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卵形鲳鲹生物学及繁养殖技术研究进展 被引量:1
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作者 陈华谱 《大连海洋大学学报》 北大核心 2025年第1期1-11,共11页
卵形鲳鲹(Trachinotus ovatus)是海水网箱、深远海大型化设施养殖的优良品种。近年来,中国卵形鲳鲹养殖业快速发展,卵形鲳鲹繁养殖关键技术获得突破,但其基础生物学及遗传育种研究相对薄弱导致的养殖性能下降等问题已成为产业可持续发... 卵形鲳鲹(Trachinotus ovatus)是海水网箱、深远海大型化设施养殖的优良品种。近年来,中国卵形鲳鲹养殖业快速发展,卵形鲳鲹繁养殖关键技术获得突破,但其基础生物学及遗传育种研究相对薄弱导致的养殖性能下降等问题已成为产业可持续发展的瓶颈。为揭示产业研究发展现状,本文综述了卵形鲳鲹的生物学特征,包括资源分布、栖息环境、形态及和繁殖生物学特征等,总结了近年来相关人工繁育与养殖、生理生态、遗传学等方面的研究成果,并结合卵形鲳鲹资源开发、养护及发展前景提出了未来的研究方向,包括良种选育、基础遗传机制、性腺发育调控机制及新品系开发4个方面,以期为未来卵形鲳鲹产业的稳定发展提供有益参考。 展开更多
关键词 卵形鲳鲹 生物学 繁育 养殖
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卵形鲳鲹促性腺激素β亚基的克隆鉴定及其受雌二醇的调控 被引量:1
2
作者 黄春艳 陈华谱 +3 位作者 郭煜文 王岩 杨浩 李广丽 《中山大学学报(自然科学版)(中英文)》 CAS 北大核心 2025年第1期172-181,共10页
促性腺激素(GtH,gonadotropin hormone)是垂体合成和分泌的一类重要糖蛋白激素,包括促卵泡生成素(Fsh,follicle stimulating hormone)和促黄体生成素(Lh,luteinizing hormone),在促进性腺发育和成熟过程中发挥重要作用。本研究成功克隆... 促性腺激素(GtH,gonadotropin hormone)是垂体合成和分泌的一类重要糖蛋白激素,包括促卵泡生成素(Fsh,follicle stimulating hormone)和促黄体生成素(Lh,luteinizing hormone),在促进性腺发育和成熟过程中发挥重要作用。本研究成功克隆了卵形鲳鲹(Trachinotus ovatus)fshβ和lhβ基因的开放阅读框(ORF,open reading frame)序列,fshβORF长度为363 bp,lhβORF长度为447 bp。通过荧光定量PCR技术(qPCR,quantitative realtime PCR)检测,发现fshβ和lhβ基因在卵形鲳鲹的下丘脑-垂体-性腺轴(HPG,hypothalamus-pituitary-gonadal axis)显著表达,在垂体中的表达水平最高,其次是下丘脑和性腺。此外,通过体外实验评估17β-雌二醇(E2,17β-estradiol)对卵形鲳鲹垂体组织中fshβ和lhβ基因表达的影响。结果显示,10μmol/L E2处理6 h后,GtHβ亚基基因的表达被极显著抑制。最后,使用雌激素受体(ER,estrogen receptor)拮抗剂体外孵育卵形鲳鲹垂体组织,发现广谱性拮抗剂Fulvestrant、ERβ拮抗剂Cyclofenil和ERα拮抗剂MPP(MPP dihydrochloride)均能够消除E2对GtHβ亚基基因表达的抑制作用。综上所述,研究结果表明E2对卵形鲳鲹GtH的分泌具有负反馈调节作用,为卵形鲳鲹生殖调控机制提供了有价值的见解。 展开更多
关键词 卵形鲳鲹(Trachinotus ovatus) 促性腺激素(GtH) 雌激素受体(ER) 17β-雌二醇(E2)
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ERR-dsRNA对罗氏沼虾卵巢中ERR及生殖相关基因表达的影响 被引量:9
3
作者 刘金磊 邓思平 +5 位作者 江东能 陈华谱 李广丽 吴天利 田昌绪 朱春华 《广东海洋大学学报》 CAS 2018年第3期8-16,共9页
【目的】研究雌激素相关受体(Estrogen-related receptor,ERR)在雌性罗氏沼虾生殖过程中的功能。【方法】通过注射双链RNA(Double-strandedRNA,dsRNA)干扰罗氏沼虾(Macrobrachium rosenbergii)ERR的表达,对干扰组和对照组的卵巢样本进... 【目的】研究雌激素相关受体(Estrogen-related receptor,ERR)在雌性罗氏沼虾生殖过程中的功能。【方法】通过注射双链RNA(Double-strandedRNA,dsRNA)干扰罗氏沼虾(Macrobrachium rosenbergii)ERR的表达,对干扰组和对照组的卵巢样本进行转录组测序,筛选与生殖相关的差异表达基因,并通过qPCR检测它们在卵巢发育过程中的表达。【结果】注射ERR-dsRNA后,卵巢中ERR mRNA和ERR蛋白的表达显著下降。ERR-dsRNA干扰组和对照组卵巢转录组测序获得的差异表达Unigene中,9条被富集到生殖GO条目,3条被富集到生殖过程GO条目,21条被富集到卵母细胞减数分裂Pathway条目。这些生殖相关的Unigene中差异倍数较大的有9条,经qPCR验证,5条在ERR干扰组和对照组间的表达差异有统计学意义。这5条Unigene中有3条在卵巢发育过程中的表达差异有统计学意义,其中2条(CL7112.Contig4_All和Unigene4600_All)与卵母细胞减数分裂有关,1条(CL4888.Contig2_All)与生殖相关激素的合成及释放有关。【结论】ERR可通过调控卵母细胞减数分裂和生殖相关激素的合成与释放调控罗氏沼虾卵巢发育。 展开更多
