程序性死亡分子-1及其配体通路在眼科领域的研究进展 被引量：3

1

作者 方梦园（综述） 孟倩丽（综述） 郭海科（审校） 《中华实验眼科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第2期179-183,共5页

共刺激信号已经成为免疫学研究的一个热点。程序性死亡分子-1（PD-1）及其配体属于抑制性共刺激分子，其在自身免疫性疾病、器官移植排斥反应、病原微生物感染、肿瘤免疫逃逸等方面都发挥着重要作用。近年来，PD—1及其配体（PD-1／PD—... 共刺激信号已经成为免疫学研究的一个热点。程序性死亡分子-1（PD-1）及其配体属于抑制性共刺激分子，其在自身免疫性疾病、器官移植排斥反应、病原微生物感染、肿瘤免疫逃逸等方面都发挥着重要作用。近年来，PD—1及其配体（PD-1／PD—L）通路在眼科方面的研究也取得了一定进展。眼部多种疾病和现象，如眼部免疫性疾病、眼部感染性疾病、眼部肿瘤、眼组织的免疫赦免等均发现有PD—1／PD—L通路的改变。这些发现不仅进一步阐明了一些眼部疾病的发病机制，而且为其预防和治疗提供了新的方向。就PD—1／PD—L通路的生物学特性及其在眼科生理病理中的研究进展进行综述。 展开更多

关键词 程序性死亡分子 配体 免疫调节 眼生理病理

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关注糖尿病视网膜病变的信号通路研究 指导糖尿病视网膜病变的靶向治疗 被引量：3

2

作者 郭海科 方梦园 孟倩丽 《中华实验眼科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第11期961-964,共4页

糖尿病视网膜病变（DR）是糖尿病患者视力损害的主要原因.近年来,DR相关信号通路的研究更好地揭示了DR的发病机制,为DR的临床治疗研究提供了新的思路,为开发靶向治疗的药物提供了理论依据.阐明生物信号通路在DR发生和发展中的生物学功能... 糖尿病视网膜病变（DR）是糖尿病患者视力损害的主要原因.近年来,DR相关信号通路的研究更好地揭示了DR的发病机制,为DR的临床治疗研究提供了新的思路,为开发靶向治疗的药物提供了理论依据.阐明生物信号通路在DR发生和发展中的生物学功能,有助于临床医师正确进行医疗决策,选择性、针对性地对其进行干预,大大改善DR的治疗效果.如何在医疗实践中将信号通路的研究和靶向治疗结合起来是推进DR治疗的重要环节.因此我们应注重转化医学研究,重视信号通路研究对靶向治疗的引导作用,使医学基础研究与临床应用研究有机结合起来. 展开更多

关键词 信号通路 糖尿病 视网膜病变 靶向治疗 转化医学

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常染色体遗传型视网膜色素变性相关基因的研究进展 被引量：8

3

作者 覃泳杰 郭海科 《眼科研究》 CSCD 北大核心 2009年第12期1159-1163,共5页

视网膜色素变性(RP)是常见的致盲性眼病,具有高度的遗传性和表型异质性。RP致病基因的确立对探讨该病的发病机制、预防和治疗具有重要的意义。近年来,RP的研究有了新的进展,就常染色体显性遗传RP(adRP)与常染色体隐性遗传RP(arRP)相关... 视网膜色素变性(RP)是常见的致盲性眼病,具有高度的遗传性和表型异质性。RP致病基因的确立对探讨该病的发病机制、预防和治疗具有重要的意义。近年来,RP的研究有了新的进展,就常染色体显性遗传RP(adRP)与常染色体隐性遗传RP(arRP)相关基因的研究进行综述,归纳其中常见致病基因的作用及其突变发病的可能机制,为RP的研究提供一定参考。 展开更多

关键词 视网膜色素变性 常染色体 突变 致病基因

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传导性角膜热成型术治疗超声乳化联合单焦点人工晶状体植入术后老视的临床研究 被引量：1

