高糖诱导H9c2心肌细胞凋亡并激活JNK通路的研究 被引量：3

1

作者 梁家亮 余细勇 +4 位作者 单志新 林秋雄 刘晓颖 朱杰宁 周志凌 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2010年第12期2094-2097,共4页

目的:探讨高糖在H9c2心肌细胞促凋亡和氧化应激的作用以及对JNK通路的影响。方法:以33mmol/L葡萄糖作为高糖条件培养H9c2细胞,5mmol/L葡萄糖作为正常代谢对照,DCFH-DA探针检测细胞内活性氧簇(ROS)水平,JC-1探针检测线粒体膜电位(△Ψm)... 目的:探讨高糖在H9c2心肌细胞促凋亡和氧化应激的作用以及对JNK通路的影响。方法:以33mmol/L葡萄糖作为高糖条件培养H9c2细胞,5mmol/L葡萄糖作为正常代谢对照,DCFH-DA探针检测细胞内活性氧簇(ROS)水平,JC-1探针检测线粒体膜电位(△Ψm)变化,AnnexinV/PI结合流式细胞仪检测凋亡率,western blot分析高糖对胞内JNK信号的影响。结果:在高糖条件下H9c2胞内ROS在24h开始增强,同时△Ψm降低,高糖诱导细胞凋亡率为(11.27±3.40)%(P=0.001),并能使JNK激活水平在10min开始增加(P<0.05)。结论:高糖氧化应激压力降低心肌细胞△Ψm并导致凋亡,同时激活与凋亡密切相关的JNK通路。 展开更多

关键词 肌细胞 心脏 凋亡 高糖血症 JNK通路

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MicroRNA对药物转运蛋白和代谢酶调控的研究进展 被引量：1

2

作者 郑志伟 劳海燕 +1 位作者 余细勇 钟诗龙 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2011年第7期1129-1131,共3页

人体内药物的处置是通过吸收、转运、生物转化以及排泄四个步骤来完成，其中药物的吸收和转运由药物转运蛋白完成．而药物的生物转化则需要药物代谢酶的参与。体内药物处置过程实际上由药物转运蛋白和代谢酶所介导，

关键词 药物转运蛋白 药物代谢酶 MICRORNA 调控 体内药物 生物转化 药物处置 吸收

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外泌体在心血管疾病中的研究进展 被引量：5

3

作者 肖静 余细勇 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第4期746-750,共5页

人体诸多生理功能的发挥是通过细胞间的信息交换来完成的。目前细胞之间的信息交换涉及的机制较为复杂，其中比较重要的有分泌生长因子、各种小分子物质（多肽类、生物活性脂类和核苷酸）、细胞间接触和分泌到胞外的基质成分等。

关键词 外泌体 心血管疾病 信息传递

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基于DNA pooling技术的全基因组关联研究筛选主动脉夹层等位基因遗传位点 被引量：1

4

作者 陈逸飞 钟诗龙 +3 位作者 罗建方 薛凌 黎明 胡孜阳 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2012年第20期3405-3407,共3页

目的:筛选与主动脉夹层发病机制相关的遗传易感基因。方法:从主动脉夹层患者(150例)及对照组(250例)外周血白细胞提取基因组DNA,采用DNA Pooling为基础的Illumina Human660W-Quad芯片扫描,筛选与主动脉夹层发病相关的遗传易感基因。结果... 目的:筛选与主动脉夹层发病机制相关的遗传易感基因。方法:从主动脉夹层患者(150例)及对照组(250例)外周血白细胞提取基因组DNA,采用DNA Pooling为基础的Illumina Human660W-Quad芯片扫描,筛选与主动脉夹层发病相关的遗传易感基因。结果:(1)对照组女性数量明显多于病例组(P<0.01);年龄、吸烟、高血压、糖尿病人数无统计学差异(P>0.05)。(2)遗传变异位点SNPrs2298491(位于TBCEL基因),SNP rs6080720(位于BFSP1基因),SNP rs7653410(位于SNTN基因),SNP rs2345106(位于COLQ基因)和位于ABCA13基因上的SNPrs4024044可能与主动脉夹层的发病有关。结论:SNPsrs2298491,rs6080720,rs7653410,rs2345106和rs4024044可能是主动脉夹层发病机制相关遗传变异位点的一部分。 展开更多

关键词 主动脉夹层 DNA pooling 单核苷酸多态性 全基因组关联研究 基因

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长链非编码RNA对心脏发育的表观遗传学调控研究进展 被引量：2