关键词 罗氏沼虾 雌激素相关受体(ERR) 生殖 RNA干扰(RNAI) 转录组分析
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金钱鱼孕激素受体基因的克隆、鉴定与表达研究 被引量:1
4
作者 石红娟 黄健旋 +6 位作者 朱晨阳 吴佳钢 何飞祥 江东能 黄洋 朱春华 李广丽 《水产科学》 CAS CSCD 北大核心 2022年第1期23-34,共12页
核受体(Pgr),隶属于核受体超家族,由核受体亚家族3C组成员3基因编码。孕酮通过结合Pgr介导其在脊椎动物繁殖过程中的生理学功能,因此,研究金钱鱼核受体基因(pgr基因)在不同组织及不同发育时期性腺中的表达模式,有助于为金钱鱼的繁殖提... 核受体(Pgr),隶属于核受体超家族,由核受体亚家族3C组成员3基因编码。孕酮通过结合Pgr介导其在脊椎动物繁殖过程中的生理学功能,因此,研究金钱鱼核受体基因(pgr基因)在不同组织及不同发育时期性腺中的表达模式,有助于为金钱鱼的繁殖提供理论依据。笔者克隆金钱鱼的pgr基因,用Megalign软件比较Pgr氨基酸同源性,用MEGA 7.0.4软件构建系统进化树,利用反转录PCR和实时荧光定量PCR分别探究pgr mRNA在金钱鱼各组织和性腺发育过程中的表达。金钱鱼pgr基因的开放阅读框(ORF)的长度为2016 bp,共编码671个氨基酸。氨基酸序列相似性分析发现,它与同属一个分支的鲈形目大黄鱼同源性最高。组织分布结果显示,pgr基因在雌、雄金钱鱼各组织中均有表达,且性腺、垂体中的表达最高。在垂体中,外源雌激素17β-雌二醇(E2)能显著升高pgr基因的表达。此外,随着性腺的发育,pgr基因在性成熟金钱鱼精巢、卵巢中的表达量最高。因此,Pgr对金钱鱼的生殖细胞发育成熟可能十分重要。 展开更多
关键词 金钱鱼 孕酮核受体基因 表达模式 性腺发育
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罗非鱼性别控制遗传育种研究进展 被引量:4
5
作者 江东能 焦开智 +6 位作者 张峻铭 彭友幸 杨空松 郑德锋 郭向召 石红娟 李广丽 《广东海洋大学学报》 CAS 北大核心 2022年第2期148-156,共9页
罗非鱼全雄养殖可有效控制繁殖、提高养殖效率,遗传全雄罗非鱼(Genetically male tilapia,GMT)技术是性别控制的高效手段,但GMT技术培育的鱼苗雄性率不稳定。基因组学和基因编辑等技术已广泛应用于罗非鱼研究,极大地促进了罗非鱼性别决... 罗非鱼全雄养殖可有效控制繁殖、提高养殖效率,遗传全雄罗非鱼(Genetically male tilapia,GMT)技术是性别控制的高效手段,但GMT技术培育的鱼苗雄性率不稳定。基因组学和基因编辑等技术已广泛应用于罗非鱼研究,极大地促进了罗非鱼性别决定与分化基础理论研究。分析导致XY个体性别逆转的可能因素,提出将来GMT技术研究的关键问题,探讨现代基因编辑技术在罗非鱼性别控制育种中可能应用。 展开更多
关键词 遗传全雄罗非鱼 性别控制 性别决定 基因编辑
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DNA甲基化修饰对金钱鱼卵巢Cyp17a1表达水平的影响 被引量:1
6
作者 周一帆 江政霆 +5 位作者 李雨 焦开智 潘书慧 许芮 李广丽 江东能 《广东海洋大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第2期46-53,共8页
【目的】分析DNA甲基化修饰对金钱鱼(Scatophagus argus)卵巢Cyp17a1表达的影响,进一步认识卵巢发育成熟相关基因表达的调控机制。【方法】分别取卵巢发育III、IV期的金钱鱼,以及投喂添加0(对照)、50、100μg/g雌二醇饲料30 d的2龄雌鱼,... 【目的】分析DNA甲基化修饰对金钱鱼(Scatophagus argus)卵巢Cyp17a1表达的影响,进一步认识卵巢发育成熟相关基因表达的调控机制。【方法】分别取卵巢发育III、IV期的金钱鱼,以及投喂添加0(对照)、50、100μg/g雌二醇饲料30 d的2龄雌鱼,用MethPrimer软件分析其Cyp17a1基因CpG二核苷酸位点分布特征,并预测CpG岛;采用亚硫酸氢盐测序法检测不同发育时期卵巢以及投喂雌二醇个体卵巢中的Cyp17a1的DNA甲基化修饰水平,并用实时荧光定量PCR分析Cyp17a1基因表达水平。