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抑制核因子-kB对糖尿病大鼠肾组织MT3-MMP mRNA表达的影响
1
作者 吴文 丁鹤林 +2 位作者 陈黎红 徐明彤 傅祖植 《中山大学学报（医学科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2005年第3期273-277,315,共6页
【目的】研究抑制NF鄄资B活性对糖尿病大鼠肾组织膜3型基质金属蛋白酶(MT3鄄MMP)mRNA表达的影响。【方法】纯种雄性Wistar大鼠分为3组:A组为正常对照组(11只),B组为糖尿病大鼠未干预组(11只),C组为吡咯烷二硫基甲酸酯(PDTC,NF鄄资B活性... 【目的】研究抑制NF鄄资B活性对糖尿病大鼠肾组织膜3型基质金属蛋白酶(MT3鄄MMP)mRNA表达的影响。【方法】纯种雄性Wistar大鼠分为3组:A组为正常对照组(11只),B组为糖尿病大鼠未干预组(11只),C组为吡咯烷二硫基甲酸酯(PDTC,NF鄄资B活性抑制剂)干预组(9只)。以链脲佐菌素制备糖尿病模型。大鼠饲养18周后取出肾脏,以电泳迁移率变动分析技术检测NF鄄资B活性,RT鄄PCR检测MT3鄄MMPmRNA表达,以透射电镜检测肾小球基底膜厚度及系膜基质密度,并收集24h尿检测尿白蛋白排泄(UAE)。【结果】NF鄄资B活性在B组大鼠肾组织(1.85±0.54)×106明显高于A组(0.07±0.11)×106,P<0.01,C组(0.25±0.25)×106明显低于B组,P<0.01。肾组织MT3鄄MMPmRNA表达B组大鼠(1.37±0.96)明显高于A组(0.75±0.34),P<0.01,C组(0.75±0.36)明显低于B组(P<0.01)。与A组大鼠比较,肾小球基底膜厚度(531.6±107.6)nmvs(312.4±25.4)nm,P<0.01)及系膜基质密度(56.41±6.78)vs(33.95±5.22),P<0.01,均显著增高,C组肾小球基底膜厚度(315.8±21.4)nm及系膜基质密度(37.97±7.37)均显著低于B组,均P<0.01。UAE在B组大鼠(2.18±1.98)显著高于A组(0.41±0.47),P<0.05,以及C组(0.56±0.72),P<0.05。【结论】糖尿病大鼠肾组织NF鄄资B活性及MT3鄄MMPmRNA表达增加,抑制NF鄄资B活性可使肾组织MT3鄄MMPmRNA表达降低。 展开更多
关键词 抑制核因子-ΚB 糖尿病 大鼠 肾组织 MT3-MMP MRNA 表达
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雷奈酸锶通过骨形态发生蛋白-2/Smad通路促进骨髓间充质干细胞成骨分化 被引量：13
2
作者 吕辉珍 黄晓丹 +2 位作者 靳思思 郭润民 吴文 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第3期376-381,共6页
目的探讨骨形态发生蛋白-2（BMP-2）/Smad通路在雷奈酸锶（Sr）促进大鼠骨髓间充质干细胞（BMSCs）分化为成骨细胞过程中的作用。方法体外分离培养大鼠BMSCs,根据实验目的加入不同浓度Sr、BMP-2的拮抗剂noggin及Smad1小干扰RNA（SiRNA... 目的探讨骨形态发生蛋白-2（BMP-2）/Smad通路在雷奈酸锶（Sr）促进大鼠骨髓间充质干细胞（BMSCs）分化为成骨细胞过程中的作用。方法体外分离培养大鼠BMSCs,根据实验目的加入不同浓度Sr、BMP-2的拮抗剂noggin及Smad1小干扰RNA（SiRNA）。酶标法检测碱性磷酸酶（ALP）活性,茜素红染色检测钙结节,Western blotting法检测磷酸化Smad1/5/8及Runt相关转录因子-2（Runx2）蛋白的表达。结果应用0.1~10 mmol/L Sr处理BMSCs细胞1 h后,细胞内磷酸化Smad1/5/8表达增高,其中浓度为1 mmol/L时,表达达到高峰;在Sr处理BMSCs前,应用BMP-2拮抗剂noggin预处理细胞2 h能抑制Sr对磷酸化Smad1/5/8表达的上调作用;应用0.1~5 mmol/L Sr处理细胞6 h后,细胞内Runx2表达增高,其中浓度为1 mmol/L时,表达达到高峰;在Sr处理BMSCs前,应用Smad1 SiRNA转染细胞后能下调Smad1/5/8、磷酸化Smad1/5/8的表达,并抑制Sr对Runx2表达的上调作用,还拮抗Sr对ALP活性及钙化结节形成的促进作用。结论 BMP-2/Smad通路参与了Sr促进BMSCs成骨分化。 展开更多
