05),低氧预处理组中MALAT1[(1.12±0.13)比(1.00±0.08)]和NEAT1[(2.88±0.10)比(1.00±0.03)]的相对表达量增加;与低氧组比较,低氧预处理组NR2B mRNA[(0.54±0.07)比(1.26±0.06)]及NR2B蛋白[(1.17±0.07)比(1.47±0.05)]的相对表达量均降低(均P<0.05)。(2)5组HT22细胞转染后NR2B mRNA(F=36.92)及NR2B蛋白(F=56.98)的相对表达量差异均有统计学意义(均P<0.05)。与阴性对照组相比,siMALAT1组[NR2B mRNA:(2.04±0.08)比(0.94±0.04),NR2B蛋白:(1.72±0.13)比(0.93±0.02)]、siNEAT1组[NR2B mRNA:(2.15±0.13)比(0.94±0.04),NR2B蛋白:(1.87±0.46)比(0.93±0.02)]、siMALAT1+siNEAT1组[NR2B mRNA:(2.09±0.16)比(0.94±0.04),NR2B蛋白:(2.07±0.30)比(0.93±0.02)]的NR2B mRNA及NR2B蛋白的相对表达量均增加(均P<0.05)。(3)6组HT22细胞转染及OGD/R处理后血影蛋白分解产物(145/150 kDa蛋白;F=12.43)、血影蛋白分解产物(120 kDa蛋白;F=7.15)、活化的半胱氨酸蛋白酶蛋白3蛋白(F=6.61)的相对表达量差异均有统计学意义(均P<0.05)。与siMALAT1组比较,siMALAT1+OGD/R组的145/150 kDa[(1.42±0.48)比(0.85±0.34)]、120 kDa[(1.33±0.37)比(0.52±0.19)]的血影蛋白分解产物及活化的半胱氨酸蛋白酶蛋白3蛋白[(2.43±0.35)比(1.15±0.24)]相对表达量均增加(均P<0.05);与阴性对照+OGD/R组比较,siMALAT1+OGD/R组的145/150 kDa[(1.42±0.48)比(1.23±0.17)]、120 kDa[(1.33±0.37)比(0.80±0.21)]的血影蛋白分解产物及活化的半胱氨酸蛋白酶蛋白3蛋白[(2.43±0.35)比(1.46±0.39)]相对表达量均增加(均P<0.05);与siNEAT1组比较,siNEAT1+OGD/R组的145/150 kDa[(1.28±0.44)比(0.87±0.32)]、120 kDa[(0.81±0.36)比(0.63±0.16)]的血影蛋白分解产物及活化的半胱氨酸蛋白酶蛋白3蛋白[(1.51±0.45)比(1.01±0.27)]相对表达量均增加(均P<0.05)。(4)6组HT22细胞存活率差异有统计学意义(F=5.54,P<0.05)。与阴性对照组比较,siMALAT1组、siNEAT1组、siMALAT1+OGD/R组及siNEAT1+OGD/R组HT22细胞存活率均降低[(0.65±0.40)、(0.76±0.35)、(0.24±0.17)、(0.23±0.16)比(0.84±0.04),均P<0.05];与siMALAT1组比较,siMALAT1+OGD/R组细胞存活率降低[(0.24±0.17)比(0.65±0.40),P<0.05];与siNEAT1组比较,siNEAT1+OGD/R组细胞存活率降低[(0.23±0.16)比(0.76±0.35),P<0.05]。结论HPC增加了小鼠海马组织中MALAT1和NEAT1的表达,MALAT1和NEAT1可能通过影响NR2B的表达参与小鼠缺血缺氧后的神经保护作用。 展开更多
关键词 低氧预处理 长非编码RNA MALAT1 NEAT1 NR2B
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丙酮酸钠对小鼠海马神经HT22细胞神经保护作用 被引量：2