5

作者 杨翔宇 余细勇 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第11期2101-2106,共6页

长链非编码RNA（long noncoding RNA or large noncoding RNA,lncRNAs）是一类转录本长度超过200 nt的功能性RNA,存在于细胞核或胞质中。lncRNAs能调节生命过程中关键基因的表达,从而影响机体正常生理发育、功能维持和异常病理过程,如... 长链非编码RNA（long noncoding RNA or large noncoding RNA,lncRNAs）是一类转录本长度超过200 nt的功能性RNA,存在于细胞核或胞质中。lncRNAs能调节生命过程中关键基因的表达,从而影响机体正常生理发育、功能维持和异常病理过程,如神经干细胞分化发育、心脏疾病发生、肿瘤形成等。 展开更多

关键词 长链非编码RNA 心脏发育 心脏疾病 表观遗传学

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双侧颈袢神经再支配环杓后肌电生理特性研究

6

作者 刘少锋 葛平江 +4 位作者 张思毅 祁周措 姚丽明 盛晓丽 聂明荣 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2010年第6期934-936,共3页

目的:将颈袢神经同喉返神经远心端吻合常常使用在重建喉肌功能的手术中,吻合后环杓后肌的电生理特性可能发生改变,我们为研究环杓后肌的电生理变化而做此研究。方法:14只混种狗被随机分为两组,一组动物暴露双侧喉返神经后,将其切断,立... 目的:将颈袢神经同喉返神经远心端吻合常常使用在重建喉肌功能的手术中,吻合后环杓后肌的电生理特性可能发生改变,我们为研究环杓后肌的电生理变化而做此研究。方法:14只混种狗被随机分为两组,一组动物暴露双侧喉返神经后,将其切断,立即将颈袢神经同其相吻合,为实验组。另一组动物为正常对照组。9周后,暴露吻合处,采用功能性电刺激刺激环杓后肌,并记录对应的声门开最大电刺激电压阈值和声门开大声带移动阈值。正常对照组同样测量这两个值。结果:实验组的声门开最大电刺激电压阈值是(4.86±1.46)V,声门开大声带移动阈值是(0.46±0.15)V,而正常对照组的两个值分别是(3.36±1.25)V和(0.39±0.21)V,两组间差异没有统计学意义(P>0.05)。结论:使用颈袢神经吻合喉返神经重建9周后,环杓后肌电生理特性较正常动物没有明显改变。提示使用较小的电刺激就能够促使颈袢神经重建的环杓后肌发生收缩,从而达到开大声门的作用。 展开更多

关键词 电生理学 颈袢神经 环杓后肌

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静脉用唑来膦酸治疗老年骨质疏松患者时引起的急性期发热反应分析 被引量：22

7

作者 邓海鸥 李东风 +3 位作者 张伟杰 智喜梅 许翎 吴文 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第12期2076-2078,共3页

目的明确静脉用唑来膦酸治疗老年骨质疏松患者急性发热反应情况及其相关因素。方法观察2010年度在我院住院期间,使用静脉用唑来膦酸5 mg静脉滴注治疗的所有老年骨质疏松患者共38人。观察急性期发热出现比例。按是否出现发热症状分为发... 目的明确静脉用唑来膦酸治疗老年骨质疏松患者急性发热反应情况及其相关因素。方法观察2010年度在我院住院期间,使用静脉用唑来膦酸5 mg静脉滴注治疗的所有老年骨质疏松患者共38人。观察急性期发热出现比例。按是否出现发热症状分为发热组与无发热组。观察发热组发热出现时间、持续时间、发热时平均最高体温、退热药物使用情况。比较两组患者年龄、骨质疏松病程、性别比例、静脉用唑来膦酸治疗前甲状旁腺激素、β-胶原分解片段、降钙素、骨钙素、血清钙差异,及治疗前使用抗骨质疏松药物差异。结果⑨38位使用唑来膦酸老年骨质疏松患者中共观察到12人发热,占31.6%。16.7%(2/12)的患者治疗当天出现发热,其余患者均在治疗后第1天出现发热。平均发热持续时间为1 d。发热时平均最高体温(38.5±0.84)℃。所有患者均需要退热治疗,退热药物使用日夜百服咛片,平均用量为(3.55±1.21)片。⑨发热组与无发热组比较,发热组治疗前甲状旁腺激素水平显著高于无发热组(P值<0.05);骨钙素、降钙素、β-胶原分解片段、血钙两组无显著差异。结论老年骨质疏松患者静脉用唑来膦酸治疗时出现急性期发热反应并不少见,虽为中等程度发热,但是均为一过性。治疗前PTH水平可能与老年骨质疏松患者静脉用唑来膦酸时出现的急性期发热反应相关。 展开更多