【结果】金钱鱼Cyp17a1翻译起始位点2000 bp后无CpG岛,取第1外显子含有5个CpG位点(翻译起始位点后106、116、129、148和203 bp处)的区域用于DNA甲基化水平检测。金钱鱼III期卵巢Cyp17a1外显子1的DNA甲基化修饰水平显著高于IV期卵巢(P<0.05),与其mRNA表达水平呈负相关。116、129和203 bp处DNA甲基化存在发育时期差异,但106和148 bp处差异不显著(P>0.05)。投喂雌二醇后,金钱鱼卵巢Cyp17a1 mRNA表达水平和第1外显子CpG富集区域整体DNA甲基化修饰水平无显著变化(P>0.05),但雌激素处理雌鱼翻译起始位点后148、203 bp处甲基化水平明显上升(P<0.05)。【结论】金钱鱼卵巢Cyp17a1第一个外显子CpG富集区的整体甲基化水平与基因表达呈负相关,饲料E2可上调Cyp17a1第一个外显子148、205 bp处甲基化水平,表明甲基化修饰参与金钱鱼Cyp17a1的表达调控。 展开更多
关键词 金钱鱼 Cyp17a1 基因表达 亚硫酸氢盐测序法 DNA甲基化
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胡子鲇qRT-PCR内参基因的筛选
7
作者 沈奕君 朱奕安 +4 位作者 杨志华 叶明慧 周大颜 李广丽 田昌绪 《渔业科学进展》 CSCD 北大核心 2024年第5期144-154,共11页
实时荧光定量PCR(qRT-PCR)是研究基因表达有效的工具之一,选取合适的内参基因,是获得可靠的基因表达结果的关键。本研究以胡子鲇(Clarias fuscus)为研究对象,采用qRT-PCR技术检测了13个候选基因(actb1、actb2、ef1a、eef1b2、rpl13a、rp... 实时荧光定量PCR(qRT-PCR)是研究基因表达有效的工具之一,选取合适的内参基因,是获得可靠的基因表达结果的关键。本研究以胡子鲇(Clarias fuscus)为研究对象,采用qRT-PCR技术检测了13个候选基因(actb1、actb2、ef1a、eef1b2、rpl13a、rpl13、ccdc124、cfl1、nm23、eif3g、rap1a、ikbkg和ywhab)在胡子鲇性腺不同发育阶段和成鱼不同组织中的基因表达情况,并利用BestKeeper、GeNorm、NormFinder和RefFinder软件分析其表达稳定性,以筛选在胡子鲇性腺发育和不同组织中稳定表达的内参基因。结果显示,13个候选内参基因的定量PCR引物均可获得特异性扩增产物。在性腺不同发育阶段,候选基因表达稳定性顺序为actb2>rpl13>actb1>cfl1>rap1a>ef1a>rpl13a>ikbkg>eif3g>nm23>eef1b2>ywhab>ccdc124,成鱼不同组织中稳定性顺序为actb2>rpl13>cfl1>rap1a>ef1a>rpl13a>ikbkg>eif3g>nm23>actb1>eef1b2>ywhab>ccdc124。随后,选择稳定性前二的actb2和rpl13作为候选内参基因,分析zp3、atp2b3、slc13a5和parp8基因在胡子鲇雌、雄性腺中的相对表达量,结果进一步证实,以actb2为内参时,其雌雄性状差异基因表达水平更接近于转录组结果。综合分析表明,actb2基因可作为内参基因用于今后胡子鲇性腺不同发育时期和不同组织间功能基因表达特征的研究。 展开更多
关键词 胡子鲇 QRT-PCR 内参基因 表达稳定性
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泰国斗鱼抗缪勒氏管激素(AMH)基因cDNA克隆及表达 被引量:3
8
作者 陈华谱 洪广 +5 位作者 刘燕华 贺超 王晓玲 吴静娴 朱春华 李广丽 《广东海洋大学学报》 CAS 2017年第6期84-88,共5页
利用RACE(Rapid-amplification of cDNA ends)克隆技术从泰国斗鱼(Betta splendens)精巢中克隆抗缪勒氏管激素(Anti-Müllerian hormone,AMH)基因的c DNA序列,分析该基因序列与其他物种的差异,并用RT-PCR半定量方法分析其组织表达... 利用RACE(Rapid-amplification of cDNA ends)克隆技术从泰国斗鱼(Betta splendens)精巢中克隆抗缪勒氏管激素(Anti-Müllerian hormone,AMH)基因的c DNA序列,分析该基因序列与其他物种的差异,并用RT-PCR半定量方法分析其组织表达的性别差异。结果表明:泰国斗鱼AMH基因的cDNA序列全长为1 804 bp,其中开放读码框为1 596 bp,编码532个氨基酸残基,与其他物种的氨基酸序列差异较大,同源性最高仅55%;AMH前体蛋白的系统进化树显示,泰国斗鱼与尖吻鲈(Lates calcarifer)亲缘关系最近;AMH基因的组织表达有明显的组织特异性及性别差异,在性腺中表达量最高,雄性个体脑、脾和肌肉次之,垂体、肝、肾、心和肠中未检测到AMH表达,雌性个体脾、心脏和肌肉次之,脑、垂、肝和肾中未检测AMH表达。 展开更多
关键词 泰国斗鱼 抗缪勒氏管激素 基因克隆 序列分析 基因表达 组织分布