2
作者 李娜 蔡珂沁 +7 位作者 李文欣 吕军 石瑞丽 马宝慧 时静华 郝肖琼 邵国 齐瑞芳 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第8期1522-1526,共5页
目的研究丙酮酸钠(sodium pyruvate,SP)在低氧条件下对小鼠海马神经细胞HT22的神经保护作用。方法在低氧条件下,用MTS检测不同浓度SP孵育HT22细胞的活性变化;从形态学上,采用铁染色观察SP对HT22细胞的影响;应用溶酶体染色检测SP对HT22... 目的研究丙酮酸钠(sodium pyruvate,SP)在低氧条件下对小鼠海马神经细胞HT22的神经保护作用。方法在低氧条件下,用MTS检测不同浓度SP孵育HT22细胞的活性变化;从形态学上,采用铁染色观察SP对HT22细胞的影响;应用溶酶体染色检测SP对HT22细胞的溶酶体变化;采用Western blot检测Bcl-2、Bax和LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ蛋白的表达。结果5 mmol·L^(-1)的SP能提高HT22细胞活力以及减少HT22细胞损伤;SP提高Bcl-2的表达,降低Bax的表达,使LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比值增加。结论在低氧的条件下给予SP可能通过减少HT22细胞凋亡,激活自噬发挥神经保护作用,从而降低低氧损伤。 展开更多
关键词 低氧 丙酮酸钠 HT22细胞 细胞凋亡 自噬 神经保护
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低氧预适应对小鼠海马HT22细胞线粒体能量代谢的影响 被引量：1
3
作者 齐瑞芳 李娜 +6 位作者 王立军 吕军 石瑞丽 马宝慧 时静华 郝肖琼 邵国 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2022年第10期1585-1588,1594,共5页
目的探讨低氧预适应(HPC)对小鼠海马HT22细胞线粒体能量代谢的影响及其可能机制。方法将小鼠海马神经细胞HT22分为对照组、低氧组、HPC组,通过检测各组三磷酸腺苷(ATP)和活性氧(ROS)的水平,以观察HPC对细胞线粒体能量代谢的影响;采用Wes... 目的探讨低氧预适应(HPC)对小鼠海马HT22细胞线粒体能量代谢的影响及其可能机制。方法将小鼠海马神经细胞HT22分为对照组、低氧组、HPC组,通过检测各组三磷酸腺苷(ATP)和活性氧(ROS)的水平,以观察HPC对细胞线粒体能量代谢的影响;采用Western blot法检测雷帕霉素靶蛋白(mTOR)、磷酸化mTOR蛋白和自噬底物P62蛋白的表达;细胞免疫荧光法检测磷酸化mTOR,LysoTracker^(TM)探针检测溶酶体,验证HPC引起细胞代谢改变是否与mTOR/自噬通路有关。结果与对照组相比,低氧组ATP明显下降,ROS水平增加,HPC处理后,ATP水平增加,ROS水平降低。与对照组相比,HPC组磷酸化mTOR表达下调,自噬底物P62表达下调。结论HPC可能通过mTOR/自噬信号通路影响HT22细胞能量代谢从而对HT22细胞发挥保护作用。 展开更多
关键词 低氧预适应 线粒体代谢 MTOR 自噬 神经保护
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达克罗宁复合丙泊酚用于无痛胃镜检查的临床效果 被引量：22
4
作者 王从辉 刘雅芳 +1 位作者 盛福庭 丘秋惠 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2017年第17期2911-2914,共4页