4

作者 崔颖 曾锦 +4 位作者 郭海科 王军 谢文娟 李仲明 廖伟雄 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2011年第20期3686-3688,共3页

目的:探讨传导性角膜热成形术(CK)治疗超声乳化联合单焦点人工晶状体植入术后老视的安全性和有效性。方法:15例双眼超声乳化联合单焦点人工晶状体植入术后老视症状明显的正视或轻度近视的非主视眼行CK治疗,分别于术前1天、术后1周、1个... 目的:探讨传导性角膜热成形术(CK)治疗超声乳化联合单焦点人工晶状体植入术后老视的安全性和有效性。方法:15例双眼超声乳化联合单焦点人工晶状体植入术后老视症状明显的正视或轻度近视的非主视眼行CK治疗,分别于术前1天、术后1周、1个月、3个月和6个月行双眼裸眼近视力、远视力、最佳矫正远视力、最佳矫正近视力、显然验光等效球镜、泪膜破裂时间、泪液分泌试验。结果:CK术后6月双眼裸眼远视力≥0.8且近视力≥0.5(J3)或近视力≥0.33(J4)者分别为11例(73.3%),14例(93.3%);术后6月术眼散光度在±1.00(DC)以内者为86.7%;术后6个月15例非注视眼行CK术后裸眼远视力由(0.87±0.09)(DS)下降为(0.68±0.09)(DS),差异有统计学意义。术前平均角膜曲率(41.99±0.47)(D)增加至术后(43.64±0.59)(D),差异有统计学意义。术眼泪膜破裂时间术前(12.0±1.69)(s)缩短为术后(10.00±1.77)(s),差异有统计学意义。术后6个月13例(86.7%)患者表示满意,术后可以较长时间(>1h)阅读,可以不使用近用眼镜。结论:应用单眼视原理采用CK治疗超声乳化联合单焦点人工晶状体植入术后非主视眼老视,能够获得较好的双眼远、近视力,减少术后对眼镜的依赖。 展开更多

关键词 老视 传导性角膜成形术 单焦点人工晶状体 单眼视

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基于蛋白质组学和转录组学数据鉴定增生型糖尿病性视网膜病变的潜在生物标志物

5

作者 金叶安琪 刘俊滨 +8 位作者 方翔 吴冠蓉 朱昊贤 陈欣雨 刘梦雅 廖铄鑫 李方芳 张学礼 孟倩丽 《眼科新进展》 北大核心 2025年第8期622-628,共7页

目的 利用蛋白质组学和转录组学数据筛选增生型糖尿病性视网膜病变(PDR)的潜在生物标志物。方法 本研究蛋白质组学数据集(PXD046630)来自PDR患者的房水样本,两个转录组学数据集(GSE60436和GSE102485)来自PDR患者的纤维血管膜。差异表达... 目的 利用蛋白质组学和转录组学数据筛选增生型糖尿病性视网膜病变(PDR)的潜在生物标志物。方法 本研究蛋白质组学数据集(PXD046630)来自PDR患者的房水样本,两个转录组学数据集(GSE60436和GSE102485)来自PDR患者的纤维血管膜。差异表达基因(DEGs)通过R软件鉴定,特别是limma和edgeR包。通过蛋白质-蛋白质相互作用(PPI)分析、GO富集分析和KEGG通路富集分析筛选PXD046630与GSE60436数据集的共同DEGs。通过受试者工作特征曲线对GSE102485数据集中的关键DEGs进行验证。利用qPCR方法对高糖、低氧条件下培养的人视网膜血管内皮细胞进行候选生物标志物mRNA的检测验证。结果 从PXD046630和GSE60436数据集中共筛选出59个共有DEGs和26个核心基因。KEGG分析显示,细胞外基质-受体相互作用、癌症中的蛋白聚糖、补体和凝血级联等6条通路在12个关键DEGs中富集。以AUC值大于0.900(CI≥95%)为标准将纤连蛋白1(FN1)、金属蛋白酶组织抑制剂3(TIMP3)、补体因子H(CFH)、核心蛋白聚糖和低密度脂蛋白受体相关蛋白2(LRP2)确定为PDR的潜在生物标志物。其中FN1、CFH和LRP2的mRNA表达水平在高糖、低氧培养的人视网膜血管内皮细胞中显著上调。结论 FN1、CFH和LRP2可能是PDR的潜在生物标志物。需要进一步的研究来探索它们在该疾病中的作用和治疗潜力。 展开更多