关键词 雷奈酸锶 骨髓间充质干细胞 骨形态发生蛋白-2 小RNA干扰 SMAD1 5 8 Runx2 成骨细胞
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TGF-β1在雷奈酸锶促进大鼠骨髓间充质干细胞向成骨细胞分化中的作用 被引量：16
3
作者 王小娜 李正 +2 位作者 王瑒 兰爱平 吴文 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第12期2357-2361,共5页
目的:探讨转化生长因子β1(TGF-β1)在雷奈酸锶(Sr)促进大鼠骨髓间充质干细胞(rBMSCs)向成骨细胞分化中的作用。方法:应用试剂盒测定碱性磷酸酶(ALP)活性及钙结节数量;Western blotting法测定TGF-β1的表达水平。结果:应用0.1、1、3、5... 目的:探讨转化生长因子β1(TGF-β1)在雷奈酸锶(Sr)促进大鼠骨髓间充质干细胞(rBMSCs)向成骨细胞分化中的作用。方法:应用试剂盒测定碱性磷酸酶(ALP)活性及钙结节数量;Western blotting法测定TGF-β1的表达水平。结果:应用0.1、1、3、5、及7 mmol/L Sr分别处理rBMSCs 7 d,均能明显增加ALP活性,其中3 mmol/L Sr增加ALP活性的作用最大(P<0.01)。3 mmol/L Sr作用rBMSCs 21 d可明显增加钙结节数量。应用0.1～5 mmol/L Sr分别处理rBMSCs 7 d,可显著地上调TGF-β1的表达,其中浓度为1 mmol/L时,TGF-β1表达达到高峰。1～7 d,1 mmol/L Sr呈时间依赖性地促进TGF-β1表达。1 mmol/L Sr处理rBMSCs前2 h,给予TGF-β1抑制剂SB431542预处理,不仅可明显地抑制Sr对TGF-β1表达的上调作用,而且显著地减弱Sr对ALP活性及钙结节形成的促进作用。结论:Sr可通过上调TGF-β1表达促进rBMSCs向成骨细胞分化。 展开更多
关键词 雷奈酸锶 骨髓间充质干细胞 转化生长因子Β 成骨分化
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骨形态发生蛋白-7在雷奈酸锶促进骨髓间充质干细胞成骨分化过程中的作用 被引量：9
4
作者 李正 王瑒 +2 位作者 王小娜 兰爱平 吴文 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第11期1949-1953,共5页
目的探讨骨形态发生蛋白-7（BMP-7）在雷奈酸锶（Strontium ranelate,Sr）促进大鼠骨髓间充质干细胞（BMSCs）向成骨细胞分化中的作用。方法体外分离培养4周龄大鼠BMSCs,取第3~4代,用细胞碱性磷酸酶标法检测不同浓度Sr作用下碱性磷酸酶... 目的探讨骨形态发生蛋白-7（BMP-7）在雷奈酸锶（Strontium ranelate,Sr）促进大鼠骨髓间充质干细胞（BMSCs）向成骨细胞分化中的作用。方法体外分离培养4周龄大鼠BMSCs,取第3~4代,用细胞碱性磷酸酶标法检测不同浓度Sr作用下碱性磷酸酶（ALP）活性的表达;用茜素红染色法检测钙结节的表达;用Western blot测定BMP-7的表达水平。结果在0.1~3.0 mmol/L的浓度范围内,Sr呈浓度依赖性地增加ALP活性,其浓度为3 mmol/L时,ALP活性表达最高,并明显促进钙结节的表达;Sr（0.1~3.0 mmol/L）呈浓度依赖性地上调BMP-7表达,其中浓度为3 mmol/L时,BMP-7表达最高;BMP-7阻断剂（noggin）（100 ng/ml）不仅抑制Sr诱导的BMP-7表达,而且使ALP活性及钙结节的表达明显下降。结论 Sr可通过上调BMP-7表达促进BMSCs向成骨细胞分化。 展开更多
关键词 雷奈酸锶 骨髓间充质干细胞 成骨分化 骨形成蛋白-7 碱性磷酸酶 钙结节
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雷奈酸锶通过上调骨形态发生蛋白2的表达促进骨髓间充质干细胞分化为成骨细胞 被引量：15
