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转VEGF基因对血管损伤后修复过程中基质金属蛋白酶表达的影响被引量：4: 1; 作者韦方耿庆山 +4 位作者冯建章林华欢蒋祖勋余细勇周钢《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第1期64-67,共4页; 目的 :观察局部转染血管内皮生长因子 (VEGF)基因对血管球囊拉伤后修复过程中基质金属蛋白酶(MMPs)及其组织抑制因子 (TIMPs)表达的影响。方法 :90只新西兰大白兔随机分为 3组 ,Ⅰ组单纯拉伤右髂动脉 ;Ⅱ组拉伤后局部转染真核表达质粒Ad... 展开更多; 关键词血管损伤修复基质金属蛋白酶内皮生长因子; 在线阅读下载PDF 职称材料

人血管生成抑制因子canstatin基因的克隆及真核表达被引量：1: 2; 作者单志新林秋雄 +5 位作者余细勇刘媛符永恒谭虹虹郑猛林曙光《中山大学学报（医学科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2004年第B06期4-6,共3页; [目的]为研究canstatin对动脉粥样硬化斑块的稳定作用,克隆人canstatin基因,并在COS7细胞中表达出具有生物活性的canstatin。[方法]利用RT-PCR技术,从人脐静脉血管内皮细胞中扩增canstatin cDNA,并定向克隆入真核表达载体pSeeTag2C中... 展开更多; 关键词人脐静脉血管内皮细胞真核表达 COS7细胞人血血管生成抑制因子扩增增殖定向克隆 DNA 脂质体转染法; 在线阅读下载PDF 职称材料

人血管内皮生长因子(VEGF_(165))在大肠杆菌中的表达及鉴定被引量：1: 3; 作者单志新余细勇 +5 位作者林秋雄刘媛杨敏符永恒谭虹虹林曙光《中山大学学报（医学科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2004年第B06期23-25,共3页; [目的]克隆人VEGF165基因,并在大肠杆菌BL21(DE3)中表达、纯化重组VEGF165(rVEGF165)蛋白。[方法]用 PCR技术,从人心脏cDNA文库中扩增VEGF165 cDNA,并定向克隆人原核表达载体pET-28a中。用IPTG诱导VEGF165在大肠杆菌BL21(DE3)中表达。... 展开更多; 关键词 VEGF165 血管内皮生长因子高效表达人血大肠杆菌血管内皮细胞心脏 IPTG 亲合层析 CDNA文库; 在线阅读下载PDF 职称材料

血管生成素1基因真核表达质粒的构建及测序: 4; 作者单志新余细勇 +4 位作者林秋雄符永恒谭虹虹郑猛林曙光《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第9期1283-1285,共3页; 目的 :构建血管生成素 1(Ang1)的真核表达质粒psecTagBk -Ang1。方法 :用PCR方法从人心脏文库中扩增Ang1基因全外显子片段 ,并定向插入真核表达载体psecTagBk中 ,用限制性内切酶酶切和测序鉴定克隆的Ang1基因。结果 :扩增出人Ang1cDNA片... 展开更多; 关键词血管生长素质粒克隆分子; 在线阅读下载PDF 职称材料

细菌-酵母穿梭表达质粒pGBKT7-MIF的构建及转化被引量：2: 5; 作者单志新余细勇 +3 位作者林秋雄符永恒谭虹虹林曙光《中山医科大学学报》 CSCD 北大核心 2002年第5期333-335,共3页; 【目的】构建并转化能在酵母菌AH10 9中表达巨噬细胞游走抑制因子 (MIF)的穿梭表达质粒pGBKT7 MIF。【方法】用RT PCR方法从人T淋巴细胞中扩增MIF基因全外显子片段 ,并定向克隆入细菌酵母穿梭表达质粒 pGBKT7中 ;用PEG/LiAC法将pGBKT7... 展开更多; 关键词巨噬细胞游走抑制因子质粒pGBKT7 分子克隆; 在线阅读下载PDF 职称材料

应用温度梯度凝胶电泳筛选冠心病人β_2-AR的Gln27Glu突变被引量：1: 6; 作者谭虹虹余细勇 +1 位作者单志新符永恒《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第11期1552-1552,共1页; 关键词温度梯度凝胶电泳筛选冠心病 Β2-AR GLN27GLU 基因突变; 在线阅读下载PDF 职称材料