目的探讨达克罗宁复合丙泊酚用于无痛胃镜检查中的安全性和可行性。方法选择2016年9-12月在我院行无痛胃镜检查的90例患者,按随机数字表法分为3组:达克罗宁+丙泊酚组(DP组)、芬太尼+丙泊酚组(FP组)、丙泊酚组(P组),每组各30例。观察并记... 目的探讨达克罗宁复合丙泊酚用于无痛胃镜检查中的安全性和可行性。方法选择2016年9-12月在我院行无痛胃镜检查的90例患者,按随机数字表法分为3组:达克罗宁+丙泊酚组(DP组)、芬太尼+丙泊酚组(FP组)、丙泊酚组(P组),每组各30例。观察并记录3组患者检查前、中、后的血流动力学变化,不良反应,丙泊酚用量,检查及苏醒时间。结果 DP组与FP组在高血压、心动过速、呛咳、体动的发生率,以及丙泊酚用量显著低于P组(P<0.05),FP组和P组在呼吸抑制发生率、检查及苏醒时间显著高于DP组(P<0.01),DP组和P组在恶心呕吐发生率显著低于FP组(P<0.05)。结论达克罗宁复合丙泊酚用于无痛胃镜检查,降低了检查时心血管反应、呛咳、体动、呼吸抑制、恶心呕吐等不良反应的发生率,减少了丙泊酚用量,缩短了检查和苏醒时间。因此,达克罗宁复合丙泊酚用于无痛胃镜检查是一种更加安全可行的麻醉方案。 展开更多
关键词 无痛胃镜 丙泊酚 盐酸达克罗宁胶浆
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妊娠期糖尿病胎盘中miR-95、-548am、-1246的表达及其与脂肪细胞因子、葡萄糖转运体的关系 被引量：10
5
作者 檀丽 彭巧捷 陈丽春 《海南医学院学报》 CAS 2016年第23期2797-2799,2803,共4页
目的：研究妊娠期糖尿病胎盘中miR-95、-548am、-1246的表达及其与脂肪细胞因子、葡萄糖转运体（GLUTs）的关系。方法：选择2012年5月-2015年12月在本院产科诊断为妊娠期糖尿病的45例孕产妇作为研究的妊娠期糖尿病（GDM）组,同期进行产... 目的：研究妊娠期糖尿病胎盘中miR-95、-548am、-1246的表达及其与脂肪细胞因子、葡萄糖转运体（GLUTs）的关系。方法：选择2012年5月-2015年12月在本院产科诊断为妊娠期糖尿病的45例孕产妇作为研究的妊娠期糖尿病（GDM）组,同期进行产前检查及分娩的40例健康孕产妇作为研究的对照组。于孕36周时采集血清并测定糖脂代谢指标、脂肪细胞因子含量,分娩后采集胎盘组织并测定微小RNA（miRNAs）、GLUTs的表达量。结果：GDM组胎盘组织中miR-95、-548am的表达量显著高于对照组,miR-1246的表达量显著低于对照组;GDM组孕妇血清中甘油三酯（TG）、总胆固醇（TC）、空腹血糖（FBG）、空腹血胰岛素（FINS）、瘦素、抵抗素、视黄醇结合蛋白-4（RBP-4）的含量以及胰岛素抵抗指数（HOMA-IR）的水平均显著高于对照组;血清中脂联素、内脂素的含量以及胰岛素混合敏感指数（HOMA-ISI）的水平显著低于对照组;GDM组胎盘组织中GLUT1、GLUT3、GLUT4的表达量显著低于对照组（P〈0.05）。结论：妊娠期糖尿病胎盘中miR-95、-548am、-1246的异常表达能够靶向调节脂肪细胞因子、葡萄糖转运体的表达,进而造成母体脂质代谢紊乱、胰岛素抵抗。 展开更多
关键词 妊娠期糖尿病 微小RNA 脂肪细胞因子 葡萄糖转运体
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BIS监测下小剂量咪达唑仑联合丙泊酚靶控输注的麻醉诱导效果及RAAS系统活性 被引量：7
6
作者 卢文珊 王从辉 +2 位作者 谢婵英 吕波 吴世民 《海南医学院学报》 CAS 2016年第24期3031-3034,共4页
