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人肝脏再生增强因子对体外肝细胞生长的影响 被引量:1
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作者 李曼妮 苏先狮 《临床肝胆病杂志》 CAS 2009年第5期343-345,共3页
目的基因工程方法纯化人肝脏再生增强因子(hALR),研究hALR对体外培养肝细胞生长的影响。方法构建hALR原核表达载体PGEX-3X-hALR,诱导表达、纯化收集GST-hALR,用X因子切去GST,凝胶过滤得到高纯度hALR蛋白;分别用正常肝细胞(L-02细胞)和... 目的基因工程方法纯化人肝脏再生增强因子(hALR),研究hALR对体外培养肝细胞生长的影响。方法构建hALR原核表达载体PGEX-3X-hALR,诱导表达、纯化收集GST-hALR,用X因子切去GST,凝胶过滤得到高纯度hALR蛋白;分别用正常肝细胞(L-02细胞)和肝癌细胞(HepG2细胞)分析hALR对其生长的影响。结果hALR原核表达载体pGEX-3X-hALR构建成功,经诱导表达,可纯化得到高纯度的hALR蛋白。hALR蛋白能促进正常肝细胞的生长,并与浓度成正相关;而肝癌细胞的生长却起抑制作用。结论成功表达和纯化重组hALR蛋白,hALR促进正常肝细胞的生长而抑制肝癌细胞生长。 展开更多
关键词 肝再生增强因子 克隆表达 肝细胞生长
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人IL-18基因克隆及表达
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作者 李曼妮 苏先狮 杨春艳 《临床肝胆病杂志》 CAS 2009年第4期264-266,共3页
目的克隆人IL-18编码区cDNA,研究其在大肠杆菌中的表达。方法应用RT-PCR方法从人外周血单个核细胞(PBMC)中扩增出成熟(hIL-18)cDNA。利用基因重组技术构建IL-18的原核重组表达质粒pGEX-3X-hIL-18,转化E.coli JM109,以IPTG诱导培养,收集... 目的克隆人IL-18编码区cDNA,研究其在大肠杆菌中的表达。方法应用RT-PCR方法从人外周血单个核细胞(PBMC)中扩增出成熟(hIL-18)cDNA。利用基因重组技术构建IL-18的原核重组表达质粒pGEX-3X-hIL-18,转化E.coli JM109,以IPTG诱导培养,收集菌体直接进行SDS-PAGE分析。结果经测序证实获得人IL-18的cDNA序列与文献报道的cDNA完全一致;携此重组质粒pGEX-3X-hIL-18的大肠杆菌经IPTG诱导,表达了分子量为43kD的重组融合蛋白。结论克隆了人IL-18cDNA,利用大肠杆菌成功地表达了重组蛋白。为进一步探讨人IL-18的生物学作用及可能的临床应用打下基础。 展开更多
关键词 PBMC IL-18 RT-PCR 基因克隆 重组表达
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