关键词 静脉用唑来膦酸 老年骨质疏松 急性期发热反应

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大鼠活体心肌缺血再灌注损伤模型的建立与综合评估 被引量：25

8

作者 邓宇珺 符永恒 +9 位作者 谭宁 曾红科 单志新 林秋雄 李晓红 董小莉 余细勇 杨敏 谭卫萍 苏健 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第2期412-416,共5页

目的:构建并评估大鼠活体心肌缺血再灌注损伤(I/R)的实验动物模型。方法:将清洁级成年SD雄性大鼠72只,随机分为正常组、假结扎组和I/R模型组,手术的两组全麻下开胸暴露心脏,假结扎组只过线不结扎,模型组使用"U形金属管"进行... 目的:构建并评估大鼠活体心肌缺血再灌注损伤(I/R)的实验动物模型。方法:将清洁级成年SD雄性大鼠72只,随机分为正常组、假结扎组和I/R模型组,手术的两组全麻下开胸暴露心脏,假结扎组只过线不结扎,模型组使用"U形金属管"进行冠状动脉左前降支结扎,持续心电图监测,并于再灌注2 h与4 h后进行血浆生化﹑心肌组织学的检测。结果:与正常组和假结扎组比较,I/R模型组心电图有明显ST-T改变和再灌注后病理性Q波,再灌注2 h和4 h时存在比较明显的ST-T改变;血标本检测示心肌型肌酸激酶同功酶(CK-MB)、心肌钙蛋白I(cTnI)、一氧化氮(NO)、丙二醛(MDA)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)水平显著升高(P<0.05或P<0.01),T-SOD水平在2 h和4 h也应激性升高(P<0.05);心肌组织病理学检测显示模型组左心室心肌损伤疤痕明显,且2 h模型组左室心肌存在间隔性梗死区域,4 h模型组心肌组织区域性梗死和梗死面积明显增加;TUNEL法与Bcl-2﹑Bax蛋白实验显示2 h和4 h心肌细胞凋亡数量明显增加;Bcl-2/Bax蛋白表达阳性细胞比值下降显著(P<0.01)。结论:成功建立大鼠活体心肌I/R模型,模型大鼠的心电图、血清学、心梗面积﹑心肌细胞凋亡和心肌组织病理学等发生显著改变。 展开更多

关键词 大鼠 再灌注损伤 细胞凋亡

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华法林药代学和药动学通路突变等位基因在中国汉族人群中的分布 被引量：12

9

作者 刘媛 钟诗龙 +5 位作者 杨敏 谭虹虹 费洪文 陈纪言 余细勇 林曙光 《北京大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2011年第6期798-803,共6页

目的:考察广东地区汉族人群中CYP2C9、CYP3A4、VKORC1和GGCX基因多态性分布。方法:入选2000至2008年广东省人民医院行瓣膜置换术长期口服华法林抗凝治疗的中国汉族患者970例,通过文献检索,选取与华法林药代学和药效学可能相关的CYP2C9、... 目的:考察广东地区汉族人群中CYP2C9、CYP3A4、VKORC1和GGCX基因多态性分布。方法:入选2000至2008年广东省人民医院行瓣膜置换术长期口服华法林抗凝治疗的中国汉族患者970例,通过文献检索,选取与华法林药代学和药效学可能相关的CYP2C9、CYP3A4、VKORC1和GGCX 4种基因的12个单核苷酸多态性(singlenucleotide polymorphisms,SNPs)位点,分别为:rs12572351 G>A、rs9332146 G>A、rs4917639 G>T、rs1057910 A>C(CYP2C9*3)、rs1934967 G>T、rs1934968 G>A、rs2242480 T>C、rs2246709 G>A、rs9923231 C>T(VKORC1-1639G>A)、rs2359612 G>A(VKORC1*2)、rs10871454 C>T和rs699664 T>C,比较系统地获得了中国汉族人群中12个SNPs突变频率的分布状况。SNPs的检测采用SNaPshot技术,群体代表性检验采用Hardy-Weinberg遗传平衡检验。结果:CYP2C9基因rs12572351 G>A、rs9332146 G>A、rs4917639 C>A、rs1057910 A>C(*3)、rs1934967 G>T和rs1934968 G>A等位基因突变频率分别为32.53%、2.16%、8.25%、3.61%、19.18%和37.37%;CYP3A4基因rs2242480 T>C和rs2246709 G>A基因突变分别为29.07%和40.41%;VKORC1基因rs9923231 C>T、rs2359612G>A和rs10871454 C>T SNPs位点等位基因突变频率分别为87.99%、87.94%和91.34%;GGCX基因rs699664T>C基因突变为31.86%。结论:系统研究与华法林药代学和药效学相关的CYP2C9、CYP3A4、VKORC1和GGCX 4种基因12个SNPs的突变频率在中国汉族行瓣膜置换术患者人群中的分布,对于指导华法林个体化用药具有重要的临床意义。 展开更多