关键词 糖尿病性视网膜病变 蛋白质组学 转录组学 生物标志物

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山梨醇脱氢酶基因多态性与2型糖尿病视网膜病变相关性的研究

6

作者 郭海科 刘清洋 +2 位作者 孟倩丽 张良 方梦圆 《中华实验眼科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第5期418-421,共4页

背景国外研究表明，多元醇通路在2型糖尿病血管并发症中具有重要的作用，山梨醇脱氢酶（SDH）基因作为该通路的限速酶之一参与糖尿病视网膜病变（DR）的发生，但国内尚未见相关的研究。目的探讨SDHG-888C基因多态性同2型DR的关系。方法... 背景国外研究表明，多元醇通路在2型糖尿病血管并发症中具有重要的作用，山梨醇脱氢酶（SDH）基因作为该通路的限速酶之一参与糖尿病视网膜病变（DR）的发生，但国内尚未见相关的研究。目的探讨SDHG-888C基因多态性同2型DR的关系。方法运用聚合酶链反应一限制性片段长度多态性技术检测187例2型糖尿病患者的基因型，其中DR患者118例，无明显DR组69例、健康对照组123例，比较各组的基因型和等位基因的频率。结果DR组与无DR组间的临床特征比较显示，DR组糖尿病病程明显长于无DR组，差异有统计学意义（t=2．070，P=0．042），2组间其他基线特征的差异无统计学意义（P〉0．05）。DR组、无DR组和对照组GG基因型频率分别为24．6％、8．7％和8．1％，G等位基因频率分别为42．4％、25．4％和29．7％，DR组GG基因型和G等位基因频率显著高于无DR组和对照组，差异均有统计学意义（GG：P=0．007，P=0．001；G：P=0．001，P=0．004），无DR组与对照组的各基因型和等位基因频率比较差异均无统计学意义（P〉0．05）；增生型DR与无DR组间各基因型和等位基因频率比较差异均无统计学意义（P〉0．05）。结论SDHG-888C基因多态性可能与中国南方人群2型DR的发生具有一定的相关性。 展开更多

关键词 山梨醇脱氢酶基因 基因多态性 2型糖尿病 视网膜病变

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近视眼LASIK术后调节灵洁度变化与视觉疲劳的关系 被引量：11

7

作者 周少博 郭海科 +1 位作者 谭娟 黎健菁 《眼科新进展》 CAS 北大核心 2012年第3期286-288,共3页

目的研究近视眼LASIK术后调节灵活度(accommodative facility,AF)的变化情况以及与视觉疲劳关系。方法 32例(64眼)近视患者按年龄分成30岁以下组和30岁以上组,行标准LASIK手术,术前及术后1周、1个月分别测量双眼AF,术后1个月对术后视觉... 目的研究近视眼LASIK术后调节灵活度(accommodative facility,AF)的变化情况以及与视觉疲劳关系。方法 32例(64眼)近视患者按年龄分成30岁以下组和30岁以上组,行标准LASIK手术,术前及术后1周、1个月分别测量双眼AF,术后1个月对术后视觉疲劳症状情况行问卷调查,采用配对t检验比较手术前后AF的变化,用Logistic回归分析法分析手术前后AF、年龄以及屈光度等对术后视觉疲劳的影响。结果 30岁以下组术前双眼AF为(7.12±2.02)c·min-1,术后1周为(6.22±1.73)c·min-1,与术前相比差异无统计学意义(P>0.05);术后1个月为(9.46±1.97)c·min-1,与术前相比差异有统计学意义(P<0.05)。30岁以上组术后1周AF由术前(5.68±2.51)c·min-1显著降低至(4.02±1.59)c·min-1,差异有统计学意义(P<0.05),术后1个月恢复至(6.03±1.61)c·min-1,与术前相比差异无统计学意义(P>0.05)。问卷调查发现,术后视觉疲劳症状阳性者13例(40.6%),阴性者19例(59.4%);回归分析表明,患者术前及术后1周AF、年龄以及术前等效球镜度数与视觉疲劳症状显著相关。结论近视眼LASIK术后早期AF下降,以后逐渐恢复,可能是术后视觉疲劳的重要原因之一。 展开更多

