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基于“水火相济”理论探讨慢性心力衰竭对肾功能和肾脏纤维的影响及益气温阳活血利水法的干预研究 被引量:15
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作者 王俊岩 王陵军 +3 位作者 梁碧容 张璐 冼绍祥 汪朝晖 《中华中医药学刊》 CAS 北大核心 2020年第8期162-166,I0031,I0032,共7页
目的观察慢性心力衰竭对肾功能和肾脏纤维化的影响及益气温阳活血利水法的干预作用,探讨"水火相济"理论内涵。方法随机将50只C57BL/6J小鼠分为假手术组、模型组、中药低、中、高剂量组,通过主动脉缩窄术建立慢性心力衰竭模型... 目的观察慢性心力衰竭对肾功能和肾脏纤维化的影响及益气温阳活血利水法的干预作用,探讨"水火相济"理论内涵。方法随机将50只C57BL/6J小鼠分为假手术组、模型组、中药低、中、高剂量组,通过主动脉缩窄术建立慢性心力衰竭模型小鼠,造模后中药低、中、高剂量组给予益气温阳活血利水中药对应剂量灌胃,假手术组和模型组给予等量生理盐水灌胃,连续给药8周后,小动物超声检测小鼠心脏射血分数、收缩分数变化。于末次给药2 h后取材,全自动生化分析仪检测血清肌酐、尿素氮水平,微量酶标法检测血清GSH含量,冰冻切片检测肾脏组织ROS水平,免疫组化法检测肾脏CollagenⅠ、CollagenⅢ、p53、COX2、FTH1、GPX4蛋白表达情况,RT-PCR法检测肾脏组织P53、SLC7A11、GPX4、PTGS2、NOX1、FTH1 mRNA表达水平。结果与假手术组比较,模型组小鼠心脏EF、FS、GSH水平显著降低,SCr、BUN、ROS水平显著升高,肾脏CollagenⅠ、CollagenⅢ、JNK、p53、PTGS2、NOX1蛋白或mRNA水平显著升高,GPX4、FTH1、SLC7A11蛋白或mRNA水平显著降低;与模型组比较,经治疗后各项指标水平明显改善,差异具有统计学意义。结论益气温阳活血利水法在改善CHF小鼠心功能的同时能够改善肾脏损伤,减少纤维化,其机制可能与抑制JNK/p53信号通路表达,进一步调控SLC7A11/GPX4/GSH和PTGS2/NOX1信号通路进而降低ROS水平减少细胞铁死亡。 展开更多
关键词 益气温阳活血利水 慢性心力衰竭 肾脏损伤 铁死亡 水火相济
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益气温阳活血法对慢性心力衰竭小鼠认知功能的影响及机制研究 被引量:12
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作者 王俊岩 王陵军 +3 位作者 梁碧容 张璐 冼绍祥 汪朝晖 《中华中医药学刊》 CAS 北大核心 2020年第6期58-62,I0016,共6页
目的观察慢性心力衰竭认知功能的影响及益气温阳活血利水法的干预作用。方法随机将60只C57BL/6J小鼠分为假手术组、模型组、中药低、中、高剂量组和培哚普利组,通过主动脉缩窄术建立慢性心力衰竭模型小鼠,造模后中药低、中、高剂量组给... 目的观察慢性心力衰竭认知功能的影响及益气温阳活血利水法的干预作用。方法随机将60只C57BL/6J小鼠分为假手术组、模型组、中药低、中、高剂量组和培哚普利组,通过主动脉缩窄术建立慢性心力衰竭模型小鼠,造模后中药低、中、高剂量组给予益气温阳活血利水中药对应剂量灌胃,假手术组和模型组给予等量生理盐水灌胃,连续给药8周后,小动物超声检测小鼠心脏射血分数、收缩分数变化。于造模及给药第7周开始实验,进行水迷宫实验,观察小鼠认知能力改变。于末次给药2 h后取材,免疫组化法检测脑组织Aβ、Tau蛋白表达水平,Western Blot法检测各组小鼠脑组织Tau、RAGE、AGEs、PP2A蛋白表达水平。结果与假手术组比较,模型组小鼠心脏EF、FS水平明显降低,脑组织Aβ、Tau、RAGE、AGEs蛋白表达水平明显升高,PP2A蛋白表达水平明显降低;与模型组比较,经治疗后各项指标水平明显改善,差异具有统计学意义。结论益气温阳活血利水法在改善CHF小鼠心功能的同时能够改善认知功能损伤,减少Tau蛋白及Aβ沉积,其机制可能是通过调节AGEs-RAGE-PP2A信号轴实现。 展开更多
关键词 益气温阳活血利水 慢性心力衰竭 认知功能 AGEs-RAGE-PP2A
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白桦脂酸通过RRAGD/mTOR/ULK1促进自噬改善血管平滑肌细胞钙化 被引量:2
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作者 侯炽均 陈鑫 +6 位作者 曹艳红 张钰冰 张靖悦 王陵军 王婷 叶小汉 郭依宁 《中华中医药学刊》 CAS 北大核心 2024年第3期146-151,I0015,共7页