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小肽制品对凡纳滨对虾生长性能及其非特异性免疫能力的影响 被引量:4
9
作者 黄洋 杜涛 朱春华 《饲料研究》 CAS 北大核心 2019年第12期20-23,共4页
试验研究小肽制品对凡纳滨对虾的生长性能及免疫性能的影响。结果表明,在生长性能方面,C组(10 kg/t)、D组(15 kg/t)比对照组和B组(5 kg/t)有显著提高;C、D两组比对照组体重增长率分别提高17%和16%,差异显著(P<0.05);试验阶段成活率... 试验研究小肽制品对凡纳滨对虾的生长性能及免疫性能的影响。结果表明,在生长性能方面,C组(10 kg/t)、D组(15 kg/t)比对照组和B组(5 kg/t)有显著提高;C、D两组比对照组体重增长率分别提高17%和16%,差异显著(P<0.05);试验阶段成活率无显著差异。免疫性能方面,B组与对照组相比,对虾血清中溶菌酶活性没有显著差异,当添加量为10 kg/t和15 kg/t时,溶菌酶活性分别提高23%和35%,差异显著(P<0.05);D组SOD活性最强,比对照组显著提高15%(P<0.05),B组与A组和C组差异均不显著,但C组比A组显著提高了4%(P<0.05);磷酸酶活性方面,各试验组ACP活性显著高于对照组(P<0.05),B、C、D组分别比对照组提高4.7%、8.3%、12.81%,仅D组AKP活性比对照组有显著提高,添加5 kg/t和10 kg/t小肽制品对其影响不大,说明小肽制品对磷酸酶的影响主要集中在提升酸性磷酸酶活性方面。结果显示,在营养水平和饲养管理水平较高的养殖场添加5 kg/t小肽制品较为合适。 展开更多
关键词 小肽 凡纳滨对虾 生长性能 非特异性免疫
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密斑刺鲀(Diodon hystrix)gnrh基因的克隆及表达分析 被引量:2
10
作者 陈华谱 黄春仁 +5 位作者 何睿祺 戴明姝 张明真 李智渊 黄海 李广丽 《海洋与湖沼》 CAS CSCD 北大核心 2021年第4期994-1006,共13页
密斑鲀刺(Diodon hystrix)不仅具有食用价值,同时也是传统的中药及保健食品,但目前关于密斑刺鲀的生殖内分泌调控研究较少,限制鲀了密斑刺的人工繁育基础理论的发展。总所周知,促性腺激素释放激素(gonadotropin-releasing hormone,GnRH... 密斑鲀刺(Diodon hystrix)不仅具有食用价值,同时也是传统的中药及保健食品,但目前关于密斑刺鲀的生殖内分泌调控研究较少,限制鲀了密斑刺的人工繁育基础理论的发展。总所周知,促性腺激素释放激素(gonadotropin-releasing hormone,GnRH)是生殖内分泌调控的关键因子之一。利用转录组分析及分子克隆技术,获得密斑刺鲀促性腺激素释放激素(gonadotropin-releasing hormone,GnRH)gnrh2和gnrh3基因的cDNA开放阅读框(Open Reading Frame,ORF)序列,并利用生物信息学的方法,获鲀得密斑刺gnrh2 cDNA开放阅读框共279 bp,可编码92个氨基酸残基;密斑鲀刺gnrh3 cDNA开放阅读框共270 bp,可编码89个氨基酸残基。通过系统进化分析表明,密斑鲀刺GnRH与鲀科类的鱼具有较近的亲缘关系。通过聚合酶链式反应(Polymerase Chain Reaction,PCR)半定量的方法检测gnrh2和gnrh3基因在密斑刺鲀各组织中的分布,结果发现gnrh2和gnrh3基因在脾、鳃和垂体中的表达量较高,而在心脏中的表达量最低。此外,利用鲀实时荧光定量的方法检测了密斑刺gnrh2和gnrh3基因在性腺发育不同时期的表达模式,结果显鲀示密斑刺gnrh2基因在不同的性腺发育时期中没有显著性的变化,而gnrh3基因随着性腺发育成熟而不断升高。研究主要获得两个创新性的重要结果:首鲀先是证实了密斑刺存在两种gnrh基因(gnrh2和gnrh3),其次是提示了gnrh3基因可能是鲀密斑刺生殖调控的主要gnrh类型。研究结果可为深鲀入研究密斑刺生殖内分泌调控机理提供研究方向和基础。 展开更多
关键词 密斑刺鲀(Diodon hystrix) GNRH 分子克隆 组织分布
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金钱鱼的研究现状与展望(1986—2023年)——基于CiteSpace量化的视角
11
作者 张强 黄远青 +5 位作者 石红娟 陈华谱 邓思平 朱春华 李广丽 江东能 《水产科技情报》 2025年第6期391-402,共12页
为分析金钱鱼在国内外的研究热点,并预测未来趋势,从而为金钱鱼后续研究及其养殖业的发展提供参考,以中国知网(CNKI)、“Web of Science”核心合集(WOSCC)分别作为中文和英文文献数据来源,分别以“金钱鱼”和“Scatophagus argus”为主... 为分析金钱鱼在国内外的研究热点,并预测未来趋势,从而为金钱鱼后续研究及其养殖业的发展提供参考,以中国知网(CNKI)、“Web of Science”核心合集(WOSCC)分别作为中文和英文文献数据来源,分别以“金钱鱼”和“Scatophagus argus”为主题检索词,收集截至2023年底的130篇中文和125篇英文文献,采用最新版Cite Space 6.1.R6工具,基于文本量化的视角,对金钱鱼研究的国内外发展状态和趋势进行了分析。结果表明,金钱鱼国内外发文量均呈上升趋势;国内外研究机构都倾向于与自身熟悉的其他机构合作发文,而形成相对独立群体,群体之间没有特别紧密的联系。通过相关图谱分析发现,繁殖基础理论及应用、性别控制、养殖技术、病害等内容是研究热点,预测提升繁殖技术、品种改良、饲料研发将成为未来研究前沿方向。 展开更多