关键词 调节灵活度 近视 视疲劳 激光原位角膜磨镶术

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联合环形电极泪道成形术提高泪道支架管植入术疗效和安全性的随机临床试验 被引量：6

8

作者 胡文学 郭海科 +1 位作者 廖海兰 黄小花 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第1期13-19,共7页

目的评价联合环形电极泪道成形术是否能提高鼻泪管支架管植入术治疗鼻泪管阻塞的疗效及安全性。方法设计临床随机对照试验,比较施行鼻泪管支架管植入联合环形电极鼻泪管成形术（联合组）,与单纯鼻泪管支架管植入术（单纯组）的植管成功... 目的评价联合环形电极泪道成形术是否能提高鼻泪管支架管植入术治疗鼻泪管阻塞的疗效及安全性。方法设计临床随机对照试验,比较施行鼻泪管支架管植入联合环形电极鼻泪管成形术（联合组）,与单纯鼻泪管支架管植入术（单纯组）的植管成功率、植管耗时,术中患者的疼痛程度等,观察拔管并发症及疗效等。结果入选病例总的例数为119例。拔管后6个月时,总的治愈率为70.9%（83/117）,联合组（80.6%,54/67）疗效比单纯组（58.0%,29/50）好,χ~2=7.093,P〈0.05,差异有统计学意义。总的植管成功率为98.3%（117/119）,有2例患者无法完成支架管植入。植管成功率原联合组比原单纯组高,χ~2=6.282,P〈0.05,单纯组的植管耗时较长,单纯组中位数为33 s,联合组中位数为12 s,差异有统计学意义（Z=-36.722,P〈0.05）。联合组与单纯组术中疼痛程度比较,差异无统计学意义（t=0.833,P=0.405）。入选病例总的泪点损伤率为43.6%（51/117）,两组泪点损伤率比较,χ~2=1.459,P=0.227,差异无统计学意义。总的拔管困难发生率为9.4%（11/117）,联合组（4.5%,3/67）比单纯组（16.0%,8/50）低,χ~2=4.463,P〈0.05,差异有统计学意义。其中总的断管发生率为4.3%（11/117）,两组断管率比较,χ~2=2.964,P=0.085,差异无统计学意义。Spearman双变量相关分析,植管耗时与疗效的相关系数r5=-0.584,植管耗时与拔管困难的相关系数r6=0.491,拔管困难与疗效间的相关系数为r10=-0.511,均P〈0.05。结论鼻泪管支架管植入联合环形电极鼻泪管成形术是一种安全、有效的治疗鼻泪管阻塞的方法。 展开更多

关键词 鼻泪管阻塞 泪道成形 高频电 鼻泪管支架管 逆行支架管植入 环形电极

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复方血栓通胶囊在老年性白内障患者超声乳化吸出术后视力恢复中的作用 被引量：5

