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新一代基因编码5-羟色胺荧光探针优化及应用
1
作者 徐慕凡 张坤 +3 位作者 王静怡 高欣柯 程傲冰 张鹏 《上海交通大学学报(医学版)》 北大核心 2025年第5期529-537,共9页
目的·优化基于细菌周质结合蛋白(periplasmic binding proteins,PBPs)设计的基因编码5-羟色胺(5-hydroxytryptamine,5-HT)荧光探针iSeroSnFR,以提高其在体内外5-HT检测中的荧光反应和时空分辨率,从而为相关研究提供更为精确的工具... 目的·优化基于细菌周质结合蛋白(periplasmic binding proteins,PBPs)设计的基因编码5-羟色胺(5-hydroxytryptamine,5-HT)荧光探针iSeroSnFR,以提高其在体内外5-HT检测中的荧光反应和时空分辨率,从而为相关研究提供更为精确的工具。方法·采用Gibson重组技术,将原始探针iSeroSnFR(以下称为iSeroSnFR1.0)中的循环重排超折叠绿色荧光蛋白(circularly permuted superfolder green fluorescence protein,cpsfGFP)替换为源自乙酰胆碱荧光探针iAChSnFR的cpsfGFP基因序列,构建新型基因编码的5-HT探针iSeroSnFR1.2。在HEK293细胞中过表达这2种探针,并利用压力给药系统瞬时加入外源性5-HT,比较其荧光反应动态范围和动力学特性。此外,为模拟生理环境,利用Sindbis病毒将探针表达于体外培养的原代小鼠皮层神经元,通过电刺激诱导神经元释放内源性5-HT,以进一步评估2种探针在检测内源性5-HT方面的性能。结果·在HEK293细胞中,iSeroSnFR1.2对外源性5-HT的荧光响应(ΔF/F_(0))是iSeroSnFR1.0的1.5倍。与iSeroSnFR1.0(上升时间44.9 ms和衰减时间常数1730.4 ms)相比,iSeroSnFR1.2的上升时间(36.3 ms)和衰减时间常数(1003.6 ms)分别缩短了19.1%和42.0%。在原代小鼠皮层神经元中,iSeroSnFR1.2对电刺激诱导的内源性5-HT释放的荧光反应为iSeroSnFR1.0的2.7倍,上升时间和下降时间分别缩短了44.0%和26.7%。此外,iSeroSnFR1.2还表现出更高的基底荧光强度,有利于在高背景环境中进行成像。结论·优化后的iSeroSnFR1.2显著提高了对5-HT检测的荧光响应和时间分辨率,为体内外5-HT动态检测研究提供了更为有力的工具,有望促进神经科学、精神医学等领域对5-HT在各种生理和病理过程中作用机制的深入理解。 展开更多
关键词 基因编码探针 5-羟色胺 循环重排超折叠绿色荧光蛋白 细菌周质结合蛋白
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瑞芬太尼联合异丙酚用于无痛人工流产术的安全性和可行性研究 被引量：36
2
作者 刘继云 邬子林 佘守章 《中国全科医学》 CAS CSCD 2005年第6期456-458,共3页
目的观察瑞芬太尼联合异丙酚用于无痛人工流产术的安全性和可行性.方法选择早孕6～10周自愿行人工流产术的孕妇90例,随机分成3组(n=30),瑞芬太尼组(R组),瑞芬太尼+异丙酚组(RP组)和异丙酚组(P组).术中以不同的药物联合及不同的药物剂量... 目的观察瑞芬太尼联合异丙酚用于无痛人工流产术的安全性和可行性.方法选择早孕6～10周自愿行人工流产术的孕妇90例,随机分成3组(n=30),瑞芬太尼组(R组),瑞芬太尼+异丙酚组(RP组)和异丙酚组(P组).术中以不同的药物联合及不同的药物剂量静脉输注,并观察受术者的循环、呼吸情况、镇痛效果和不良反应.结果 R组静脉注射瑞芬太尼后,受术者均有不同程度的呼吸抑制,呼气末二氧化碳分压(ETCO2)逐步增高(P＜0.01),血压无明显变化(P＞0.05),心率明显减慢(P＜0.05),术中有6例诉疼痛,5例诉头晕,3例诉肌颤等;RP组受术者给药前、后血压间差别无显著性意义(P＞0.05),而心率和呼吸明显减慢(P＜0.01);P组受术者用药后血压和心率均较用药前显著下降(P＜0.05),均有一过性呼吸暂停,而后逐步出现深大呼吸,潮气量(VT)、呼吸频率(RR)和分钟通气量(MV)显著高于术前水平(P＜0.01),ETCO2 低于术前水平(P＜0.01).3组受术者镇痛效果间差别无显著性意义(P＞0.05).结论单纯瑞芬太尼和异丙酚用于无痛人工流产术镇痛效果较好,但不良反应较多.瑞芬太尼联合异丙酚静脉注射,镇痛效果较好,有协同作用,循环系统稳定,呼吸抑制相对较轻,不良反应少,术后清醒快,其用于无痛人工流产术具有可行性和实用性,但需加强呼吸管理. 展开更多
关键词 瑞芬太尼 异丙酚 受术者 无痛人工流产术 联合 镇痛效果 血压 目的观 水平 结论
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罗哌卡因硬膜外阻滞对老年及中青年患者顺式阿曲库铵肌松效应的影响 被引量：2
3
作者 邝绮文 许立新 +3 位作者 许学兵 佘守章 邬子林 闫焱 《临床麻醉学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第7期633-636,共4页
目的观察全麻复合罗哌卡因硬膜外阻滞对老年及中青年患者顺式阿曲库铵肌松效应的影响。方法全麻复合硬膜外阻滞下行中下腹部手术的老年患者以及中青年患者各40例,分别随机均分为四组:老年患者均分为全麻复合硬膜外阻滞1组(EA_1组)、全麻... 目的观察全麻复合罗哌卡因硬膜外阻滞对老年及中青年患者顺式阿曲库铵肌松效应的影响。方法全麻复合硬膜外阻滞下行中下腹部手术的老年患者以及中青年患者各40例,分别随机均分为四组:老年患者均分为全麻复合硬膜外阻滞1组(EA_1组)、全麻1组(GA_1组),中青年患者均分为全麻复合硬膜外阻滞2组(EA_2组)和全麻2组(GA_2组)。EA_1组及EA_2组患者硬膜外分次给予0.75%罗哌卡因,GA_1组及GA_2组按相同方案给予等量生理盐水,静注依托咪酯、芬太尼及顺式阿曲库铵0.15mg/kg行全麻诱导,持续输注丙泊酚、舒芬太尼和顺式阿曲库铵维持麻醉,术中维持BIS于40～50之间及T1于10%Tc水平,观察各组患者顺式阿曲库铵肌松效应的变化。结果四组起效时间、恢复指数及TOFR自然恢复时间差异无统计学意义。EA_1组的临床肌松作用时间明显长于GA_1、EA_2和GA_2组(P<0.01或P<0.05),而GA_1、EA_2组的临床肌松作用时间明显长于GA_2组(P<0.05)。EA_1组顺式阿曲库铵的总维持用量明显低于GA_1、EA_2及GA_2组(P<0.01)。结论不论老年还是中青年患者,罗哌卡因硬膜外阻滞对顺式阿曲库铵的起效时间以及TOFR自然恢复时间无明显影响,但可延长其临床肌松作用时间,增强其肌松效应,老年患者罗哌卡因增强作用的时效延长,顺式阿曲库铵的维持用量明显减少。 展开更多
关键词 老年 顺式阿曲库铵 罗哌卡因 神经肌肉阻滞
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