关键词 金钱鱼 CiteSpace 研究热点 可视化
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金钱鱼IGF-1和IGF-2的克隆及其在胚胎发育过程的表达 被引量:13
12
作者 张克伟 陈华谱 +4 位作者 江东能 邓思平 朱春华 吴天利 李广丽 《广东海洋大学学报》 CAS 2018年第2期7-14,共8页
【目的】克隆金钱鱼IGF-1和IGF-2基因,研究二基因在金钱鱼胚胎发育过程中的表达。【方法】采用实时荧光定量PCR,以不同发育时间点的金钱鱼(Scatophagus argus)胚胎为实验材料,分析IGF-1和IGF-2基因在鱼类胚胎发育过程中的表达图式。【... 【目的】克隆金钱鱼IGF-1和IGF-2基因,研究二基因在金钱鱼胚胎发育过程中的表达。【方法】采用实时荧光定量PCR,以不同发育时间点的金钱鱼(Scatophagus argus)胚胎为实验材料,分析IGF-1和IGF-2基因在鱼类胚胎发育过程中的表达图式。【结果】金钱鱼IGF-1和IGF-2的蛋白全序列分别为186和215个氨基酸。序列分析表明,IGF-1和IGF-2均有胰岛素样生长因子蛋白典型结构,含有N端信号肽、B、C、A、D和E结构域,且有6个保守的半胱氨酸,与其他鲈形目鱼类花鲈的IGF-1和IGF-2相似性较高(95%和91%)。IGF-1从受精卵到出膜的胚胎发育过程中表达量逐渐上调;IGF-2在受精后至囊胚期表达量极低,而在原肠胚期和神经胚期表达量显著上调至最高水平,在神经胚期后表达量显著降低并维持稳定。【结论】IGF-1和IGF-2序列保守性低,与鲈形目同源性高,在金钱鱼胚胎发育过程中起不同调控作用。 展开更多
关键词 金钱鱼 IGF-1 IGF-2 基因克隆 胚胎发育
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饥饿及复投喂对金钱鱼肠型脂肪酸结合蛋白基因表达的影响 被引量:5
13
作者 刘建业 陈华谱 +5 位作者 江东能 吴天利 田昌绪 李广丽 朱春华 邓思平 《水生生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第4期701-707,共7页
为阐明肠型脂肪酸结合蛋白基因(ifabp)在金钱鱼(Scatophagus argus)脂肪代谢中的作用,从金钱鱼肝脏转录组中得到ifabp的unigene片段,设计特异引物克隆了金钱鱼2种亚型ifabp基因(ssifabp2a和ssifabp2b),并分析了这2种基因在雌、雄鱼中的... 为阐明肠型脂肪酸结合蛋白基因(ifabp)在金钱鱼(Scatophagus argus)脂肪代谢中的作用,从金钱鱼肝脏转录组中得到ifabp的unigene片段,设计特异引物克隆了金钱鱼2种亚型ifabp基因(ssifabp2a和ssifabp2b),并分析了这2种基因在雌、雄鱼中的组织分布以及饥饿及复投喂后肝脏和肠道中的表达变化。聚类结果表明,ssifabp2a与其他硬骨鱼类Ifabp2a、Ifabp或IfabpX1聚为一类,ssifabp2b则与其他鱼类的Ifabp2b或Ifabp-like聚为一类。同源性比较发现,ssifabp2a与其他硬骨鱼类Ifabp2a、Ifabp或IfabpX1的同源性为78.8% 87.9%;ssifabp2b与其他硬骨鱼类Ifabp2b或Ifabp-like的同源性为79.5%—87.9%;ssifabp2a与ssifabp2b的同源性为73.5%。RT-PCR发现:在雄鱼中,ssifabp2a在小肠中表达最强,在肾和肝脏等表达较弱;ssifabp2b也在小肠中表达最强,在肝脏、胃和下丘脑等较弱。在雌鱼中,ssifabp2a在胃中表达最强,在肾、肝脏和下丘脑组织表达较弱,在其他组织中有微弱表达,脑垂体中没有检测到表达。与ssifabp2a表达情况不同,ssifabp2b在下丘脑、卵巢、心脏、肠中表达较强,其他组织中有微弱表达,鳃中没有检测到表达。饥饿及复投喂结果表明:在肠中,饥饿2d后,ssifabp2a表达量显著降低,ssifabp2b无显著性变化;饥饿7d后,ssifabp2a表达量显著下降,但ssifabp2b无显著性变化;在复投喂后,与7d饥饿相比较,ssifabp2a和ssifabp2b的表达量均显著升高。在肝脏中,饥饿2d后,ssifabp2a表达量无显著变化,而ssifabp2b的表达量显著升高;饥饿7d后,ssifabp2a和ssifabp2b的表达量均显著升高;在复投喂后,ssifabp2a和ssifabp2b表达均显著下降,恢复到正常水平。结果表明,饥饿及复投喂对金钱鱼肝脏和肠道中的ssifabp2a和ssifabp2b的表达具有显著影响,表明两者都参与了金钱鱼的脂肪代谢调节。 展开更多