9

作者 田妮 郭海科 +3 位作者 金海鹰 郭月珍 陈开恩 李慧英 《眼科新进展》 CAS 北大核心 2012年第2期181-182,185,共3页

目的观察复方血栓通胶囊在白内障超声乳化吸出术后患者视力恢复中的作用。方法采用单中心随机对照临床研究方法。收集380例(380眼)手术顺利的老年性白内障患者,排除术前有眼内手术史、糖尿病、玻璃体视网膜疾病、青光眼、角膜白斑者,以... 目的观察复方血栓通胶囊在白内障超声乳化吸出术后患者视力恢复中的作用。方法采用单中心随机对照临床研究方法。收集380例(380眼)手术顺利的老年性白内障患者,排除术前有眼内手术史、糖尿病、玻璃体视网膜疾病、青光眼、角膜白斑者,以及术后出现严重角膜水肿、葡萄膜炎、前房出血、继发性青光眼等并发症的患者,分为研究组190例(190眼)和对照组190例(190眼)。研究组术后立即口服复方血栓通胶囊1.5g,每天3次,连续服用2周,对照组患者不服用,观察两组患者术后1d、7d、1个月、3个月、6个月、12个月的视力情况。结果研究组术后1d、7d、1个月、3个月、6个月、12个月的最佳矫正视力均值分别为0.45、0.62、0.78、0.81、0.83、0.86,明显高于对照组0.25、0.37、0.43、0.52、0.61、0.66,研究组各时间点视力均明显高于对照组,差异均有显著统计学意义(均为P<0.001);研究组术后7d矫正视力均值为0.62,对照组术后6个月视力均值为0.61,研究组矫正视力恢复到较好水平时间较对照组明显缩短。结论复方血栓通胶囊能改善白内障超声乳化吸出术后视神经视网膜缺血和缺氧状态,具有提高视力、较快恢复良好视力的作用。 展开更多

关键词 复方血栓通胶囊 白内障超声乳化吸出术 视力

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视网膜病变筛查中无症状视网膜血管阻塞患者发生颈动脉狭窄的评估与治疗 被引量：4

10

作者 王军 张良 《眼科新进展》 CAS 北大核心 2016年第12期1153-1156,共4页

目的评估糖尿病患者无症状视网膜动脉阻塞与颈动脉狭窄的相关性。方法收集2013年至2015年我院内分泌科确诊的糖尿病患者,经过糖尿病视网膜病变筛查发现的视网膜栓塞患者资料,根据标准化方案,进行颈动脉多普勒超声及超声心动图等一系列... 目的评估糖尿病患者无症状视网膜动脉阻塞与颈动脉狭窄的相关性。方法收集2013年至2015年我院内分泌科确诊的糖尿病患者,经过糖尿病视网膜病变筛查发现的视网膜栓塞患者资料,根据标准化方案,进行颈动脉多普勒超声及超声心动图等一系列检查确诊,并记录评估结果、用药变化和接受相关外科手术干预的患者数量。结果糖尿病视网膜病变筛查患者中有62例(1.0%)存在视网膜动脉阻塞。病例资料齐全的患者53例,其中33例(62.3%)患者相关用药发生变化。53例患者中13例(24.5%)存在明显的颈动脉狭窄,其中2例患者行颈动脉内膜切除术。13例患者接受了最大剂量的药物治疗。结论明显的颈动脉狭窄在经视网膜病变筛查发现的视网膜动脉阻塞患者中较为常见。而将视网膜动脉阻塞患者转诊到指定医院科室,并对其进一步调查可确定患者发生脑血管事件的风险,进而可优化其治疗措施。 展开更多

关键词 糖尿病 糖尿病视网膜病变 颈动脉狭窄 视网膜阻塞

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应激活化蛋白激酶信号通路及其靶基因对氧化应激诱导的人晶状体上皮细胞凋亡的影响 被引量：1

11

作者 杨鑫 郭海科 +1 位作者 方梦园 张金嵩 《中华实验眼科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第7期603-607,共5页