用编码βARKct的重组腺病毒阻断Gβγ介导的信号转导途径: 7; 作者单志新郑猛 +4 位作者余细勇林秋雄符永恒谭虹虹林曙光《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第11期1551-1552,共2页; 关键词编码βARKct 重组腺病毒信号转导途径 β肾上腺素受体激酶1 氨基酸残基 Gβγ介导心肌细胞肥大; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名转VEGF基因对血管损伤后修复过程中基质金属蛋白酶表达的影响被引量：4: 1; 作者韦方耿庆山冯建章林华欢蒋祖勋余细勇周钢; 机构广东省心血管病研究所心内科广东省人民医院病理科广东省心血管病研究所分子药理室; 出处《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第1期64-67,共4页; 基金广东省重点攻关项目 (No.991 30 670 2G); 文摘目的 :观察局部转染血管内皮生长因子 (VEGF)基因对血管球囊拉伤后修复过程中基质金属蛋白酶(MMPs)及其组织抑制因子 (TIMPs)表达的影响。方法 :90只新西兰大白兔随机分为 3组 ,Ⅰ组单纯拉伤右髂动脉 ;Ⅱ组拉伤后局部转染真核表达质粒AdtrackCMV ;Ⅲ组拉伤后局部转染pAdtrackCMV -VEGF1 65 ;每组按实验终点随机分为 5个亚组 ,术前一周开始给予高脂饮食至实验终点。取拉伤段髂动脉用于总RNA提取、组织病理和免疫组化检测。结果 :3组动物血脂水平保持在正常的 5 - 1 0倍 ,组间血管损伤程度评分相似 (P >0 .0 5)。Ⅰ、Ⅱ组整个观察过程中均可检测到MMP2、TIMP1 ,2持续表达 ;而转VEGF基因组术后 3d时可检测到MMP1 ,2 ,9、TIMP1 ,2表达 ,1周时达到高峰 ,8周时无表达。结论 :血管损伤后修复过程中存在MMPs和TIMPs表达失衡 ,致使基质堆积 ,并发生病理性重塑 ,而局部转染VEGF基因选择性改变局部MMPs表达。; 关键词血管损伤修复基质金属蛋白酶内皮生长因子; Keywords Endothelial growth factors Metalloproteinases Genes Rabbits; 分类号 R331.32 [医药卫生—人体生理学] R543 [医药卫生—心血管疾病]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名人血管生成抑制因子canstatin基因的克隆及真核表达被引量：1: 2; 作者单志新林秋雄余细勇刘媛符永恒谭虹虹郑猛林曙光; 机构广东省心血管病研究所分子药理室广东省人民医院医学研究中心; 出处《中山大学学报（医学科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2004年第B06期4-6,共3页; 基金广东省自然科学科学基金团队资助项目(015015)广东省自然科学科学基金资助项目(033189)广东省科技计划项目(B02160-03)广东省卫生厅科研基金资助项目(B2003002); 文摘 [目的]为研究canstatin对动脉粥样硬化斑块的稳定作用,克隆人canstatin基因,并在COS7细胞中表达出具有生物活性的canstatin。[方法]利用RT-PCR技术,从人脐静脉血管内皮细胞中扩增canstatin cDNA,并定向克隆入真核表达载体pSeeTag2C中。用脂质体转染法,将重组质粒pSecTag2C-canstatin转入COS7细胞。培养48 h后,对转化的COS7细胞行PCR 和Western-blot鉴定,用MTT法检测canstatin对人脐静脉血管内皮细胞增殖的抑制作用。[结果]从人脐静脉血管内皮细胞中扩增出canstatin cDNA片段。测序结果显示,克隆的canstatin cDNA长684 bp,序列与文献报道一致。从pSecTag2C-canstatin转化的COS7细胞中能特异地扩增出canstatin基因片段,Westem-blot结果显示,转化的COS7细胞中有特异的34 kDa的 canstatin表达。MTT检测显示,表达canstatin的COS7细胞上清能呈剂量依赖性地抑制脐静脉血管内皮细胞的增殖。[结论] 构建了真核表达重组质粒pSecTag2C-canstatin,在COS7中表达出具有生物活性的人canstatin。; 关键词人脐静脉血管内皮细胞真核表达 COS7细胞人血血管生成抑制因子扩增增殖定向克隆 DNA 脂质体转染法; 分类号 R730 [医药卫生—肿瘤] Q785 [生物学—分子生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名人血管内皮生长因子(VEGF_(165))在大肠杆菌中的表达及鉴定被引量：1: 3; 作者单志新余细勇林秋雄刘媛杨敏符永恒谭虹虹林曙光; 机构广东省心血管病研究所分子药理室广东省人民医院医学研究中心; 出处《中山大学学报（医学科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2004年第B06期23-25,共3页; 基金广东省自然科学科学基金团队项目(015015)广东省科技计划项目(B02160-03)广东省卫生厅项目(A2002935)广东省人民医院科研基金项目(Y01075); 文摘 [目的]克隆人VEGF165基因,并在大肠杆菌BL21(DE3)中表达、纯化重组VEGF165(rVEGF165)蛋白。[方法]用 PCR技术,从人心脏cDNA文库中扩增VEGF165 cDNA,并定向克隆人原核表达载体pET-28a中。用IPTG诱导VEGF165在大肠杆菌BL21(DE3)中表达。用HisTrap亲合层析柱纯化重组rVEGF165,Western-blot鉴定。根据人VEGF165的促血管内皮细胞增殖的特性,用MTT法检测重组VEGF165的生物学活性。