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Circ_0018478通过编码HERC4-193发挥抑制心肌成纤维细胞纤维化表型的作用
被引量：
4
1
作者
丰嘉欣
郭继深
+5 位作者
梁俣
姜佳雪
李晖
徐金东
方咸宏
单志新
《中山大学学报（医学科学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2022年第6期995-1004,共10页
【目的】探究环状RNA circ_0018478调控心肌成纤维细胞纤维化表型的作用和可能机制。【方法】RTqPCR检测健康器官捐献者(n=18)和心衰(n=28)患者心肌中circ_0018478及其宿主基因含E3泛素蛋白连接酶4的HECT和RLD结构域(HERC4)的表达水平...
【目的】探究环状RNA circ_0018478调控心肌成纤维细胞纤维化表型的作用和可能机制。【方法】RTqPCR检测健康器官捐献者(n=18)和心衰(n=28)患者心肌中circ_0018478及其宿主基因含E3泛素蛋白连接酶4的HECT和RLD结构域(HERC4)的表达水平。荧光原位杂交(FISH)实验和核质RNA定量检测circ_0018478的细胞分布情况,放线菌素D干预实验和核糖核酸外切酶(RNase R)消化实验检测circ_0018478的RNA稳定性。过表达腺病毒介导的circ_0018478时,分别在RNA和蛋白水平检测乳小鼠心肌成纤维细胞(mCFs)中如Ⅰ型和Ⅲ型胶原等纤维化相关基因表达的影响。利用EdU染色和Trans-well细胞迁移实验鉴定circ_0018478对mCFs增殖和迁移能力的影响。质谱shot-gun分析circ_0018478可能翻译蛋白的肽段序列。利用小干扰RNA(siRNA)抑制HERC4-193表达,检测对circ_0018478调控mCFs纤维化表型的影响。【结果】在心衰病人心肌中,相较于无显著表达差异的宿主基因HERC4,环形RNA circ_0018478表达显著增加。FISH和核质分离实验结果证实circ_0018478主要定位于心肌细胞胞质中。放线菌素D和RNase R消化实验证实circ_0018478具有典型的RNA稳定性。过表达circ_0018478可抑制mCFs的增殖、迁移和纤维化相关基因的表达。质谱shot-gun和Western blot检测结果提示circ_0018478可翻译预期的HERC4-193蛋白。过表达circ_0018478和HERC4-193可一致地抑制mCFs的纤维化表型,而抑制HERC4-193表达可有效减弱circ_0018478抑制mCFs中纤维化相关基因表达的作用(P<0.05)。【结论】Circ_0018478通过翻译蛋白HERC4-193发挥抑制心肌成纤维细胞纤维化表型的作用。
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关键词
心肌纤维化
circ_0018478
翻译
心肌成纤维细胞
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职称材料
题名
Circ_0018478通过编码HERC4-193发挥抑制心肌成纤维细胞纤维化表型的作用
被引量：
4
1
作者
丰嘉欣
郭继深
梁俣
姜佳雪
李晖
徐金东
方咸宏
单志新
机构
华南理工大学生物科学与工程学院
南方医科大学第二
临床
医学院
广东省
心血管病研究所心内科
广东省人民医院广东省临床药理学重点实验室
广东省
人民医院
检验科
广东省
人民医院
麻醉科
出处
《中山大学学报（医学科学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2022年第6期995-1004,共10页
基金
国家自然科学基金(82070254)
广州市科技计划项目(202102080093)
+3 种基金
广东省自然科学基金(2022A1515012522,2022A1515012175,2021A1515220122)
广东省卫健委课题(A2021002,A2022334)
广东省人民医院心血管专项(2020XXG003)
广东省人民医院国自然培育项目(KY0120220028)。
文摘
【目的】探究环状RNA circ_0018478调控心肌成纤维细胞纤维化表型的作用和可能机制。【方法】RTqPCR检测健康器官捐献者(n=18)和心衰(n=28)患者心肌中circ_0018478及其宿主基因含E3泛素蛋白连接酶4的HECT和RLD结构域(HERC4)的表达水平。荧光原位杂交(FISH)实验和核质RNA定量检测circ_0018478的细胞分布情况,放线菌素D干预实验和核糖核酸外切酶(RNase R)消化实验检测circ_0018478的RNA稳定性。过表达腺病毒介导的circ_0018478时,分别在RNA和蛋白水平检测乳小鼠心肌成纤维细胞(mCFs)中如Ⅰ型和Ⅲ型胶原等纤维化相关基因表达的影响。利用EdU染色和Trans-well细胞迁移实验鉴定circ_0018478对mCFs增殖和迁移能力的影响。质谱shot-gun分析circ_0018478可能翻译蛋白的肽段序列。利用小干扰RNA(siRNA)抑制HERC4-193表达,检测对circ_0018478调控mCFs纤维化表型的影响。【结果】在心衰病人心肌中,相较于无显著表达差异的宿主基因HERC4,环形RNA circ_0018478表达显著增加。FISH和核质分离实验结果证实circ_0018478主要定位于心肌细胞胞质中。放线菌素D和RNase R消化实验证实circ_0018478具有典型的RNA稳定性。过表达circ_0018478可抑制mCFs的增殖、迁移和纤维化相关基因的表达。质谱shot-gun和Western blot检测结果提示circ_0018478可翻译预期的HERC4-193蛋白。过表达circ_0018478和HERC4-193可一致地抑制mCFs的纤维化表型,而抑制HERC4-193表达可有效减弱circ_0018478抑制mCFs中纤维化相关基因表达的作用(P<0.05)。【结论】Circ_0018478通过翻译蛋白HERC4-193发挥抑制心肌成纤维细胞纤维化表型的作用。
关键词
心肌纤维化
circ_0018478
翻译
心肌成纤维细胞
Keywords
cardiac fibrosis
circ_0018478
translation
cardiac fibroblast
分类号
R363.2 [医药卫生—病理学]
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出处
发文年
被引量
操作
1
Circ_0018478通过编码HERC4-193发挥抑制心肌成纤维细胞纤维化表型的作用
丰嘉欣
郭继深
梁俣
姜佳雪
李晖
徐金东
方咸宏
单志新
《中山大学学报（医学科学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2022
4
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