背景白内障的发生与氧化应激诱导的晶状体上皮细胞（LECs）凋亡有关，而BH3-only蛋白是凋亡机制启动的关键因素，其过程可能与c—JunN末段激酶（JNK）通路激活有关，但氧化应激诱导的LECs凋亡与JNK通路的关系尚未完全阐明。目的探讨JNK... 背景白内障的发生与氧化应激诱导的晶状体上皮细胞（LECs）凋亡有关，而BH3-only蛋白是凋亡机制启动的关键因素，其过程可能与c—JunN末段激酶（JNK）通路激活有关，但氧化应激诱导的LECs凋亡与JNK通路的关系尚未完全阐明。目的探讨JNK／c—Jun通路及其靶基因Bim与PUMA在氧化应激诱导的LECs凋亡中的作用。方法将人LECs系HLEC—B3在含质量分数10％胎牛血清的DMEM培养基中培养和传代。将80％融合的细胞接种在24孑L板并随机分为无H2O2或H2O2（50μmol／L）处理4、8、12h组，Hoechst33258染色观察细胞形态并计数细胞凋亡率，采用Western blot法检测各组HLEC—B3细胞中JNK／c—Jun通路的激活情况和Bim、PUMA蛋白的表达水平，采用逆转录聚合酶链反应（RT—PCR）法检测c—Jun、Bim、PUMAmRNA在HLEC—B3细胞中的表达。在H2O2处理的细胞培养基中加入JNK／c—Jun通路抑制剂CEP11004或SP600125处理4h，以无H2O2或H2O2＋DMSO处理的细胞分别作为阴性和阳性对照组，Hoechst33258染色观察各组LECs的凋亡情况并检测JNK／c—Jun通路的激活情况和Bim、PUMA蛋白的表达。当培养细胞达60％融合时，将200pmol／L的Bim或PUMA小分子干扰片段转染细胞24h，然后用H2O2处理细胞采用Western blot法和RT—PCR法检测Bim、PUMA蛋白及其mRNA在HLEC—B3细胞中的表达。结果H2O2处理HLEC—B34、8、12h后，其细胞凋亡率的总体比较差异有统计学意义（F=1909．433，P=0．000），H2O2处理HLEC—B34、8、12h细胞凋亡率分别为（4．30±1．15）％、（27．08±O．74）％和（46．59±0．91）％，与无H2O2处理组（2．74±0．21）％比较差异均有统计学意义（P=0．049、0．000、0．000）。与无H2O2处理组比较，不同时间H2O2处理组JNK／c—Jun通路的激活和Bim、PUMA蛋白及其mRNA在HLEC—B3细胞中的表达强度均明显增加；加入CEP11004或SP600125后，上述因子表达下调，与DMSO培养组比较凋亡率显著下降，差异均有统计学意义（均P=0．000）。转染Bim或PUMA小分子干扰片段后，H2O2处理HLEC—B312h组的细胞凋亡率明显高于Bim基因敲除组和PU肘A基因敲除组，差异均有统计学意义（P〈0．05）。结论H2O2诱导JNK激活并引起Bim、PUMA和c—Jun蛋白及其mRNA表达上调，其作用呈时间依赖性；抑制JNK／c—Jun通路及干扰Bim或PUMA的表达能对H2O2诱导的人LECs的凋亡起保护作用。 展开更多

关键词 人晶状体上皮细胞 氧化应激 凋亡 JNK/c—Jun通路

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兔Epi-LASIK上皮瓣弃留对角膜基质TGF-β_1、bFGF表达及细胞凋亡的影响 被引量：1

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作者 陈艳蕾 郭海科 +1 位作者 张洪洋 孟倩丽 《眼科新进展》 CAS 北大核心 2013年第12期1115-1119,共5页

