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糖皮质激素广谱特异性单克隆抗体的制备及其ic-ELISA方法的建立
被引量：
5
1
作者
姚添淇
劳翠瑜
+2 位作者
王士峰
胡桂平
张世伟
《食品科学》
EI
CAS
CSCD
北大核心
2019年第14期186-191,共6页
将氢化可的松半抗原HYD通过活化脂法与钥孔戚血蓝蛋白(keyhole limpet hemocyanin,KLH)偶联获得氢化可的松完整抗原KLH-HYD,并对小鼠肌肉注射此抗原,使小鼠免疫;通过杂交瘤技术获得1株能够稳定分泌氢化可的松的单克隆抗体细胞株HYD-C1,...
将氢化可的松半抗原HYD通过活化脂法与钥孔戚血蓝蛋白(keyhole limpet hemocyanin,KLH)偶联获得氢化可的松完整抗原KLH-HYD,并对小鼠肌肉注射此抗原,使小鼠免疫;通过杂交瘤技术获得1株能够稳定分泌氢化可的松的单克隆抗体细胞株HYD-C1,并通过腹水制备大量抗体。将氢化可的松半抗原HYD和地塞米松半抗原DEX通过活化脂法分别与卵清蛋白(ovalbumin,OVA)偶联作为包被原,建立糖皮质激素的间接竞争酶联免疫吸附检测(indirect competitive-enzyme linked immunosorbent assay,ic-ELISA)方法。结果:在同源包被情况下氢化可的松灵敏度为1.63 ng/mL,异源包被情况下灵敏度为0.24 ng/mL;在交叉抑制实验中,异源策略中的各糖皮质激素灵敏度均高于同源策略中的结果,异源策略条件下很好地覆盖了本研究中所检测的糖皮质激素,使该抗体具备良好的广谱特异性。在异源策略添加回收实验中平均添加回收率在77.5%~111.3%之间,落在合理范围内,满足检测需求。结论:成功制备出氢化可的松单克隆抗体,建立了同源和异源策略糖皮质激素检测方法,结果发现异源策略中糖皮质激素的灵敏度高于同源策略,并使该方法具有更好的广谱特异性。
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关键词
糖皮质激素
同源策略
异源策略
广谱特异性
间接竞争酶联免疫吸附(ic-ELISA)法
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题名
糖皮质激素广谱特异性单克隆抗体的制备及其ic-ELISA方法的建立
被引量：
5
1
作者
姚添淇
劳翠瑜
王士峰
胡桂平
张世伟
机构
广东省深圳市计量质量检测研究院国家营养食品质量监督检验中心
出处
《食品科学》
EI
CAS
CSCD
北大核心
2019年第14期186-191,共6页
基金
深圳市科技计划项目(JCYJ20170817162119873)
文摘
将氢化可的松半抗原HYD通过活化脂法与钥孔戚血蓝蛋白(keyhole limpet hemocyanin,KLH)偶联获得氢化可的松完整抗原KLH-HYD,并对小鼠肌肉注射此抗原,使小鼠免疫;通过杂交瘤技术获得1株能够稳定分泌氢化可的松的单克隆抗体细胞株HYD-C1,并通过腹水制备大量抗体。将氢化可的松半抗原HYD和地塞米松半抗原DEX通过活化脂法分别与卵清蛋白(ovalbumin,OVA)偶联作为包被原,建立糖皮质激素的间接竞争酶联免疫吸附检测(indirect competitive-enzyme linked immunosorbent assay,ic-ELISA)方法。结果:在同源包被情况下氢化可的松灵敏度为1.63 ng/mL,异源包被情况下灵敏度为0.24 ng/mL;在交叉抑制实验中,异源策略中的各糖皮质激素灵敏度均高于同源策略中的结果,异源策略条件下很好地覆盖了本研究中所检测的糖皮质激素,使该抗体具备良好的广谱特异性。在异源策略添加回收实验中平均添加回收率在77.5%~111.3%之间,落在合理范围内,满足检测需求。结论:成功制备出氢化可的松单克隆抗体,建立了同源和异源策略糖皮质激素检测方法,结果发现异源策略中糖皮质激素的灵敏度高于同源策略,并使该方法具有更好的广谱特异性。
关键词
糖皮质激素
同源策略
异源策略
广谱特异性
间接竞争酶联免疫吸附(ic-ELISA)法
Keywords
glucocorticoids
homologous strategy
heterologous strategy
broad-spectrum specificity
indirect competitive-enzyme linked immunosorbent assay(ic-ELISA)
分类号
R446.61 [医药卫生—诊断学]
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作者
出处
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被引量
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1
糖皮质激素广谱特异性单克隆抗体的制备及其ic-ELISA方法的建立
姚添淇
劳翠瑜
王士峰
胡桂平
张世伟
《食品科学》
EI
CAS
CSCD
北大核心
2019
5
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