目的 探讨白桦脂酸(Betulinic acid, BA)对高磷诱导血管平滑肌细胞钙化的作用机制。方法 采用2.6μmol·g^(-1)高磷诱导小鼠主动脉平滑肌细胞体外钙化模型,CCK8检测白桦脂酸对细胞活力的影响;加入白桦脂酸低、中、高剂量(5μmol... 目的 探讨白桦脂酸(Betulinic acid, BA)对高磷诱导血管平滑肌细胞钙化的作用机制。方法 采用2.6μmol·g^(-1)高磷诱导小鼠主动脉平滑肌细胞体外钙化模型,CCK8检测白桦脂酸对细胞活力的影响;加入白桦脂酸低、中、高剂量(5μmol·L^(-1)、10μmol·L^(-1)、20μmol·L^(-1))及自噬抑制剂3-甲基腺嘌呤(3-MA,5μmol·g^(-1))。慢病毒过表达Ras相关GTP结合蛋白D(Ras-related GTP-binding Protein D,RRAGD)转染血管平滑肌细胞,通过荧光显微镜、RT-PCR验证转染效率。采用茜素红染色、细胞内钙含量、碱性磷酸酶活性检测细胞钙化程度;Western blot检测血管平滑肌细胞钙化指标RUNT相关转录因子2(Runt-related transcription factor 2,RUNX2),骨形态发生蛋白2(Bone morphogenetic protein, BMP2),平滑肌蛋白22α(Smooth muscle protein 22α,SM22α)和平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin, α-SMA);UNC-51样激酶1(UNC-51-like kinase 1,ULK1),自噬蛋白微管相关蛋白1轻链3(LC3Ⅱ/LC3Ⅰ),泛素结合蛋白P62(P62),哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(Mammalian target of rapamycin, mTOR)以及RRAGD的表达。结果 根据CCK8细胞活力结果选择白桦脂酸5、10、20μmol·L^(-1)剂量进行后续实验;钙水平、碱性磷酸酶活性及茜素红染色实验结果显示白桦脂酸改善高磷诱导血管平滑肌细胞钙化;Western blot结果显示白桦脂酸下调RUNX2、BMP2、RRAGD、p-mTOR、P62(P<0.05),上调SM22α、α-SMA、LC3Ⅱ/Ⅰ、p-ULK1的蛋白表达(P<0.05)。白桦脂酸减轻高磷诱导血管平滑肌细胞钙化的作用被自噬抑制剂3-MA和过表达RRAGD阻断。结论 白桦脂酸可能通过RRAGD/mTOR/ULK1信号通路促进自噬抑制血管平滑肌细胞钙化。 展开更多
关键词 血管平滑肌细胞 细胞钙化 白桦脂酸 自噬
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心阳片含药血清调控NLRP3介导细胞焦亡保护心肌细胞炎症损伤的作用及机制研究 被引量:12
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作者 郭依宁 刘景 +6 位作者 王俊岩 张璐 邹凌 冼绍祥 杨忠奇 王陵军 黄育生 《中华中医药学刊》 CAS 北大核心 2021年第8期92-96,I0025,共6页
目的通过观察心阳片含药血清调控NLRP3介导的细胞焦亡对心肌细胞炎症损伤的保护作用,探讨心阳片防治心力衰竭的作用机制。方法随机将40只雄性SD大鼠分成空白组、心阳片低、中、高剂量组,分别给予临床等效剂量的1、2、4倍心阳片(0.24、0... 目的通过观察心阳片含药血清调控NLRP3介导的细胞焦亡对心肌细胞炎症损伤的保护作用,探讨心阳片防治心力衰竭的作用机制。方法随机将40只雄性SD大鼠分成空白组、心阳片低、中、高剂量组,分别给予临床等效剂量的1、2、4倍心阳片(0.24、0.48、0.96 g/kg)灌胃;空白组给予等量蒸馏水进行灌胃。各组大鼠灌胃2次/d, 2 mL/次,连续灌胃7 d。末次给药灌胃后,腹主动脉取血,分离血清。用LPS/ATP(1μg/mL LPS刺激细胞24 h,再用5 mmol/L ATP刺激细胞4 h)处理HL-1心肌细胞,并分为:空白组(NC)、模型组(LPS/ATP+空白血清)、心阳片低剂量组(LPS/ATP+低剂量心阳片血清)、心阳片中剂量组(LPS/ATP+中剂量心阳片血清)、心阳片高剂量组(LPS/ATP+高剂量心阳片血清)。CCK8检测细胞活性,免疫荧光检测各组细胞NLRP3的表达情况,RT-qPCR检测NLRP3、GSDMD、IL-1β、Caspase-1mRNA转录水平,Western Blot检测心肌细胞NLRP3、pro-IL-1β、IL-1β、IL-18、cleaved-GSDMD、pro-Caspase-1、Caspase-1、ASC蛋白表达情况。结果与空白组相比,LPS/ATP组HL-1细胞活力明显降低,NLRP3、GSDMD、IL-1β、Caspase-1mRNA水平升高(P<0.05),NLRP3、pro-IL-1β、IL-1β、IL-18、cleaved-GSDMD、pro-Caspase-1、Caspase-1、ASC蛋白表达明显升高(P<0.05);与LPS/ATP组相比,心阳片含药血清低、中、高剂量组细胞活力增加,NLRP3、GSDMD、IL-1β、Caspase-1mRNA水平降低(P<0.05),NLRP3、pro-IL-1β、IL-1β、IL-18、cleaved-GSDMD、pro-Caspase-1、Caspase-1、ASC蛋白表达明显降低(P<0.05)。结论心阳片含药血清能改善LPS/ATP诱导HL-1细胞炎症损伤,其机制可能是通过抑制NLRP3/IL-1β介导的细胞焦亡发挥作用。 展开更多
关键词 NLRP3 心肌细胞 HL-1 LPS 细胞焦亡 心阳片
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