目的比较兔机械法激光上皮下角膜磨镶术(epithelial laser in situ keratomileusis,Epi-LASIK)弃留上皮瓣对角膜基质转化生长因子-β1(transforming growth factorβ1,TGF-β1)、碱性成纤维细胞生长因子(basic fibroblast growth factor... 目的比较兔机械法激光上皮下角膜磨镶术(epithelial laser in situ keratomileusis,Epi-LASIK)弃留上皮瓣对角膜基质转化生长因子-β1(transforming growth factorβ1,TGF-β1)、碱性成纤维细胞生长因子(basic fibroblast growth factor,bFGF)表达水平及细胞凋亡的影响,进而探讨上皮瓣对角膜创伤愈合过程的影响。方法 21只新西兰大白兔行保留上皮瓣Epi-LASIK(留瓣组),21只行弃上皮瓣Epi-LASIK(弃瓣组)。分别于术后4 h、1 d、3 d、5 d、7 d、15 d、30 d每组各处死3只(6眼)兔,通过免疫组织化学和TUNEL法检测兔角膜基质中TGF-β1、bFGF的表达及基质细胞凋亡水平,并观察各组术后角膜上皮愈合时间和haze发生情况。结果弃瓣组上皮愈合时间为(3.88±0.98)d,留瓣组为(4.05±0.78)d,差异无统计学意义(t=0.640,P=0.526)。术后两组均未发现3级及以上haze产生;术后3 d,两组haze发生率差异有统计学意义(χ2=4.269,P=0.039),留瓣组较弃瓣组haze程度重;术后30 d,两组haze均消失。各时间点留瓣组TGF-β1、bFGF阳性细胞数均多于弃瓣组,但组间差异均无统计学意义(均为P>0.05)。术后4 h,留瓣组基质细胞凋亡细胞数(23.63±5.72)多于弃瓣组(16.75±4.07),差异有统计学意义(t=2.400,P=0.037);余时间点两组间差异均无统计学意义(均为P>0.05)。结论 Epi-LASIK保留上皮瓣增加基质细胞凋亡水平和术后haze发生率,上皮瓣是角膜创伤愈合修复过程的负性影响因素之一。 展开更多

关键词 机械法激光上皮下角膜磨镶术 上皮瓣 转化生长因子-Β1 碱性成纤维细胞生长因子 细胞凋亡

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过氧化氢处理晶状体上皮细胞中黏着斑激酶的表达

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作者 黄煜 孟倩丽 郭海科 《中华实验眼科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第10期914-918,共5页

背景 年龄相关性白内障的发生、发展与长期氧化应激导致的细胞凋亡有关.研究表明,过氧化氢（H2O2）处理体外培养的细胞后可激活细胞内的黏着斑激酶（FAK）信号通路,从而影响细胞的增生与凋亡.研究FAK对氧化应激晶状体上皮细胞（LECs）... 背景 年龄相关性白内障的发生、发展与长期氧化应激导致的细胞凋亡有关.研究表明,过氧化氢（H2O2）处理体外培养的细胞后可激活细胞内的黏着斑激酶（FAK）信号通路,从而影响细胞的增生与凋亡.研究FAK对氧化应激晶状体上皮细胞（LECs）的影响在年龄相关性白内障的预防方面有重要意义. 目的 研究H2O2对LECs中FAK表达的影响,探讨FAK对细胞的调控功能. 方法 用含质量分数10％胎牛血清的低糖DMEM培养液在体积分数5％CO2培养箱中常规培养人LECs株HLECs-B3,不含H2O2的为阴性对照组,在含不同浓度（30、50、70、100、300、500、700、1000 μmol/L）H2O2的培养基作用24 h,采用CCK-8法检测各组细胞的存活率；对细胞进行FITC免疫荧光染色,荧光显微镜下观察各组细胞的形态变化及细胞内FAK的表达分布；观察Hoeehst33258染色的细胞核,评估各组细胞的凋亡情况；采用Western blot法技术半定量检测各组细胞内FAK蛋白的表达量及其磷酸化水平. 结果 对照组,30、50、70、100、300、500、700、1000 μmol/L H2O2组HLECs-B3细胞的存活率分别为（1.00±0.03）％、（1.24±0.03）％、（1.36±0.24）％、（0.93±0.02）％、（1.75±0.19）％、（1.37±0.18）％、（0.64±0.01）％、（0.59±0.11）％、（0.14±0.05）％,各组间细胞存活率的差异有统计学意义（F=95.30,P=0.oo）,其中300 μmol/L以下的各H2O2组细胞存活率均明显高于对照组,而＞500 μmol/L的各H2O2组细胞存活率均明显低于对照组,差异均有统计学意义（P＜0.05）.不同浓度H2O2刺激24 h后,各组HLECs-B3细胞形态由多边形变为长梭形,并伸出伪足,FAK在细胞中呈绿色荧光,其分布随H2O2浓度的变化而发生改变.1000 μmol/L H2O2作用细胞24 h,可见细胞碎片,细胞发生凋亡.Western blot法检测发现,不同浓度H2O2处理HLECs-B3 24 h后,细胞中FAK的表达量明显不同,总体差异有统计学意义（F=28.08,P=0.00）,其中＜300 μmol/L的各H2O2组细胞中FAK的表达量明显高于对照组,而＞500 μmol/L的各H2O2组细胞中FAK的表达量明显低于对照组,差异均有统计学意义（P＜0.05）.不同浓度H2O2作用3h时测得的磷酸化FAK （p-FAK）水平明显高于作用30 min时的测量值,差异均有统计学意义（P＜0.05）. 结论 H2O2可对LECs的存活和形态产生影响,并伴有FAK表达量及其磷酸化水平的改变,提示FAK参与了H2O2对细胞生物学行为的调控过程. 展开更多

