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Hsa-miR202通过下调IL-10的表达抑制肺癌A549细胞的增殖
被引量：
3
1
作者
范小斌
林秋雄
罗燕飞
《中国肿瘤临床》
CAS
CSCD
北大核心
2014年第23期1512-1516,共5页
目的:探讨Hsa-mi R202(人微小非编码RNA-202)对肺癌A549细胞增殖的影响及分子机制。方法:将Hsa-mi R-202序列与pp G/mi R/e GFP/Blasitidin质粒定向连接,构建靶向Hsa-mi R-202基因的真核表达载体pmi R-202,运用脂质体将pmi R-202转染至A...
目的:探讨Hsa-mi R202(人微小非编码RNA-202)对肺癌A549细胞增殖的影响及分子机制。方法:将Hsa-mi R-202序列与pp G/mi R/e GFP/Blasitidin质粒定向连接,构建靶向Hsa-mi R-202基因的真核表达载体pmi R-202,运用脂质体将pmi R-202转染至A549细胞,WST-8法检测细胞增殖率,RT-PCR检测IL-10、mi R-202的相对表达水平,Western blot与ELISA检测IL-10蛋白的表达水平,构建荧光素酶报告基因载体验证mi R-202与IL-10的相互结合作用。结果:经DNA测序证实与设计完全一致,测序结果显示成功构建了mi R-202的真核表达载体(pmi R-202),pmi R-202对A549细胞的增殖抑制率(24、48、72 h)分别为12%、38%、52%,并具有时间效应关系,较空白对照组及阴性对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05);RT-PCR结果显示,转染pmi R-202后,mi R-202的表达水平增加;过表达mi R-202能下调IL-10基因及蛋白的相对表达水平,其相对水平分别为25%、0.75,IL-10活性的相对表达量为3.26±0.43 pg/m L,较空白对照组及阴性对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05):荧光素酶活性结果显示,克隆IL-10-3'UTR的质粒与mi R-202 mimics共转染293T细胞,引起荧光素活性的减低。结论:pmi R-202有效抑制A549细胞的增殖,并具有时间-效应关系,其机制可能是mi R-202通过靶向结合IL-10的3'UTR从而下调其在A549细胞的表达有关。
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关键词
Hsa-miR202
IL-10
肺癌
A549细胞
增殖
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题名
Hsa-miR202通过下调IL-10的表达抑制肺癌A549细胞的增殖
被引量：
3
1
作者
范小斌
林秋雄
罗燕飞
机构
广东省医学科学院、广东省人民医院检验科
广东省
医学
科学院
医学
研究中心
出处
《中国肿瘤临床》
CAS
CSCD
北大核心
2014年第23期1512-1516,共5页
文摘
目的:探讨Hsa-mi R202(人微小非编码RNA-202)对肺癌A549细胞增殖的影响及分子机制。方法:将Hsa-mi R-202序列与pp G/mi R/e GFP/Blasitidin质粒定向连接,构建靶向Hsa-mi R-202基因的真核表达载体pmi R-202,运用脂质体将pmi R-202转染至A549细胞,WST-8法检测细胞增殖率,RT-PCR检测IL-10、mi R-202的相对表达水平,Western blot与ELISA检测IL-10蛋白的表达水平,构建荧光素酶报告基因载体验证mi R-202与IL-10的相互结合作用。结果:经DNA测序证实与设计完全一致,测序结果显示成功构建了mi R-202的真核表达载体(pmi R-202),pmi R-202对A549细胞的增殖抑制率(24、48、72 h)分别为12%、38%、52%,并具有时间效应关系,较空白对照组及阴性对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05);RT-PCR结果显示,转染pmi R-202后,mi R-202的表达水平增加;过表达mi R-202能下调IL-10基因及蛋白的相对表达水平,其相对水平分别为25%、0.75,IL-10活性的相对表达量为3.26±0.43 pg/m L,较空白对照组及阴性对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05):荧光素酶活性结果显示,克隆IL-10-3'UTR的质粒与mi R-202 mimics共转染293T细胞,引起荧光素活性的减低。结论:pmi R-202有效抑制A549细胞的增殖,并具有时间-效应关系,其机制可能是mi R-202通过靶向结合IL-10的3'UTR从而下调其在A549细胞的表达有关。
关键词
Hsa-miR202
IL-10
肺癌
A549细胞
增殖
Keywords
hsa-mir-202, IL- 10, lung cancer, A549 cells, proliferation
分类号
R734.2 [医药卫生—肿瘤]
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1
Hsa-miR202通过下调IL-10的表达抑制肺癌A549细胞的增殖
范小斌
林秋雄
罗燕飞
《中国肿瘤临床》
CAS
CSCD
北大核心
2014
3
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