蔬菜作物耐热性遗传研究进展 被引量：4

1

作者 王敏 江彪 +4 位作者 何晓明 刘文睿 彭庆务 梁肇均 林毓娥 《安徽农业科学》 CAS 2018年第13期23-26,49,共5页

综述了高温对蔬菜作物的影响、耐热性的鉴定方法、耐热性分子遗传、耐热性相关基因方面的研究,分析了目前研究中存在的问题,并对今后蔬菜作物的高温胁迫研究方向进行了展望。

关键词 蔬菜作物 耐热性 分子遗传

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白雪菇新菌株的培养特性研究

2

作者 何焕清 肖自添 +1 位作者 刘明 潘新华 《食药用菌》 2016年第5期316-319,共4页

通过对新分离的白雪菇(无毒肥脚环柄菇)菌株在不同环境和营养条件下的生长速率和长势等培养特性研究,探明了白雪菇菌丝生长的最适温度为30℃,培养基最适含水量为55%,p H为5,最佳碳源和氮源分别为葡萄糖和黄豆粉、麸皮。

关键词 白雪菇 培养特性 温度 湿度 碳源 氮源

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利用CRISPR/Cas9技术构建MDH2敲除细胞株及抗呕吐毒素效应研究

3

作者 施炜涛 姚春鹏 +7 位作者 魏文康 王蕾 房元杰 仝钰洁 马晓姣 蒋文 张晓爱 邵伟 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第7期307-315,共9页

试验旨在利用CRISPR/Cas9基因编辑技术构建稳定敲除苹果酸脱氢酶2(malate dehydrogenase 2,MDH2)基因的IPEC-J2单克隆细胞株,并研究敲除MDH2基因后抗呕吐毒素效应。针对MDH2基因序列设计sgRNA插入PX459载体中,构建PX459-sgRNA-MDH2重组... 试验旨在利用CRISPR/Cas9基因编辑技术构建稳定敲除苹果酸脱氢酶2(malate dehydrogenase 2,MDH2)基因的IPEC-J2单克隆细胞株,并研究敲除MDH2基因后抗呕吐毒素效应。针对MDH2基因序列设计sgRNA插入PX459载体中,构建PX459-sgRNA-MDH2重组质粒;将质粒通过电转导入IPEC-J2细胞中,并加入嘌呤霉素筛选阳性细胞;利用有限稀释法筛选单克隆细胞并进行基因型测序鉴定、荧光定量PCR和蛋白质印迹法验证,获得MDH2基因敲除的单克隆细胞株;最后通过CCK8试剂盒和细胞凋亡与坏死检测试剂盒检测细胞存活情况,测定MDH2敲除细胞株对呕吐毒素的抗性。测序结果显示MDH2基因敲除载体构建成功。利用荧光定量PCR及蛋白免疫印迹法验证了获得的细胞系为MDH2基因敲除的单克隆细胞株。CCK8细胞活力实验结果显示,与野生型细胞相比,敲除MDH2可使IPEC-J2细胞在不同浓度呕吐毒素(4、2、1和0.5μg/mL)处理5 d时细胞活力分别极显著提高18.67%、19.59%、26.36%和27.01%。流式细胞仪实验结果显示,与野生型细胞相比,敲除MDH2使不同浓度呕吐毒素处理5 d的细胞死亡率分别极显著降低30.33%、15.81%、16.00%和14.70%。利用CRISPR/Cas9系统对IPEC-J2细胞中的MDH2基因进行敲除并筛选获得了MDH2-KO单克隆细胞株,并通过细胞活力和细胞死亡检测,证明该细胞株具有抗呕吐毒素毒性效应的效果,为揭示呕吐毒素诱导宿主细胞死亡的毒性机制提供借鉴,为防治呕吐毒素提供新策略。 展开更多