关键词 氧化应激 过氧化氢 晶状体上皮细胞 黏着斑激酶

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全外显子组测序联合SnaPshot技术分析华南地区汉族人增生性糖尿病视网膜病变的遗传易感性 被引量：3

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作者 谢洁 蒋正轩 +4 位作者 张良 崔颖 王军 张爱平 孟倩丽 《中华实验眼科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第10期774-779,共6页

目的研究增生性糖尿病视网膜病变（PDR）的遗传易感性。方法采用横断面研究设计，纳入2011年9月至2012年2月在东莞眼病研究中确诊的2型糖尿病患者和2017年7月至2018年3月在广东省人民医院眼科诊治的相关患者共220例，其中100例糖尿病患... 目的研究增生性糖尿病视网膜病变（PDR）的遗传易感性。方法采用横断面研究设计，纳入2011年9月至2012年2月在东莞眼病研究中确诊的2型糖尿病患者和2017年7月至2018年3月在广东省人民医院眼科诊治的相关患者共220例，其中100例糖尿病患者和120例PDR患者。采用全外显子组测序技术对22例不伴视网膜病变的2型糖尿病患者（糖尿病组）和23例PDR患者（PDR组）的外周血样本DNA进行单核苷酸多态性（SNP）、InDel等鉴定，筛选出其中具有显著差异的9个外显子区域位点，采用SnaPshot技术对78例不伴视网膜病变的2型糖尿病患者和97例PDR患者进行9个位点的SNP分型，并分析其单倍型和连锁不平衡性。结果全外显子组测序检出75个位点SNP与PDR相关联（P<0.01），涉及53个基因，其中11个位点位于外显子区，7个突变属于非同义突变。SnaPshot SNP分型技术验证其中9个显著差异的位点，发现其等位基因及基因型频率在PDR组和糖尿病组中差异无统计学意义（P>0.05），但7种单倍型分布频率差异有统计学意义（P<0.01），其中Hap1和Hap4可能会降低PDR的患病风险[均比值比（OR）<1，P<0.05）]，Hap2可能会增加PDR的患病风险（OR>1，P<0.05）。结论华南地区汉族2型糖尿病患者PDR的发生存在遗传易感性。 展开更多

关键词 增生性糖尿病视网膜病变 汉族 遗传易感性 外显子组测序 SNAPSHOT

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