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糖皮质激素受体结合域诱饵表达载体的构建及鉴定
1
作者
郝坡
刘北忠
+5 位作者
欧阳峰
王东生
刘畅
钟梁
金丹婷
王翀
《第三军医大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2008年第3期216-219,共4页
目的构建糖皮质激素受体(glucocorticoid receptor,GR)结合域的诱饵表达载体。方法RT-PCR扩增GR结合域,克隆入pMD18-T,测序正确后,再亚克隆入诱饵载体pGBKT7中,再把构建好的诱饵载体pGBKT7-GR转化到酵母AH109细胞中,并用Western blot分...
目的构建糖皮质激素受体(glucocorticoid receptor,GR)结合域的诱饵表达载体。方法RT-PCR扩增GR结合域,克隆入pMD18-T,测序正确后,再亚克隆入诱饵载体pGBKT7中,再把构建好的诱饵载体pGBKT7-GR转化到酵母AH109细胞中,并用Western blot分析诱饵蛋白的表达情况,同时检测诱饵蛋白的毒性和自激活作用。结果成功扩增了GR结合域,并分别成功克隆到pMD18-T和pGBKT7中,测序结果正确。诱饵载体成功转化到酵母AH109细胞中,无毒性和自激活作用,Western blot分析结果也证实了酵母细胞高表达诱饵蛋白。结论成功构建了GR结合域的酵母诱饵表达载体。
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关键词
糖皮质激素受体结合域
诱饵载体
诱饵蛋白
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题名
糖皮质激素受体结合域诱饵表达载体的构建及鉴定
1
作者
郝坡
刘北忠
欧阳峰
王东生
刘畅
钟梁
金丹婷
王翀
机构
重庆医
科
大学医学检验系临床生物化学教研室
广东省人民医院皮肤性病科实验室
出处
《第三军医大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2008年第3期216-219,共4页
基金
国家自然科学基金(30300449)
国家中医药管理局基金(02-03ZP52)~~
文摘
目的构建糖皮质激素受体(glucocorticoid receptor,GR)结合域的诱饵表达载体。方法RT-PCR扩增GR结合域,克隆入pMD18-T,测序正确后,再亚克隆入诱饵载体pGBKT7中,再把构建好的诱饵载体pGBKT7-GR转化到酵母AH109细胞中,并用Western blot分析诱饵蛋白的表达情况,同时检测诱饵蛋白的毒性和自激活作用。结果成功扩增了GR结合域,并分别成功克隆到pMD18-T和pGBKT7中,测序结果正确。诱饵载体成功转化到酵母AH109细胞中,无毒性和自激活作用,Western blot分析结果也证实了酵母细胞高表达诱饵蛋白。结论成功构建了GR结合域的酵母诱饵表达载体。
关键词
糖皮质激素受体结合域
诱饵载体
诱饵蛋白
Keywords
glucocorticoid receptor binding domain
bait expression plasmid
bait protein
分类号
R394-33 [医药卫生—医学遗传学]
R394.3 [医药卫生—医学遗传学]
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作者
出处
发文年
被引量
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1
糖皮质激素受体结合域诱饵表达载体的构建及鉴定
郝坡
刘北忠
欧阳峰
王东生
刘畅
钟梁
金丹婷
王翀
《第三军医大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2008
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