关键词 CRISPR/Cas9系统 呕吐毒素 MDH2基因 细胞存活 细胞死亡

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冬瓜种质资源亲缘关系的ISSR分析 被引量：13

4

作者 江彪 刘文睿 +2 位作者 谢大森 何晓明 彭庆务 《热带作物学报》 CSCD 北大核心 2013年第4期616-620,共5页

利用ISSR分子标记对来源于不同地区的冬瓜种质资源亲缘关系进行分析。从67个ISSR引物中筛选出多态性强、重复性好的7条引物,对57份冬瓜资源基因组DNA进行扩增。结果表明:共扩增出50条谱带,其中多态性带34个,多态性位点百分率为68.0%。... 利用ISSR分子标记对来源于不同地区的冬瓜种质资源亲缘关系进行分析。从67个ISSR引物中筛选出多态性强、重复性好的7条引物,对57份冬瓜资源基因组DNA进行扩增。结果表明:共扩增出50条谱带,其中多态性带34个,多态性位点百分率为68.0%。冬瓜种质间的遗传相似系数在0.26～1.00之间,大部分在0.70以上,表明供试的57份材料间遗传基础狭窄。利用UPGMA聚类分析,可将供试57份冬瓜种质划分为6个类群,类群的划分与地理来源有较高的相关性。本研究分类具有较高的应用价值,已利用本研究分类结果配制出杂种优势强的新组合。 展开更多

关键词 冬瓜 种质资源 ISSR 亲缘关系

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丝瓜种质资源的SRAP遗传多样性分析 被引量：11

5

作者 吴海滨 龚浩 +5 位作者 刘鹏 何晓莉 罗少波 郑晓明 陈俊秋 罗剑宁 《西南农业学报》 CSCD 北大核心 2015年第4期1524-1529,共6页

为了探明丝瓜核心种质资源的亲缘关系,本研究利用17对SRAP标记和1对来源于黄瓜的EST-SSR标记,对42份国内外丝瓜资源材料进行了遗传多样性分析。18个引物组合共扩增出197个位点,其中多态性位点为156个,多态位点比率79.18%。每个引物组合... 为了探明丝瓜核心种质资源的亲缘关系,本研究利用17对SRAP标记和1对来源于黄瓜的EST-SSR标记,对42份国内外丝瓜资源材料进行了遗传多样性分析。18个引物组合共扩增出197个位点,其中多态性位点为156个,多态位点比率79.18%。每个引物组合扩增位点数在6~16个之间,平均每个引物组合扩增位点数为10.94;通过NTSYS软件计算得到的样品间SM相似系数介于0.272~0.991,说明丝瓜属的遗传变异范围较大。根据SRAP扩增结果,利用UPGMA法构建树状聚类图,聚类分析将42份样品分为2组,一组包含27个有棱丝瓜品种,另一组包含15个普通丝瓜品种,种群间遗传差异大,同一品种群内遗传差异较小,聚类分析结果与丝瓜的形态分类系统基本相符。同时,对SRAP标记在丝瓜种质资源中的扩增重复性进行了检测,表明SRAP标记具有稳定的重现性。 展开更多

关键词 丝瓜 SRAP标记 遗传多样性

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冬瓜种子千粒重主基因+多基因混合遗传分析 被引量：6

6

作者 刘文睿 江彪 +2 位作者 彭庆务 赵芹 谢大森 《热带作物学报》 CSCD 北大核心 2012年第6期993-996,共4页

利用主基因+多基因混合遗传模型对冬瓜组合B214(小籽粒)×B227(大籽粒)的6世代群体(P1、P2、F1、B1、B2及F2)种子千粒重进行遗传分析。结果表明,冬瓜组合B214×B227种子千粒重性状为1对加性主基因+加性-显性多基因遗传,主要受... 利用主基因+多基因混合遗传模型对冬瓜组合B214(小籽粒)×B227(大籽粒)的6世代群体(P1、P2、F1、B1、B2及F2)种子千粒重进行遗传分析。结果表明,冬瓜组合B214×B227种子千粒重性状为1对加性主基因+加性-显性多基因遗传,主要受主基因和多基因的加性效应控制,不存在杂种优势。主基因+多基因在B1、B2及F2群体的遗传率分别为68.82%、75.70%和76.29%。因此,可通过选择较高千粒重的材料为亲本,利用加性效应对冬瓜种子千粒重性状进行品种改良。 展开更多