[结果]从人心脏cDNA文库中扩增出VEGF165 cDNA片段。克隆的 VEGF165 cDNA长576 bp,编码191个氨基酸残基,序列与文献报道一致。SDS-PAGE电泳显示,经IPTG诱导,高效表达出25 ku 的rVEGF165,主要存在于包涵体中,约占菌体总蛋白的20％。MTT检测显示,复性后的rVEGF165能呈剂量依赖性地促进脐静脉血管内皮细胞增殖。[结论]克隆、测定了人VEGF165基因,并在大肠杆菌BL21(DE3)中表达出rVEGF165。; 关键词 VEGF165 血管内皮生长因子高效表达人血大肠杆菌血管内皮细胞心脏 IPTG 亲合层析 CDNA文库; 分类号 R542.22 [医药卫生—心血管疾病] R54 [医药卫生—心血管疾病]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名血管生成素1基因真核表达质粒的构建及测序: 4; 作者单志新余细勇林秋雄符永恒谭虹虹郑猛林曙光; 机构广东省心血管病研究所分子药理室; 出处《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第9期1283-1285,共3页; 基金广东省自然科学基金团队项目 (No .0 15 0 15 ) 广东省人民医院院内基金启动项目(Y0 10 75) 广东省医学科学技术研究基金 (A2 0 0 2 935 ); 文摘目的 :构建血管生成素 1(Ang1)的真核表达质粒psecTagBk -Ang1。方法 :用PCR方法从人心脏文库中扩增Ang1基因全外显子片段 ,并定向插入真核表达载体psecTagBk中 ,用限制性内切酶酶切和测序鉴定克隆的Ang1基因。结果 :扩增出人Ang1cDNA片段 ,测序结果显示扩增的Ang1cDNA包括长为 14 97bp、14 94bp的 2种剪切体 ,分别编码 4 98和 4 97个氨基酸残基。限制性内切酶酶切和DNA测序证实获得正确的重组质粒psecTagBk -Ang1。结论 :发现 2种共存的Ang1cDNA剪切体 ,并成功构建真核表达质粒psecTagBk -Ang1。; 关键词血管生长素质粒克隆分子; Keywords Angiopoietin Plasmids Cloning, molecular; 分类号 R392.11 [医药卫生—免疫学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名细菌-酵母穿梭表达质粒pGBKT7-MIF的构建及转化被引量：2: 5; 作者单志新余细勇林秋雄符永恒谭虹虹林曙光; 机构广东省心血管病研究所分子药理室; 出处《中山医科大学学报》 CSCD 北大核心 2002年第5期333-335,共3页; 基金广东省自然科学基金团队项目 (0 15 0 15 ) 广东省人民医院院内基金启动项目 (Y0 10 75 )资助; 文摘【目的】构建并转化能在酵母菌AH10 9中表达巨噬细胞游走抑制因子 (MIF)的穿梭表达质粒pGBKT7 MIF。【方法】用RT PCR方法从人T淋巴细胞中扩增MIF基因全外显子片段 ,并定向克隆入细菌酵母穿梭表达质粒 pGBKT7中 ;用PEG/LiAC法将pGBKT7 MIF转化感受态酵母菌AH10 9。提取转化酵母菌的质粒DNA ,转化大肠杆菌并行质粒的酶切鉴定。【结果】扩增出人MIFcDNA片段 ,限制性内切酶酶切和DNA测序证实获得正确的重组质粒 pGBKT7 MIF ;获得可在色氨酸缺陷培养基 (SD/ trp)上生长含 pGBKT7 MIF的酵母菌克隆。酶切鉴定表明pGBKT7 MIF已转化入酵母菌AH10 9。【结论】成功构建穿梭质粒 pGBKT7 MIF ,并转化入酵母菌AH10 9。; 关键词巨噬细胞游走抑制因子质粒pGBKT7 分子克隆; Keywords macrophage migration inhibitory factors plasmid pGBKT7 cloning,molecular; 分类号 R392.11 [医药卫生—免疫学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名应用温度梯度凝胶电泳筛选冠心病人β_2-AR的Gln27Glu突变被引量：1: 6; 作者谭虹虹余细勇单志新符永恒; 机构广东省心血管病研究所分子药理室; 出处《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第11期1552-1552,共1页; 基金广东省自然科学基金团队项目 (No .0 15 0 15 ) 广东省医学科学技术研究基金资助项目 (No .A2 0 0 2 935 ); 关键词温度梯度凝胶电泳筛选冠心病 Β2-AR GLN27GLU 基因突变; 分类号 R541.4 [医药卫生—心血管疾病] R394 [医药卫生—医学遗传学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名用编码βARKct的重组腺病毒阻断Gβγ介导的信号转导途径: 7; 作者单志新郑猛余细勇林秋雄符永恒谭虹虹林曙光; 机构广东省心血管病研究所分子药理室; 出处《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第11期1551-1552,共2页; 基金国家自然科学基金资助项目 (No .30 2 712 87) 广东省自然科学基金团队项目 (No .0 15 0 15 ) 卫生部默沙东基金项目 (No .0 0 12 2 0 ); 关键词编码βARKct 重组腺病毒信号转导途径 β肾上腺素受体激酶1 氨基酸残基 Gβγ介导心肌细胞肥大; 分类号 R542.2 [医药卫生—心血管疾病] R36 [医药卫生—病理学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