关键词 金钱鱼 肠型脂肪酸结合蛋白 饥饿 复投喂 表达
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金钱鱼基因组微卫星分布特征分析及多态性标记开发 被引量:15
14
作者 王耀嵘 杨尉 +5 位作者 任席林 江东能 邓思平 陈华谱 朱春华 李广丽 《广东海洋大学学报》 CAS 2020年第4期7-14,共8页
【目的】研究金钱鱼(Scatophagus argus)全基因组微卫星分布特征,筛选高多态性微卫星(SSR)标记。【方法】利用MISA软件对金钱鱼基因组中微卫星进行筛选并分析分布特征,利用聚丙烯酰胺凝胶电泳和毛细管电泳筛选高多态性位点。【结果与结... 【目的】研究金钱鱼(Scatophagus argus)全基因组微卫星分布特征,筛选高多态性微卫星(SSR)标记。【方法】利用MISA软件对金钱鱼基因组中微卫星进行筛选并分析分布特征,利用聚丙烯酰胺凝胶电泳和毛细管电泳筛选高多态性位点。【结果与结论】金钱鱼基因组总共挖掘390967个SSR位点,相对丰度为653个/Mb。二碱基重复类型最多(52.64%),微卫星标记整体偏向A+T碱基组合。筛选出23对多态性标记位点,其中7对的等位基因数为4~11,期望杂合度为0.431~0.859,观测杂合度0.417~0.861,多态性含量为0.389~0.830。经Bonferroni校正后,5个位点符合哈德温伯格平衡,且位点间不存在连锁不平衡现象。 展开更多
关键词 金钱鱼 基因组survey测序 微卫星 标记开发
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金钱鱼Amhr2基因的克隆及表达分析 被引量:7
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作者 王妹 邓思平 +4 位作者 陈华谱 朱春华 吴天利 李广丽 江东能 《广东海洋大学学报》 CAS 2018年第3期17-24,共8页
【目的】Amh(anti-Müllerian hormone)与其特异的Ⅱ型受体Amhr2共同参与脊椎动物性腺发育过程,本研究旨在了解金钱鱼Amhr2在性腺发育中的作用。【方法】克隆金钱鱼(Scatophagus argus)Amhr2,采用逆转录PCR和实时荧光定量PCR分别检... 【目的】Amh(anti-Müllerian hormone)与其特异的Ⅱ型受体Amhr2共同参与脊椎动物性腺发育过程,本研究旨在了解金钱鱼Amhr2在性腺发育中的作用。【方法】克隆金钱鱼(Scatophagus argus)Amhr2,采用逆转录PCR和实时荧光定量PCR分别检测Amhr2的组织分布及其卵巢发育过程中的表达。【结果】金钱鱼Amhr2的开放阅读框(ORF)全长为1 533 bp,编码510个氨基酸。氨基酸序列分析表明,金钱鱼Amhr2 N端有信号肽、跨膜螺旋区和配体结合结构域。金钱鱼Amhr2与欧洲海鲈(Dicentrarchus labrax)的相似性最高,为73.1%,与人类的相似性最低,为23.2%。金钱鱼与欧洲海鲈和大黄鱼(Larimichthys crocea)亲缘关系最近,与进化地位一致,说明金钱鱼Amhr2与其他物种具有一定保守性。金钱鱼Amhr2主要在性腺表达,且精巢表达高于卵巢。Amhr2在Ⅱ时相卵巢中的表达显著高于ⅡI和IV时相卵巢。【结论】金钱鱼Amhr2序列与鲈形目同源性高,在雌雄性腺均发挥作用。 展开更多
关键词 金钱鱼 Amhr2 基因克隆 基因表达 卵巢发育
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金钱鱼Dmrt4基因的克隆及表达分析 被引量:6
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作者 江东能 彭友幸 +6 位作者 奥马尔.法鲁克.穆斯塔法 古皓天 邓思平 陈华谱 朱春华 吴天利 李广丽 《广东海洋大学学报》 CAS 2019年第1期7-13,共7页
【目的】研究金钱鱼(Scatophagus argus)Dmrt4(Doublesex and Mab-3 related transcription factors 4)基因在性腺和胚胎发育中的表达。【方法】克隆金钱鱼Dmrt4,采用逆转录PCR检测Dmrt4的组织表达,用实时荧光定量PCR检测Dmrt4在性腺和... 【目的】研究金钱鱼(Scatophagus argus)Dmrt4(Doublesex and Mab-3 related transcription factors 4)基因在性腺和胚胎发育中的表达。【方法】克隆金钱鱼Dmrt4,采用逆转录PCR检测Dmrt4的组织表达,用实时荧光定量PCR检测Dmrt4在性腺和胚胎发育过程中的表达。【结果与结论】金钱鱼Dmrt4的开放阅读框(ORF)全长1 260 bp,编码蛋白全序列为419个氨基酸。金钱鱼Dmrt4氨基酸序列含有DM和DMA结构域。金钱鱼Dmrt4与欧洲海鲈(Dicentrarchus labrax)和大黄鱼(Larimichthys crocea)的同源性最高,为87.6%;与非洲爪蟾(Xenopus laevis)的同源性最低,为47.1%。金钱鱼Dmrt4与其他鲈形目鱼类在系统进化树上聚为一支。金钱鱼Dmrt4在精巢、卵巢和鳃中高表达,在Ⅲ和Ⅳ期精巢中的表达显著高于V期精巢和Ⅱ、Ⅲ和Ⅳ期卵巢。胚胎发育过程中Dmrt4均有表达,原肠胚的表达水平最高。 展开更多