关键词 冬瓜 种子千粒重 主基因+多基因 遗传分析

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华南型黄瓜全雌基因的AFLP连锁标记开发及定位分析 被引量：2

7

作者 王瑞 吴廷全 +2 位作者 黄河勋 梁肇均 林毓娥 《热带作物学报》 CSCD 北大核心 2013年第3期436-441,共6页

以华南型全雌黄瓜B36为母本,弱雌黄瓜S6为父本,构建F2群体,利用AFLP分子标记技术对64对引物在F2群体上进行筛选,结果发现1条AFLP分子标记与全雌性状紧密连锁,且该连锁标记在F2代群体中呈3∶1质量性状分离。经生物学软件JoinMapV3.0分析... 以华南型全雌黄瓜B36为母本,弱雌黄瓜S6为父本,构建F2群体,利用AFLP分子标记技术对64对引物在F2群体上进行筛选,结果发现1条AFLP分子标记与全雌性状紧密连锁,且该连锁标记在F2代群体中呈3∶1质量性状分离。经生物学软件JoinMapV3.0分析显示,该标记与全雌基因的遗传距离为4.9 cM。此外,生物信息学分析表明,该标记位于黄瓜基因组第6号染色体末端。同时,在CsACS1G基因的远启动子区域设计1对引物,分别在B36和S6的F2代群体中进行PCR检测,结果显示,扩增片段与全雌性状无连锁关系。说明华南型全雌黄瓜B36的全雌性状受控于1个新的全雌基因。 展开更多

关键词 华南型 黄瓜 全雌基因 AFLP 连锁标记

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利用SAS软件快速方差分析多组资料 被引量：3

8

作者 宋钊 张白鸽 曹健 《生物学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第3期102-105,共4页

SAS统计分析系统是当今国际上最著名的三大数据分析软件之一,在国内广泛用于农业实验统计分析。在引进SAS统计软件之前,微软公司出品的Excel在农业生物统计领域得到广泛应用,但是该软件不能同时对多组观察值进行方差分析。利用SAS系统... SAS统计分析系统是当今国际上最著名的三大数据分析软件之一,在国内广泛用于农业实验统计分析。在引进SAS统计软件之前,微软公司出品的Excel在农业生物统计领域得到广泛应用,但是该软件不能同时对多组观察值进行方差分析。利用SAS系统同时对3个涝渍胁迫条件下20组辣椒叶片叶绿素含量差异进行方差分析,比较同一个品种在不同涝渍胁迫条件下叶绿素SPAD值的差异显著性,同时检测涝渍胁迫下20个品种间的叶绿素含量差异显著性。 展开更多

关键词 SAS软件 快速方差分析 多组数据

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咖啡渣栽培灵芝试验 被引量：8

9

作者 肖自添 刘明 +3 位作者 何焕清 周文乐 庄志杰 谭国伟 《食药用菌》 2015年第3期196-198,共3页

利用咖啡渣代替部分棉籽壳栽培灵芝的试验结果,培养基中添加10%~70%的咖啡渣,灵芝菌丝长势均较好,且都能正常出芝。其中以咖啡渣50%,棉籽壳49%,石膏1%,含水量60%的配方所产的子实体商品性较好,优于对照和其余3种配方,其菌盖直径9.43 cm... 利用咖啡渣代替部分棉籽壳栽培灵芝的试验结果,培养基中添加10%~70%的咖啡渣,灵芝菌丝长势均较好,且都能正常出芝。其中以咖啡渣50%,棉籽壳49%,石膏1%,含水量60%的配方所产的子实体商品性较好,优于对照和其余3种配方,其菌盖直径9.43 cm、单芝鲜重48.25 g、总糖含量0.52%。利用咖啡渣栽培灵芝,不仅可以＂变废为宝＂,而且能提高产品多糖含量。 展开更多

关键词 咖啡渣 栽培 灵芝

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凤眼莲的机械处理及其栽培草菇试验

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作者 何焕清 刘明 +1 位作者 肖自添 朱壮猷 《食药用菌》 2016年第3期173-175,179,共4页