	题名	作者	出处	发文年	被引量	操作
1	转VEGF基因对血管损伤后修复过程中基质金属蛋白酶表达的影响	韦方耿庆山冯建章林华欢蒋祖勋余细勇周钢	《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心	2003	4	在线阅读下载PDF 职称材料
2	人血管生成抑制因子canstatin基因的克隆及真核表达	单志新林秋雄余细勇刘媛符永恒谭虹虹郑猛林曙光	《中山大学学报（医学科学版）》 CAS CSCD 北大核心	2004	1	在线阅读下载PDF 职称材料
3	人血管内皮生长因子(VEGF_(165))在大肠杆菌中的表达及鉴定	单志新余细勇林秋雄刘媛杨敏符永恒谭虹虹林曙光	《中山大学学报（医学科学版）》 CAS CSCD 北大核心	2004	1	在线阅读下载PDF 职称材料
4	血管生成素1基因真核表达质粒的构建及测序	单志新余细勇林秋雄符永恒谭虹虹郑猛林曙光	《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心	2003	0	在线阅读下载PDF 职称材料
5	细菌-酵母穿梭表达质粒pGBKT7-MIF的构建及转化	单志新余细勇林秋雄符永恒谭虹虹林曙光	《中山医科大学学报》 CSCD 北大核心	2002	2	在线阅读下载PDF 职称材料
6	应用温度梯度凝胶电泳筛选冠心病人β_2-AR的Gln27Glu突变	谭虹虹余细勇单志新符永恒	《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心	2003	1	在线阅读下载PDF 职称材料
7	用编码βARKct的重组腺病毒阻断Gβγ介导的信号转导途径	单志新郑猛余细勇林秋雄符永恒谭虹虹林曙光	《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心	2003	0	在线阅读下载PDF 职称材料