目的:研究BIS监测下小剂量咪达唑仑联合丙泊酚靶控输注的麻醉诱导效果及肾素-血管紧张素-醛固酮系统(RAAS)活性。方法:选择2012年4月~2015年12月在我院接受择期全麻手术的40例患者,随机分为对照组(C组)和小剂量咪达唑仑组(M组),评估丙... 目的:研究BIS监测下小剂量咪达唑仑联合丙泊酚靶控输注的麻醉诱导效果及肾素-血管紧张素-醛固酮系统(RAAS)活性。方法:选择2012年4月~2015年12月在我院接受择期全麻手术的40例患者,随机分为对照组(C组)和小剂量咪达唑仑组(M组),评估丙泊酚靶控输注血浆浓度的EC5 0,测定诱导前和诱导完成后血浆中一氧化氮(NO)、亚硝酸盐(NO_2^-)、硝酸盐(NO_3^-)、黄嘌呤氧化酶(XOD)、肾素(PRA)、血管紧张素-Ⅱ(ANG-Ⅱ)、醛固酮(ALD)的浓度。结果:M组丙泊酚的EC5 0显著低于C组(P<0.05);麻醉诱导前和诱导完成后,M组平均动脉压、动脉血氧分压、动脉血二氧化碳分压、中心静脉压与C组比较无显著性差异(P>0.05);麻醉诱导完成后,C组血浆NO、NO_2^-、NO_3^-、XOD含量显著低于麻醉诱导前(P<0.05),PRA、ANG-Ⅱ、ALD的浓度显著高于麻醉诱导前(P<0.05),M组血浆NO、NO_2^-、NO_3^-、XOD、PRA、ANG-Ⅱ、ALD含量与麻醉诱导前无显著性差异(P>0.05);M组麻醉诱导后的血浆NO、NO_2^-、NO_3^-、XOD含量显著高于C组(P<0.05),PRA、ANG-Ⅱ、ALD的浓度显著低于C组(P<0.05)。结论:BIS监测下小剂量咪达唑仑联合丙泊酚靶控输注的麻醉效果确切且能够减少丙泊酚用量、抑制RAAS系统激活。 展开更多
关键词 咪达唑仑 丙泊酚 肾素 血管紧张素-Ⅱ 醛固酮
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喉癌中IL-17和IL-17R的表达及与临床病理的相关性分析 被引量：1
7
作者 卓木改 钟勇 +1 位作者 许卫平 袁勇 《海南医学院学报》 CAS 2015年第6期801-804,共4页
目的:探讨喉癌中白细胞介素-17(IL-17)及白细胞介素-17受体(IL-17R)的表达与临床病理的关系。方法:选择80例喉鳞状细胞癌患者为研究对象,选择80例声带息肉患者和80例健康人群为对照组。统计IL-17及IL-17R的表达情况,并对IL-17及IL-17R... 目的:探讨喉癌中白细胞介素-17(IL-17)及白细胞介素-17受体(IL-17R)的表达与临床病理的关系。方法:选择80例喉鳞状细胞癌患者为研究对象,选择80例声带息肉患者和80例健康人群为对照组。统计IL-17及IL-17R的表达情况,并对IL-17及IL-17R的表达与喉癌临床病理进行统计学分析。结果:喉癌组织IL-17及IL-17R的表达强度高于癌旁组织和声带息肉,差异有统计学意义(P<0.05);喉癌组织IL-17及IL-17R的表达阳性率高于癌旁组织和息肉组织,差异有统计学意义(P<0.01);但癌旁组织和息肉组织IL-17及IL-17R的表达阳性率比较,差异无统计学意义(P>0.05);喉癌组织中IL-17及IL-17R的表达与原发灶分期、分化程度、淋巴结转移有关(P<0.05);喉癌患者术前IL-17水平明显高于对照组,术后IL-17水平明显较术前下降,差异均有统计学意义(P<0.01)。结论:喉癌中IL-17及IL-17R可出现高表达;IL-17及IL-17R的表达与喉癌原发灶分期、分化程度、淋巴结转移密切相关;IL-17及IL-17R的表达参与了喉癌的发生及发展。 展开更多
关键词 喉癌 临床病理 白细胞介素17 白细胞介素17受体
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