5
作者 王瑒 李正 +2 位作者 王小娜 兰爱平 吴文 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第3期404-408,共5页
目的:探讨雷奈酸锶(strontium ranelate,Sr)是否可以通过上调骨形态发生蛋白2(bone morphogeneticprotein 2,BMP-2)的表达而促进大鼠骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)分化为成骨细胞。方法:对大鼠BMSCs进行... 目的:探讨雷奈酸锶(strontium ranelate,Sr)是否可以通过上调骨形态发生蛋白2(bone morphogeneticprotein 2,BMP-2)的表达而促进大鼠骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)分化为成骨细胞。方法:对大鼠BMSCs进行分离、纯化、培养及向成骨细胞的定向诱导分化,并在诱导培养时,根据实验目的加入不同浓度Sr以及BMP-2的拮抗剂noggin。用酶标法检测成骨细胞分化和功能成熟的早期标志物——碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)活性的变化,用茜素红染色检测细胞钙化水平,用Western blotting法检测BMP-2蛋白的表达水平。结果:应用0.1～7 mmol/L Sr处理细胞7 d均可使细胞ALP活性显著增加,其中浓度为3 mmol/L时效果最显著;应用3 mmol/L Sr处理细胞21 d可使细胞钙化结节明显增多;应用0.1～7 mmol/L Sr处理细胞7 d后细胞内BMP-2蛋白水平明显增高;在Sr处理BMSCs前,应用BMP-2拮抗剂noggin预处理细胞2 h不仅抑制Sr对BMP-2表达的上调作用,还拮抗Sr对ALP活性及钙化结节形成的促进作用。结论:上调BMP-2的表达可能是Sr促进大鼠BMSCs分化为成骨细胞的作用机制之一。 展开更多
关键词 雷奈酸锶 骨髓间充质干细胞 骨形态发生蛋白2 成骨细胞
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雷奈酸锶通过TGF-β_1/Smad通路促进骨髓间充质干细胞向成骨细胞分化 被引量：10
6
作者 黄晓丹 吕辉珍 +2 位作者 靳思思 郭润民 吴文 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第2期302-307,共6页
目的:研究转化生长因子β1(TGF-β1)/Smad通路在雷奈酸锶(strontium ranelate,Sr)促进大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)向成骨细胞分化中的作用。方法:在大鼠BMSCs向成骨细胞的诱导分化过程中,用Sr处理细胞,用Western blotting法检测磷酸化S... 目的:研究转化生长因子β1(TGF-β1)/Smad通路在雷奈酸锶(strontium ranelate,Sr)促进大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)向成骨细胞分化中的作用。方法:在大鼠BMSCs向成骨细胞的诱导分化过程中,用Sr处理细胞,用Western blotting法检测磷酸化Smad2(phosphorylated Smad2,p-Smad2)和Runx2的表达。用TGF-β1特异性阻断剂SB431542或Smad2小干扰RNA(Smad2-siRNA)预处理BMSCs后加入Sr,再观察p-Smad2和Runx2表达的改变。应用试剂盒检测碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)活性及钙结节水平。结果:在大鼠BMSCs向成骨细胞的诱导分化过程中,Sr可增加p-Smad2和Runx2的表达,Sr浓度为1 mmol/L、作用1 h时,p-Smad2表达最多;Sr浓度为1 mmol/L、作用5 d时,Runx2表达最多;用SB431542或Smad2-siRNA预处理BMSCs后再加入Sr,不仅可以抑制p-Smad2和Runx2的表达,且ALP活性与钙结节数量也受到明显的抑制。结论:Sr可通过TGF-β1/Smad通路促进大鼠BMSCs向成骨细胞分化。 展开更多
