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抗克伦特罗单链抗体可溶性表达及特性鉴定
被引量：
4
1
作者
王弘
潘科
+5 位作者
杨金易
张宏斌
王捷
武婕
雷红涛
孙远明
《食品科学》
EI
CAS
CSCD
北大核心
2007年第12期332-335,共4页
目的:表达抗克伦特罗(CBL)可溶性单链抗体(scFv)并进行抗原结合活性鉴定。方法:利用呈现scFv的重组噬菌体感染大肠杆菌HB2151,IPTG诱导可溶性scFv表达。渗透休克法提取菌体细胞周质腔中scFv。经SDS-PAGE、Western-Blotting以及间接ELIS...
目的:表达抗克伦特罗(CBL)可溶性单链抗体(scFv)并进行抗原结合活性鉴定。方法:利用呈现scFv的重组噬菌体感染大肠杆菌HB2151,IPTG诱导可溶性scFv表达。渗透休克法提取菌体细胞周质腔中scFv。经SDS-PAGE、Western-Blotting以及间接ELISA法分析检测可溶性scFv的表达,并采用间接竞争ELISA法鉴定scFv的抗原结合活性。结果:细菌培养上清及周质腔中均有抗CBL可溶性scFv表达,其分子量约为29kD;上清液及周质腔中scFv效价分别为1:80,1:1600,能够被CBL竞争性抑制,IC50分别为0.78、0.95ng/ml。结论:可溶性抗CBLscFv在大肠杆菌HB2151中获得成功表达,表达的scFv与CBL具有很好的结合活性,可用于进一步建立CBL相应的免疫学检测方法。
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关键词
克伦特罗
单链抗体
可溶性表达
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职称材料
题名
抗克伦特罗单链抗体可溶性表达及特性鉴定
被引量：
4
1
作者
王弘
潘科
杨金易
张宏斌
王捷
武婕
雷红涛
孙远明
机构
广东省教育厅食品质量安全重点实验室华南农业大学食品质量与安全研究所
广州军区广州总医院医学试验科
出处
《食品科学》
EI
CAS
CSCD
北大核心
2007年第12期332-335,共4页
基金
国家自然科学基金项目(30400354
20477012)
+1 种基金
教育部高等学校博士点基金项目(20050564011)
广东省自然科学基金项目(04300502)
文摘
目的:表达抗克伦特罗(CBL)可溶性单链抗体(scFv)并进行抗原结合活性鉴定。方法:利用呈现scFv的重组噬菌体感染大肠杆菌HB2151,IPTG诱导可溶性scFv表达。渗透休克法提取菌体细胞周质腔中scFv。经SDS-PAGE、Western-Blotting以及间接ELISA法分析检测可溶性scFv的表达,并采用间接竞争ELISA法鉴定scFv的抗原结合活性。结果:细菌培养上清及周质腔中均有抗CBL可溶性scFv表达,其分子量约为29kD;上清液及周质腔中scFv效价分别为1:80,1:1600,能够被CBL竞争性抑制,IC50分别为0.78、0.95ng/ml。结论:可溶性抗CBLscFv在大肠杆菌HB2151中获得成功表达,表达的scFv与CBL具有很好的结合活性,可用于进一步建立CBL相应的免疫学检测方法。
关键词
克伦特罗
单链抗体
可溶性表达
Keywords
clenbuteroh single chain Fv
soluble expression
分类号
Q78 [生物学—分子生物学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
抗克伦特罗单链抗体可溶性表达及特性鉴定
王弘
潘科
杨金易
张宏斌
王捷
武婕
雷红涛
孙远明
《食品科学》
EI
CAS
CSCD
北大核心
2007
4
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