关键词 金钱鱼 Dmrt4 基因克隆 组织表达 性腺 胚胎发育
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金钱鱼cyp17a1基因克隆、组织分布及在卵巢发育中的表达 被引量:11
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作者 翟毅 刘建业 +4 位作者 贾丽英 江东能 陈华谱 李广丽 邓思平 《广东海洋大学学报》 CAS 2018年第5期1-7,共7页
【目的】克隆金钱鱼cyp17a1基因,分析其在组织中的分布、卵巢不同发育时期中的表达变化,为金钱鱼繁殖生物学提供理论依据。【方法】通过金钱鱼转录组文库筛选和RT-PCR进行cyp17a1 c DNA序列扩增;用DNAstar软件比较Cyp17a1同源性,MEGA5.... 【目的】克隆金钱鱼cyp17a1基因,分析其在组织中的分布、卵巢不同发育时期中的表达变化,为金钱鱼繁殖生物学提供理论依据。【方法】通过金钱鱼转录组文库筛选和RT-PCR进行cyp17a1 c DNA序列扩增;用DNAstar软件比较Cyp17a1同源性,MEGA5.0构建系统进化树,RT-PCR检测cyp17a1组织表达,实时定量PCR检测不同卵巢发育时期cyp17a1的表达量。【结果】金钱鱼cyp17a1开放阅读框编码515个氨基酸残基;Cyp17a1氨基酸序列与同属鲈形目鱼类Cyp17a1同源性较高(87.8%~92.7%),与大黄鱼最高(92.7%),与其他目鱼类同源性次之(72.7%~85.0%),与硬骨鱼类Cyp17a2或Cyp17a1-like同源性最低(48.2%~51.7%);所有硬骨鱼类Cyp17a1聚为一支,在Cyp17a1分支中,金钱鱼与鲈形目鱼类聚为一支;cyp17a1在性腺中表达量较高,在精巢中表达最强;在肝、脑和头肾表达较弱;在脾脏、肠、心脏、肌肉和鳃中未检测到表达;卵巢中cyp17a1的表达量随卵巢发育逐渐增加,Ⅳ期卵巢中cyp17a1表达量最高。【结论】cyp17a1在性腺中表达量较高,在金钱鱼卵巢发育过程中有重要作用。 展开更多
关键词 金钱鱼 cyp17a1 基因克隆 组织分布 基因表达 卵巢发育
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水解单宁对珍珠龙胆石斑鱼生长性能、抗氧化能力、肠道组织结构与菌群多样性的影响 被引量:21
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作者 朱旭枫 黄洋 +2 位作者 黄俊杭 李广丽 朱春华 《动物营养学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第2期1020-1035,共16页
本试验旨在研究水解单宁对珍珠龙胆石斑鱼(Epinephelus lanceolatus♂×Epinephelus fuscoguttatus♀)生长性能、抗氧化能力、肠道组织结构与菌群多样性的影响。选取600尾初始体重为(21.43±1.31) g的珍珠龙胆石斑鱼,随机分为5... 本试验旨在研究水解单宁对珍珠龙胆石斑鱼(Epinephelus lanceolatus♂×Epinephelus fuscoguttatus♀)生长性能、抗氧化能力、肠道组织结构与菌群多样性的影响。选取600尾初始体重为(21.43±1.31) g的珍珠龙胆石斑鱼,随机分为5组,每组3个重复,每个重复40尾。在基础饲料配方的基础上分别以0(F0组,作为对照组)、0.05%(F1组)、0.10%(F2组)、0.15%(F3组)和0.20%(F4组)的水解单宁替代等量微晶纤维素,配制5种试验饲料,进行为期60 d的养殖试验。结果表明:F2组的增重率(WGR)和特定生长率(SGR)显著高于F0组(P<0.05),饲料系数(FCR)则显著低于F0组(P<0.05)。肥满度(CF)和存活率(SR)各组之间均无显著差异(P>0.05)。与F0组相比,F2和F3组血清和肝脏碱性磷酸酶(AKP)、酸性磷酸酶(ACP)和超氧化物歧化酶(SOD)活性以及肝脏过氧化氢酶(CAT)、锰超氧化物歧化酶(Mn-SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(GPx)的mRNA相对表达量显著升高(P<0.05)。与F0组相比,F1、F2、F3组的肠道绒毛高度显著增加(P<0.05),F3组的肌层厚度显著增加(P<0.05)。Illumina MiSeq测序结果显示,添加水解单宁的各试验组肠道菌群的Shannon指数和Chao1指数均高于F0组。从门水平看,各组肠道菌群中优势菌门均为变形菌门(Proteobacteria)、放线菌门(Actinobacteria)、拟杆菌门(Bacteroidetes)和厚壁菌门(Firmicutes)。与F0组相比,各试验组肠道菌群中变形菌门的比例降低,放线菌门、拟杆菌门和厚壁菌门的比例增加。主坐标分析和UPGMA聚类分析发现,F2和F3组的微生物群落较为接近,而与F0组差别较大。综上可知,饲料中添加0.10%~0.15%的水解单宁可提高珍珠龙胆石斑鱼的生长性能,增强鱼体免疫及抗氧化能力,改善肠道组织结构,优化肠道菌群结构。以WGR为评价指标,通过回归方程确定珍珠龙胆石斑鱼饲料中水解单宁的适宜添加量为0.10%。 展开更多