关键词 华法林 多态现象 遗传 突变 心脏瓣膜 人工 汉族

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嘌呤霉素氨基核苷肾病肾脏中RANK-RANKL的表达 被引量：8

10

作者 冯仲林 刘双信 +13 位作者 史伟 肖厚勤 梁馨苓 刘晓颖 叶智明 王素霞 梁永正 章斌 王文健 刘艳辉 梅平 徐丽霞 马建超 夏运风 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第1期65-69,共5页

目的探讨RANK-RANKL在嘌呤霉素氨基核苷肾病(PAN)大鼠动物模型肾脏中的表达。方法 36只SD大鼠被分配为PAN组及对照组,单次静脉注射嘌呤霉素氨基核苷(PA,100 mg/kg)制作PAN动物模型。大鼠于第3、7、14天检测蛋白尿及血肌酐。检测肾脏病理... 目的探讨RANK-RANKL在嘌呤霉素氨基核苷肾病(PAN)大鼠动物模型肾脏中的表达。方法 36只SD大鼠被分配为PAN组及对照组,单次静脉注射嘌呤霉素氨基核苷(PA,100 mg/kg)制作PAN动物模型。大鼠于第3、7、14天检测蛋白尿及血肌酐。检测肾脏病理,并分析RANK和RANKL变化。结果(1)在PAN SD大鼠动物模型中,第3、7、14天时蛋白尿与对照组比较有显著差别,第7天达到高峰;(2)用Western blotting及RT-PCR定量检测发现RANK-RANKL蛋白及mRNA在PAN模型组高于对照组;(3)用激光共聚焦技术显示足细胞标记蛋白Synaptopodin与RANK完全重合,提示RANK主要在足细胞表达;(4)免疫电镜发现RANK在PAN模型组明显增多,且主要定位于足突的顶部胞膜和胞质内。结论在PAN SD大鼠动物模型足细胞异常表达RANK-RANKL,提示RANK及RANKL在足细胞损伤中可能发挥重要作用。 展开更多

关键词 嘌呤霉素氨基核苷肾病 肾脏 足细胞 RANK RANKL 动物模型

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孕中晚期胎儿细胞遗传学的诊断分析 被引量：4

11

作者 黄曙方 李萍 +6 位作者 丁红 刘珍 肖定璋 陈景 陈少贤 孟锦绣 余细勇 《中国全科医学》 CAS CSCD 北大核心 2013年第17期2017-2020,共4页

目的通过了解胎儿染色体异常类型、频率与手术指征的关系,探讨胎儿染色体病的发生情况。方法选择2003—2011年我院的1 956例具有产前诊断指征的孕中晚期孕妇羊水及脐血细胞进行培养,制备分裂中期细胞染色体,常规G显带分析核型,分析胎儿... 目的通过了解胎儿染色体异常类型、频率与手术指征的关系,探讨胎儿染色体病的发生情况。方法选择2003—2011年我院的1 956例具有产前诊断指征的孕中晚期孕妇羊水及脐血细胞进行培养,制备分裂中期细胞染色体,常规G显带分析核型,分析胎儿染色体核型异常的类型、检出率。结果 1 956例病例细胞培养成功1 945例,羊水培养成功率99.8%,脐血培养成功率98.8%;胎儿染色体异常74例(3.8%);染色体异态性101例(5.2%);74例染色体异常病例中,终止妊娠58例(78.4%);手术相关妊娠丢失率0.1%。结论对高危孕妇进行胎儿细胞遗传学检查,能提高染色体病检出,有效控制出生缺陷的发生率。 展开更多