凤眼莲是外来入侵的有害物种,在我国南方水域常年爆发成灾,合理资源化利用是凤眼莲避害趋利的重要方向。介绍经新研制的专用脱水破碎设备每小时可以处理新鲜凤眼莲10吨以上。处理后的凤眼莲适合栽培草菇,以48%添加量配方栽培草菇的试验... 凤眼莲是外来入侵的有害物种,在我国南方水域常年爆发成灾,合理资源化利用是凤眼莲避害趋利的重要方向。介绍经新研制的专用脱水破碎设备每小时可以处理新鲜凤眼莲10吨以上。处理后的凤眼莲适合栽培草菇,以48%添加量配方栽培草菇的试验结果,其菌丝及子实体生长正常,生物转化率为16.4%,其产品的主要重金属含量均符合国家食品安全标准和农业绿色食用菌标准。 展开更多

关键词 凤眼莲 机械处理 栽培 草菇

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茄子褐纹病菌的分离鉴定及产孢条件的优化 被引量：1

11

作者 衡周 孙小晴 +4 位作者 黄俊霖 孙保娟 李植良 李颖 李涛 《广东农业科学》 CAS 2020年第6期56-62,共7页

【目的】由茄褐纹拟茎点霉(Phomopsis vexans Harter)引起的褐纹病是当前茄子产业的重要病害,孢子富集是深入研究褐纹病菌孢子萌发及其致病机理的基础。进一步简化当前复杂的产孢过程,提高产孢效率。【方法】采用组织分离法开展病原菌... 【目的】由茄褐纹拟茎点霉(Phomopsis vexans Harter)引起的褐纹病是当前茄子产业的重要病害,孢子富集是深入研究褐纹病菌孢子萌发及其致病机理的基础。进一步简化当前复杂的产孢过程,提高产孢效率。【方法】采用组织分离法开展病原菌的分离纯化,利用形态学特征观察及rDNA-ITS序列分析对病原菌进行鉴定;使用液体培养的方式,对茄子褐纹病菌的产孢条件进行优化。【结果】分离获得的病原菌rDNA-ITS序列经NCBI序列比对,与茄子褐纹病菌遗传关系最近,同源性达99%;相同培养条件下培养1 d后,液体培养基中的菌丝生长量较大;28℃培养1 d 24℃培养3 d后的产孢量为1.2×1010个/mL,大于24℃培养4 d的产孢量(6×107个/mL);不同培养温度产孢量分别为2.5×107(20℃)、1.2×1010(22℃)、9.4×109(24℃)、8.5×108(26℃)个/mL;相同培养条件下,25%葡萄糖马铃薯液体(PDB)培养基产孢量最高(1.2×1010个/mL)。【结论】分离并鉴定了茄褐纹病病原菌,优化了褐纹病菌产孢条件。优化后的产孢条件为:在150 r/min摇床中,使用25%葡萄糖PDB培养基28℃培养1 d后24℃培养3 d。 展开更多

关键词 褐纹病菌 分子鉴定 液体培养 产孢 条件优化

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灵芝室内袋栽孢子粉的收集方式比较 被引量：2

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作者 曾振基 钟莹莹 +3 位作者 周卫雄 刘明 肖自添 何焕清 《食药用菌》 2014年第3期149-150,共2页

广东省梅州市开展室内灵芝袋栽20多年来，取得了很多很好的经验与成果。但随着规模扩大和复种指数增加，遇到了不少亟待解决的新问题，如灵芝孢子粉收集的最佳时间选择与收集时间的长短的确定等。在实际生产过程中，种植户反映灵芝孢子... 广东省梅州市开展室内灵芝袋栽20多年来，取得了很多很好的经验与成果。但随着规模扩大和复种指数增加，遇到了不少亟待解决的新问题，如灵芝孢子粉收集的最佳时间选择与收集时间的长短的确定等。在实际生产过程中，种植户反映灵芝孢子粉收集50-60天后还能产粉，也有反映仅收集25天左右就开始出现木霉等杂菌污染，严重影响灵芝孢子粉及子实体的产量和品质。本试验发现，采用二次收粉的方式，可有效解决以上问题，明显提高孢子粉产量和品质。 展开更多

关键词 灵芝 孢子粉 于实体 收集 产量 污染率

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