关键词 珍珠龙胆石斑鱼 生长 抗氧化能力 肠道组织形态 肠道菌群
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水解单宁对副溶血弧菌感染凡纳滨对虾血液及血细胞免疫指标的影响 被引量:7
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作者 朱旭枫 邓秋霞 +2 位作者 郭慧 李广丽 朱春华 《广东海洋大学学报》 CAS 北大核心 2021年第3期12-19,共8页
【目的】研究水解单宁饲养的凡纳滨对虾(Litopenaeus vannamei)在副溶血弧菌(Vibrio parahaemolyticu)胁迫24 h后的生理响应,初步探究水解单宁对凡纳滨对虾血液和血细胞的影响。【方法】在基础饲料中分别添加质量分数为0%(对照组)、0.05... 【目的】研究水解单宁饲养的凡纳滨对虾(Litopenaeus vannamei)在副溶血弧菌(Vibrio parahaemolyticu)胁迫24 h后的生理响应,初步探究水解单宁对凡纳滨对虾血液和血细胞的影响。【方法】在基础饲料中分别添加质量分数为0%(对照组)、0.05%、0.10%、0.15%和0.20%的水解单宁(HTs),饲喂凡纳滨对虾60 d。对对虾注射0.2 mL的副溶血弧菌(2.5×10^(8) CFU·mL^(-1)),感染24 h后,分析血细胞凋亡率、活性氧含量(ROS)、一氧化氮含量(NO)、酯酶活性、Toll样受体(TLR)和热休克蛋白70(HSP70)基因的表达水平;测定血清的碱性磷酸酶(AKP)、酸性磷酸酶(ACP)、超氧化物歧化酶(SOD),总抗氧化能力(T-AOC)和溶菌酶(LZM)活性。【结果】在感染副溶血弧菌24 h后,实验组对虾的血细胞凋亡率,ROS、NO水平显著低于对照组,酯酶活性显著高于对照组(P<0.05)。实验组凡纳滨对虾血清的AKP、ACP、SOD活性,T-AOC和LZM活性均显著高于对照组(P<0.05)。实验组对虾血细胞TLR和HSP70基因的表达水平显著上调(P<0.05)。【结论】饲料中添加水解单宁可提高凡纳滨对虾的非特异性免疫能力和抗氧化功能,阻止氧化损伤的发生,清除机体受到刺激产生的ROS和NO,增强酯酶活性,减少细胞凋亡,从而提高凡纳滨对虾抗副溶血弧菌感染的能力。 展开更多
关键词 凡纳滨对虾 水解单宁 副溶血弧菌 非特异性免疫 抗氧化 血细胞
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17β-雌二醇注射雌性金钱鱼下丘脑转录组分析 被引量:5
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作者 石红娟 茹笑影 +5 位作者 刘玉琪 郑芸 伍旭辉 黄洋 李广丽 江东能 《广东海洋大学学报》 CAS 北大核心 2021年第2期76-85,共10页
【目的】通过转录组测序分析雌激素(17β-Estradiol,E_(2))对雌性金钱鱼下丘脑中基因表达的影响。【方法】E_(2)体注射后进行雌性金钱鱼下丘脑转录组测序,基因功能注释,差异基因筛选、鉴定,GO(Gene Ontology annotation)和KEGG(Kyoto En... 【目的】通过转录组测序分析雌激素(17β-Estradiol,E_(2))对雌性金钱鱼下丘脑中基因表达的影响。【方法】E_(2)体注射后进行雌性金钱鱼下丘脑转录组测序,基因功能注释,差异基因筛选、鉴定,GO(Gene Ontology annotation)和KEGG(Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes)信号通路富集分析,并利用实时定量PCR(Real-time quantitative PCR,qPCR)检测E_(2)体注射后雌性金钱鱼下丘脑中相关基因的表达。【结果】雌性金钱鱼下丘脑转录组测序共测得Clean reads为190909756,注释到17687个基因,筛选和鉴定了22个差异表达基因,包括prl、erf3α、pgr和cyp19a1b等11个表达上调基因和chsy1、muc17l、prf1和hla-α等11个下调基因。通过KEGG功能富集分析发现差异基因涉及13个代谢通路。转录组和qPCR结果显示,与对照雌鱼相比,E_(2)注射组雌鱼下丘脑中prl、pgr、cyp19a1b和3β-HSDI的表达显著上调,而生长轴相关基因ghrh、sst1、sst3、sst5和sst6的表达未受影响。【结论】E_(2)通过反馈作用调节下丘脑中部分性类固醇激素合成通路相关基因的表达,但不影响生长相关基因的表达。 展开更多
关键词 金钱鱼 下丘脑 17Β-雌二醇 转录组分析
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