关键词 雷奈酸锶 骨髓间充质干细胞 转化生长因子Β Smad2蛋白 Runx2蛋白
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外源性硫化氢通过调控瘦素/瘦素受体通路抑制高糖诱导的人脐静脉内皮细胞损伤 被引量：4
7
作者 吴冬波 陈景福 +3 位作者 许庆 林佳琼 廖静秋 吴文 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第8期1055-1061,共7页
目的探讨外源性硫化氢（H2S）能否通过调控瘦素/瘦素受体（LEPR）通路抑制高糖引起的人脐静脉内皮细胞（HUVECs）损伤。方法 CCK-8法检测细胞存活率;Hoechst 33258核染色荧光显微镜照相检测凋亡细胞的形态学和数量改变;双氯荧光素（DCFH... 目的探讨外源性硫化氢（H2S）能否通过调控瘦素/瘦素受体（LEPR）通路抑制高糖引起的人脐静脉内皮细胞（HUVECs）损伤。方法 CCK-8法检测细胞存活率;Hoechst 33258核染色荧光显微镜照相检测凋亡细胞的形态学和数量改变;双氯荧光素（DCFH-DA）染色荧光显微镜照相法检测细胞内活性氧（ROS）水平;罗丹明123（Rh123）染色荧光显微镜照相法检测线粒体膜电位（MMP）水平;Western blotting法测定瘦素及瘦素受体蛋白的表达水平。结果应用40 mmol/L葡萄糖处理HUVECs 324 h可以明显上调瘦素、瘦素受体的表达水平,在高糖处理9 h时瘦素、瘦素受体的表达水平达到峰值;在高糖处理HUVECs前,400μmol/L硫氢化钠（NaHS,为H2S的供体）预处理30 min能明显抑制高糖对瘦素及瘦素受体表达的上调作用;400μmol/L NaHS预处理HUVECs 30 min、50 ng/m L瘦素拮抗剂（LA）预处理HUVECs 1 h均可明显抑制高糖引起的HUVECs损伤,使细胞存活率升高,细胞凋亡数量减少,胞内活性氧（ROS）堆积及MMP降低（P<0.01）。结论外源性H2S通过抑制瘦素/瘦素受体通路对抗高糖引起的HUVECs损伤。 展开更多
关键词 硫化氢 瘦素 瘦素受体 高糖 人脐静脉内皮细胞
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鳗鱼降钙素对老年男性骨质疏松患者的疗效及安全性研究 被引量：10
8
作者 张婷容 智喜梅 吴文 《中山大学学报（医学科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2009年第A03期199-201,共3页
【目的】探考鳗鱼降钙素治疗老年男性骨质疏松患者的疗效及安全性。【方法】原发性骨质疏松男性患者96例,随机分为对照组和治疗组。其中治疗51例,对照组45例,对照组每天口服钙剂片(钙尔奇D,每片含元素钙600mg,含维生素D125u);骨化三醇胶... 【目的】探考鳗鱼降钙素治疗老年男性骨质疏松患者的疗效及安全性。【方法】原发性骨质疏松男性患者96例,随机分为对照组和治疗组。其中治疗51例,对照组45例,对照组每天口服钙剂片(钙尔奇D,每片含元素钙600mg,含维生素D125u);骨化三醇胶丸1片,盖三淳0.25μg),治疗组在对照组基础上应用鳗鱼降钙素(益盖宁,20u),每周肌注一次,连续治疗6个月,在治疗前,后6个月分别测量腰椎(L2-4)及股骨颈骨密度(BMD)及骨代谢指标-骨钙素(BGP),I型胶原C端异构肽(β-CTX)、血清钙、磷、肝、肾功能、血尿常规,记录患者临床症状,应用SPSS13.0软件进行分析。【结果】治疗组2个月后骨痛改善率高于对照组(P<0.05);治疗6个月后治疗组在(L2-4)BMD、颈骨颈(BMD)较治疗前增高(P<0.05)、血清BGP稍增高(P>0.05),β-CTX下降明显(P<0.05);肝肾功能血、尿常规治疗前后两组无异常(P<0.05)。【结论】鳗鱼降钙素(益盖宁)联合基础治疗,对老年男性骨松患者能明显减轻疼痛,改善症状,增加骨密度,提高治疗依从性,是治疗老年骨质疏松疗效安全,值得推广的方法。 展开更多
关键词 鳗鱼降钙素 骨质疏松 骨密度 骨代谢指标
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