关键词 孕中晚期 产前诊断 染色体

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慢性阻塞性肺疾病病人肺内小动脉对血栓素及内皮素的反应性降低 被引量：4

12

作者 陈怡静 邓春玉 +4 位作者 邝素娟 马珏 赵国栋 张光燕 崔建修 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第3期360-364,共5页

目的探讨肺通气功能正常与慢性阻塞性肺疾病(COPD)病人肺内小动脉对血管活性物质(如:血栓素A2、内皮素等)的反应性及其可能的机制。方法分离人肺内小动脉,制备血管条,采用微血管张力测定技术,分别比较肺通气功能正常与COPD病人肺内小动... 目的探讨肺通气功能正常与慢性阻塞性肺疾病(COPD)病人肺内小动脉对血管活性物质(如:血栓素A2、内皮素等)的反应性及其可能的机制。方法分离人肺内小动脉,制备血管条,采用微血管张力测定技术,分别比较肺通气功能正常与COPD病人肺内小动脉对60 mmol/L高钾溶液、血栓素A2类似物U46619(100 nmmol/L)、内皮素(ET-1)(30 nmol/L)诱导反应的张力变化;观察用非特异性环氧化酶抑制剂吲哚美辛孵育后肺内小动脉张力变化幅度的差异。结果与肺通气功能正常病人相比,COPD病人肺内小动脉对U46619(对照组:7.68±2.31 mN,COPD组:5.89±2.43 mN,P<0.05)和ET-1(对照组:5.97±2.08 mN,COPD组:3.99±2.15 mN,P<0.01)引起的张力明显下降,而两组对高钾溶液引起的张力变化无明显差异(对照组:5.65±1.70 mN,COPD组:5.02±1.38 mN,P>0.05);吲哚美辛孵育后,对照组肺血管张力下降(对照组:孵育前平均张力比孵育后平均下降39%,P<0.01;COPD组:孵育前平均张力比孵育后平均上升5%,P>0.05)。结论慢性阻塞性肺疾病病人对血栓素类似物U46619、内皮素ET-1反应性降低。 展开更多

关键词 慢性阻塞性肺疾病 肺内小动脉 血栓素A2类似物 内皮素 吲哚美辛

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TRX-2基因表达在急性白血病微小残留病灶监测中的作用 被引量：3

13

作者 罗琼 黄志新 +1 位作者 罗柳萍 肖定璋 《中南大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2013年第4期383-387,共5页

目的:探讨硫氧还蛋白-2(TRX-2)基因表达在急性白血病(AL)微小残留病灶(MRD)监测中的价值。方法:采用实时荧光定量聚合酶反应(RQ-PCR)检测AL初发组(68例)、血液学完全缓解(CHR)组(57例)和复发组(25例)TRX-2基因表达的变化,25名骨髓捐献... 目的:探讨硫氧还蛋白-2(TRX-2)基因表达在急性白血病(AL)微小残留病灶(MRD)监测中的价值。方法:采用实时荧光定量聚合酶反应(RQ-PCR)检测AL初发组(68例)、血液学完全缓解(CHR)组(57例)和复发组(25例)TRX-2基因表达的变化,25名骨髓捐献者作为正常对照组,TRX-2基因表达量的上限(91)为参考值上限,回顾分析复发组在CHR期(骨髓原始细胞计数<5%)TRX-2基因表达的水平,比较其与流式细胞术(FCM)检测的MRD的相关性。结果:TRX-2基因表达在完全缓解组与初治组和复发组之间差异有统计学意义(P<0.01);复发患者CHR期(骨髓原始细胞<5%),21例(21/25)TRX-2基因呈高表达(>91),与流式细胞术检测的MRD具有相关性(r=0.874,P=0.0005)。结论:TRX-2基因为急性白血病新的广谱标志,适用于MRD的监测。 展开更多

关键词 TRX-2基因 急性白血病 微小残留病灶 实时荧光定量聚合酶反应

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上／下调miR-21对结肠癌细胞的生物学作用及对西妥昔单抗药物敏感性的影响 被引量：5

14

作者 巩波 李东风 +2 位作者 谢子钧 段伊帆 李子俊 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第4期609-614,共6页

