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ox-LDL诱导巨噬细胞TNF-α的时序表达
被引量：
3
1
作者
林秋雄
余细勇
+2 位作者
单志新
林曙光
Huiyao Lan
《中国病理生理杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2003年第11期1552-1553,共2页
关键词
OX-LDL诱导
巨噬细胞
TNF-Α
时序表达
肿瘤坏死因子A
氧化型低密度脂蛋白
动脉粥样硬化
在线阅读
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职称材料
编码绿色荧光蛋白和βARKct的重组腺病毒的制备
被引量：
1
2
作者
单志新
郑猛
+4 位作者
余细勇
林秋雄
符永恒
谭虹虹
林曙光
《中山大学学报（医学科学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2005年第4期392-395,408,共5页
【目的】制备编码绿色荧光蛋白(GFP)和G茁γ活性抑制剂茁ARKct的重组腺病毒载体。【方法】构建腺病毒穿梭质粒pAdTrack-CMV-茁ARKct,经PmeI线性化后转化入含腺病毒骨架质粒pAdEasy-I的BJ5183菌,筛选获得重组腺病毒质粒pAdEasy-gfp-茁AR...
【目的】制备编码绿色荧光蛋白(GFP)和G茁γ活性抑制剂茁ARKct的重组腺病毒载体。【方法】构建腺病毒穿梭质粒pAdTrack-CMV-茁ARKct,经PmeI线性化后转化入含腺病毒骨架质粒pAdEasy-I的BJ5183菌,筛选获得重组腺病毒质粒pAdEasy-gfp-茁ARKct。用LipoFectamine2000将经PacI线性化的pAdEasy-gfp-茁ARKct转染入人胚肾293细胞,包装并扩增出重组腺病毒颗粒rAd-gfp-茁ARKct。用氯化铯高速梯度离心、纯化rAd-gfp-茁ARKct。用rAd-GFP-茁ARKct干预去甲肾上腺素诱导的乳鼠心肌细胞肥大过程,观察对茁肌球蛋白重链(茁MHC)基因表达的影响。【结果】将pAdTrack-CMV-茁ARKct转入含pAdEasy-I的BJ5183菌后获得20%的阳性重组体克隆。重组腺病毒质粒在293细胞中包装并扩增出大量的腺病毒,经PCR鉴定含有茁ARKct编码基因。透析纯化得到重组腺病毒滴度为6.0×106pfu/mL。rAd-GFP-茁ARKct表达的茁ARKct可抑制乳鼠心肌细胞茁MHC的高表达。【结论】成功构建重组腺病毒载体,并在293细胞中包装、制备出可表达茁ARKct的重组腺病毒rAd-gfp-茁ARKct。
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关键词
绿色荧光蛋白
制备
重组腺病毒载体
人胚肾293细胞
心肌细胞肥大
去甲肾上腺素
肌球蛋白重链
PCR鉴定
穿梭质粒
骨架质粒
病毒颗粒
梯度离心
基因表达
编码基因
病毒滴度
线性化
MHC
抑制剂
PME
Pac
包装
氯化铯
重组体
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职称材料
题名
ox-LDL诱导巨噬细胞TNF-α的时序表达
被引量：
3
1
作者
林秋雄
余细勇
单志新
林曙光
Huiyao Lan
机构
广东省
心血管病
研究所
Department of Medicine
出处
《中国病理生理杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2003年第11期1552-1553,共2页
基金
广东省自然科学基金团队项目 (No .0 15 0 15 )
广东省医学科学技术研究基金资助项目 (No.A2 0 0 2 935 )
关键词
OX-LDL诱导
巨噬细胞
TNF-Α
时序表达
肿瘤坏死因子A
氧化型低密度脂蛋白
动脉粥样硬化
分类号
R543.4 [医药卫生—心血管疾病]
R36 [医药卫生—病理学]
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职称材料
题名
编码绿色荧光蛋白和βARKct的重组腺病毒的制备
被引量：
1
2
作者
单志新
郑猛
余细勇
林秋雄
符永恒
谭虹虹
林曙光
机构
广东省心血管病研究所冠心病研究重点实验室
出处
《中山大学学报（医学科学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2005年第4期392-395,408,共5页
基金
国家自然科学基金资助项目(30271287
30300421)
+1 种基金
广东省自然科学基金团队项目(015015)
广东省医学科学技术研究基金项目(A2002935)
文摘
【目的】制备编码绿色荧光蛋白(GFP)和G茁γ活性抑制剂茁ARKct的重组腺病毒载体。【方法】构建腺病毒穿梭质粒pAdTrack-CMV-茁ARKct,经PmeI线性化后转化入含腺病毒骨架质粒pAdEasy-I的BJ5183菌,筛选获得重组腺病毒质粒pAdEasy-gfp-茁ARKct。用LipoFectamine2000将经PacI线性化的pAdEasy-gfp-茁ARKct转染入人胚肾293细胞,包装并扩增出重组腺病毒颗粒rAd-gfp-茁ARKct。用氯化铯高速梯度离心、纯化rAd-gfp-茁ARKct。用rAd-GFP-茁ARKct干预去甲肾上腺素诱导的乳鼠心肌细胞肥大过程,观察对茁肌球蛋白重链(茁MHC)基因表达的影响。【结果】将pAdTrack-CMV-茁ARKct转入含pAdEasy-I的BJ5183菌后获得20%的阳性重组体克隆。重组腺病毒质粒在293细胞中包装并扩增出大量的腺病毒,经PCR鉴定含有茁ARKct编码基因。透析纯化得到重组腺病毒滴度为6.0×106pfu/mL。rAd-GFP-茁ARKct表达的茁ARKct可抑制乳鼠心肌细胞茁MHC的高表达。【结论】成功构建重组腺病毒载体,并在293细胞中包装、制备出可表达茁ARKct的重组腺病毒rAd-gfp-茁ARKct。
关键词
绿色荧光蛋白
制备
重组腺病毒载体
人胚肾293细胞
心肌细胞肥大
去甲肾上腺素
肌球蛋白重链
PCR鉴定
穿梭质粒
骨架质粒
病毒颗粒
梯度离心
基因表达
编码基因
病毒滴度
线性化
MHC
抑制剂
PME
Pac
包装
氯化铯
重组体
Keywords
homologous recombination
adenoviruses
G protein
分类号
R394 [医药卫生—医学遗传学]
R979.5 [医药卫生—药品]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
ox-LDL诱导巨噬细胞TNF-α的时序表达
林秋雄
余细勇
单志新
林曙光
Huiyao Lan
《中国病理生理杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2003
3
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
编码绿色荧光蛋白和βARKct的重组腺病毒的制备
单志新
郑猛
余细勇
林秋雄
符永恒
谭虹虹
林曙光
《中山大学学报（医学科学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2005
1
在线阅读
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职称材料
已选择
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参考文献
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