目的:探讨miR-21在结肠癌细胞中的生物学功能及对EGFR单抗西妥昔敏感性的影响。方法:通过慢病毒载体的构建及包装生成上调/下调miR-21的慢病毒LV-miR-21和LV-anti-miR-21并感染人结肠癌RKO细胞,采用qRT-PCR、MTT、非锚定依赖性细胞生长... 目的:探讨miR-21在结肠癌细胞中的生物学功能及对EGFR单抗西妥昔敏感性的影响。方法:通过慢病毒载体的构建及包装生成上调/下调miR-21的慢病毒LV-miR-21和LV-anti-miR-21并感染人结肠癌RKO细胞,采用qRT-PCR、MTT、非锚定依赖性细胞生长、流式细胞术、CCK-8等技术检测上调/下调miR-21后细胞的miR-21表达水平、细胞增殖、克隆形成能力、细胞凋亡能力及对西妥昔单抗药物敏感性的变化。结果:LV-miR-21与LV-anti-miR-21慢病毒的滴度分别为3.0×1012TU/L和2.0×1012TU/L,将病毒颗粒分别感染人结肠癌RKO细胞,观察绿色荧光,感染效率在80%以上。LV-miR-21组的miR-21表达水平、细胞增殖能力和克隆形成能力均高于LV-anti-miR-21组,差异有统计学意义(P<0.05)。而LV-anti-miR-21组的细胞早期凋亡率及西妥昔单抗对细胞的抑制率均高于LV-miR-21组(P<0.05)。结论:miR-21可促进结肠肿瘤细胞的增殖。下调miR-21可以增加结肠癌细胞对靶向治疗药物西妥昔单抗的敏感性。 展开更多

关键词 结肠肿瘤 MIR-21 西妥昔

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Let-7d表达质粒的构建及其对卵巢癌细胞高迁移率A2蛋白及ras蛋白表达的抑制作用 被引量：2

15

作者 叶海燕 陈建国 +2 位作者 黄小穗 郭爱林 郝佩佩 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第12期1752-1757,共6页

目的构建let-7d真核表达载体,研究let-7d对卵巢癌细胞生物学行为及蛋白表达的影响。方法根据let-7d序列设计合成microRNA片段,定向克隆到pcDNATM6.2GW/EmGFPmiR真核表达载体上,运用基因转染技术将其导入卵巢癌IGROV1细胞中,使let-7d基... 目的构建let-7d真核表达载体,研究let-7d对卵巢癌细胞生物学行为及蛋白表达的影响。方法根据let-7d序列设计合成microRNA片段,定向克隆到pcDNATM6.2GW/EmGFPmiR真核表达载体上,运用基因转染技术将其导入卵巢癌IGROV1细胞中,使let-7d基因过表达,以实时荧光定量PCR验证let-7d及高迁移率A2(HMGA2)基因的表达,并用Western blotting检测相关蛋白HMGA2的差异表达。以MTT绘制细胞生长曲线,流式细胞术检测细胞凋亡率,分析let-7d对IGROV1细胞增殖生长的影响。结果成功构建针对靶向let-7d的表达质粒,将表达质粒转染人卵巢癌IGROV1细胞后,明显下调HMGA2的表达水平,而下调ras蛋白的作用较弱,没有前者明显。细胞表型研究显示,抑制HMGA2表达可能改变该细胞的恶性表型,表现在细胞增殖能力明显下降,自发凋亡率明显增加等。结论 Let-7d通过对HMGA2的调控,在改变卵巢癌IGROV1细胞恶性表型方面可能起重要作用。 展开更多

关键词 LET-7 卵巢癌 高迁移率蛋白A2 RAS

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新生儿362例地高辛血药浓度监测结果分析 被引量：1

16

作者 江桂芬 周志凌 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2009年第19期3303-3304,共2页

目的:探讨血药浓度监测对新生儿地高辛合理用药的重要作用,提高新生儿用药安全性。方法:荧光偏振免疫法及对测定362例患者地高辛血药浓度进行回顾性分析。结果:低于有效浓度范围(<0.8μg/L)的患儿占29.3%,在有效浓度范围内(0.8～2.2... 目的:探讨血药浓度监测对新生儿地高辛合理用药的重要作用,提高新生儿用药安全性。方法:荧光偏振免疫法及对测定362例患者地高辛血药浓度进行回顾性分析。结果:低于有效浓度范围(<0.8μg/L)的患儿占29.3%,在有效浓度范围内(0.8～2.2μg/L)的患儿占61.6%,高于有效浓度范围(>2.2μg/L)的患儿占9.1%。结论:地高辛血药浓度个体差异大,新生儿在吸收、分布、代谢等方面受多种因素影响,所以,对其进行血药浓度监测对合理用药,减少药物中毒起着重要作用。 展开更多

关键词 婴儿 新生 地高辛 血药浓度监测

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人肾小管上皮细胞necroptosis模型的构建

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作者 蒋芬 陈源汉 +6 位作者 梁馨苓 李东风 徐丽霞 谢红萍 胡鹏华 刘双信 史伟 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第12期2301-2304,共4页

目的:以体外培养的人肾小管上皮细胞(HK-2细胞)为靶细胞,构建肾小管上皮细胞凋亡样坏死(necroptosis)的模型。方法:采用肿瘤坏死因子α(tumor nercosis factorα,TNF-α)诱导细胞凋亡,同时采用抗霉素A(antimycin A)耗竭ATP,构建肾小管... 目的:以体外培养的人肾小管上皮细胞(HK-2细胞)为靶细胞,构建肾小管上皮细胞凋亡样坏死(necroptosis)的模型。方法:采用肿瘤坏死因子α(tumor nercosis factorα,TNF-α)诱导细胞凋亡,同时采用抗霉素A(antimycin A)耗竭ATP,构建肾小管上皮细胞凋亡的模型,并以caspase-8抑制剂苄氧羰酰-缬氨酰-丙氨酰-天冬氨酰-氟甲基酮(benzyloxycarbonyl-Val-Ala-Asp-fluoromethylketone,zVAD-fmk)阻断凋亡,用necroptosis的特异性抑制剂necrostatin-1(Nec-1)阻断necroptosis,观察细胞在不同的处理下形态学的变化,同时检测细胞存活率及标志物微管相关蛋白1轻链3-Ⅱ(microtubule-associated protein 1 light chain 3-Ⅱ,LC3-Ⅱ)的表达。结果:(1)在TNF-α+zVAD-fmk+antimycin A处理1 h时细胞及细胞器膨胀,电镜下细胞膜碎裂,线粒体变圆、肿胀,嵴逐渐模糊,胞浆中出现大量自噬小体,而Nec-1预处理后细胞的坏死程度较对照组明显改善。(2)在TNF-α+zVAD-fmk+antimycin A1 h实验组,Nec-1预处理后细胞的存活率显著增加(P<0.05)。(3)TNF-α+zVAD-fmk+antimycin A干预1 h实验组在Nec-1预处理后LC3-Ⅱ的表达量明显下降(P<0.05)。结论:凋亡环境中阻断凋亡可以诱导肾小管上皮细胞necroptosis,抑制剂Nec-1能特异性阻断肾小管上皮细胞发生坏死。 展开更多

关键词 凋亡样坏死 肾小管上皮细胞 微管相关蛋白1轻链3-Ⅱ Necrostatin 1

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人类纤维化心脏瓣膜噬菌体表达文库的构建及质量分析

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作者 孟锦绣 李运雄 +3 位作者 朱平 卢聪 郑少忆 余细勇 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第10期1868-1872,共5页

目的:各种病因引起的心脏瓣膜纤维化是导致心脏瓣膜功能丧失的主要原因,样本来源有限和不可重获性是其分子机制研究的瓶颈。本研究旨在成功获取患者纤维化瓣膜的遗传信息物质,为探明瓣膜病变的分子机制提供直接证据。方法:心脏换瓣手术... 目的:各种病因引起的心脏瓣膜纤维化是导致心脏瓣膜功能丧失的主要原因,样本来源有限和不可重获性是其分子机制研究的瓶颈。本研究旨在成功获取患者纤维化瓣膜的遗传信息物质,为探明瓣膜病变的分子机制提供直接证据。方法:心脏换瓣手术中取纤维化瓣膜组织,提取高质量RNA,用SMART技术合成cDNA第1链,再用长距离PCR合成双链cDNA,经Sfi I酶切后过柱分级收集长片段cDNA,经T4 DNA连接酶催化连接入λTriplEx2载体,最后经λ噬菌体包装后构建成原始文库,用PCR、X-gal等方法进行文库质量鉴定。结果:成功构建了纤维化心脏瓣膜噬菌体表达文库,原始文库滴度为8×109 pfu/L,重组率为99%,外源基因片段大小在500到3 000 bp之间,其中81.25%片段大于1 000 bp。结论:成功构建了高质量的人类纤维化心脏瓣膜噬菌体表达文库,该文库的库容量足够代表人类基因的复杂性,高重组率能保障功能筛选的高效性,长片段更有助于全长基因的获得和表达。 展开更多

关键词 心脏瓣膜 纤维化 噬菌体文库构建

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青钱柳降糖组方对2型糖尿病大鼠的治疗作用 被引量：7

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作者 江新湄 林秋雄 +3 位作者 何国东 侯兴华 单志新 杜耀民 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第10期1794-1800,共7页

目的:探讨青钱柳降糖组方(QQL组方)对2型糖尿病模型大鼠的治疗效果。方法:随机抽取10只大鼠作为正常对照组,其余大鼠采用高脂饮食联合链脲霉素诱发2型糖尿病大鼠模型。成模大鼠随机分为中药高(300 mg·kg^(-1)·d^(-1))、中(150... 目的:探讨青钱柳降糖组方(QQL组方)对2型糖尿病模型大鼠的治疗效果。方法:随机抽取10只大鼠作为正常对照组,其余大鼠采用高脂饮食联合链脲霉素诱发2型糖尿病大鼠模型。成模大鼠随机分为中药高(300 mg·kg^(-1)·d^(-1))、中(150 mg·kg^(-1)·d^(-1))、低(75 mg·kg^(-1)·d^(-1))剂量组和模型对照组,每组10只。各给药组每日给予相应药物灌胃,连续6周。观察QQL组方对糖尿病大鼠体重、血糖、血清胰岛素、糖化血红蛋白、抗氧化指标和炎症因子的影响。结果:与模型对照组比较,QQL组方中、高剂量组大鼠的体重增加,血糖下降,血清胰岛素含量升高,糖化血红蛋白含量降低,血糖曲线下面积减少,胰岛组织损伤减轻,血清SOD和GSH增加,MDA、IL-1β和TNF-α水平降低。结论:QQL组方对2型糖尿病大鼠高血糖症状和糖耐受情况有改善作用,对胰岛组织有保护作用,其机制可能与其抗氧化和抗炎作用有关。 展开更多

关键词 青钱柳叶 降糖药 2型糖尿病 胰岛素

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miR-199a-3p靶向Smad1促进小鼠心肌纤维化相关基因的表达 被引量：3

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作者 梁景南 朱文思 +6 位作者 张灼 朱杰宁 符永恒 林秋雄 邝素娟 张梦珍 单志新 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第10期1203-1208,共6页

目的探讨微小RNA-199a-3p(miR-199a-3p)对心肌纤维化的调控作用及其作用靶基因。方法原代分离并体外培养成体C57BL/6小鼠心肌成纤维细胞;脂质体转染法将miR-199a-3p模拟物和Smad1 siRNA瞬时转染至小鼠心肌成纤维细胞;双荧光素酶报告基... 目的探讨微小RNA-199a-3p(miR-199a-3p)对心肌纤维化的调控作用及其作用靶基因。方法原代分离并体外培养成体C57BL/6小鼠心肌成纤维细胞;脂质体转染法将miR-199a-3p模拟物和Smad1 siRNA瞬时转染至小鼠心肌成纤维细胞;双荧光素酶报告基因实验检测miR-199a-3p与潜在靶基因Smad1 3'端非翻译区(3'-UTR)的结合作用;实时荧光定量PCR(RT-qPCR)和Western blot法分别检测小鼠心肌成纤维细胞转染miR-199a-3p后,Smad1及纤维化相关基因表达。Western blot检测转染miR-199a-3p,Smad1 siRNA后,小鼠心肌成纤维细胞中纤维化相关基因、Smad1和Smad3的激活水平。结果 RT-qPCR和Western blot结果证实在心肌成纤维细胞中过表达miR-199a-3p可以增强纤维化相关基因表达。双荧光素酶报告基因实验显示miR-199a-3p与Smad1 3'-UTR有结合作用。RT-qPCR和Western blot结果证实miR-199a-3p可在转录水平抑制Smad1表达。过表达miR-199a-3p和沉默Smad1均能一致性的通过激活Smad3通路而促进心肌成纤维细胞中纤维化相关基因表达。结论miR-199a-3p通过靶向Smad1,从而激活Smad3通路来促进纤维化相关基因表达。 展开更多

关键词 心肌纤维化 心肌成纤维细胞 微小RNA SMAD1

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