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不同盐度培养下海洋真菌Aspergillus unguis DLEP2008001生物活性及次生代谢组变化
1
作者 康晓博 张璟汐 +3 位作者 卢甜甜 刘亚月 周龙建 张翼 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第11期296-311,共16页
【目的】以一株海洋真菌爪曲霉Aspergillus unguis DLEP2008001为对象,研究不同盐度对其生物活性和次生代谢产物的影响。【方法】对不同盐度培养下该菌株第14天和第28天的固体和液体培养基发酵产物提取物,分别采用薄层层析和抗氧化、乙... 【目的】以一株海洋真菌爪曲霉Aspergillus unguis DLEP2008001为对象,研究不同盐度对其生物活性和次生代谢产物的影响。【方法】对不同盐度培养下该菌株第14天和第28天的固体和液体培养基发酵产物提取物,分别采用薄层层析和抗氧化、乙酰胆碱酯酶抑制及抗菌生物活性自显影手段,分析其活性次生代谢产物差异,将样品进一步采用高效液相色谱以及基于液相色谱串联质谱的“多途径辅助的特征分子网络”代谢组学分析手段,系统地研究不同盐度培养下A.unguis DLEP2008001次生代谢产物的多样性变化。【结果】盐度可以调节抗氧化、抑制乙酰胆碱酯酶以及抗菌活性成分的产量与多样性,采用海水马铃薯蔗糖液体培养基28 d培养时在35 g/L盐度下出现最为丰富的特征代谢产物,而大米固体培养基在5 g/L盐度下特征代谢产物最为丰富、35 g/L盐度下也较丰富,固体发酵优势代谢产物的平均分子量随着盐度上升而总体呈现下降趋势,该菌株在高盐条件下的优势代谢产物多为含多羟基、多氨基的小分子化合物,推测可能参与渗透压调节。【结论】提取物盐度对该爪曲霉菌株的生物活性及次生代谢产物有显著的影响。 展开更多
关键词 不同盐度 海洋真菌 分子网络 次生代谢产物 生物活性
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化学诱导对2株海洋真菌次级代谢产物及其生物活性的影响 被引量：2
2
作者 刘亚月 薛欣怡 +4 位作者 黎卓怡 马小翔 梁金月 胡雪琼 张翼 《广东海洋大学学报》 CAS 北大核心 2022年第1期50-58,共9页
【目的】以2株海洋真菌为研究对象,探究不同种类及浓度的化学表观遗传修饰剂对其次级代谢产物化学多样性和生物活性的影响。【方法】基于化学表观遗传修饰策略,采用两种不同的化学表观遗传修饰剂5-氮杂胞嘧啶核苷(5-azaC)和丁酸钠,分别... 【目的】以2株海洋真菌为研究对象,探究不同种类及浓度的化学表观遗传修饰剂对其次级代谢产物化学多样性和生物活性的影响。【方法】基于化学表观遗传修饰策略,采用两种不同的化学表观遗传修饰剂5-氮杂胞嘧啶核苷(5-azaC)和丁酸钠,分别对Penicillium sp.019和Aspergillus terreus ZN4-5-4两株海洋来源真菌进行表观遗传修饰。通过观察真菌在培养基中的生长状态变化,并根据薄层层析(TLC)指纹图谱、高效液相色谱(HPLC)图谱、乙酰胆碱酯酶(AChE)抑制、1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(1,1-Diphenyl-2-picryl-hydrazyl,DPPH)自由基清除和卤虫致死活性筛选模型等技术手段,从中筛选出代谢产物丰富、AChE抑制活性与抗氧化活性产物丰富且毒性小的发酵培养条件。【结果】添加1 mmol/mL的丁酸钠诱导剂可使菌株019和ZN4-5-4的次生代谢产物的种类增加,且同时能提高该菌株次级代谢产物的AChE的抑制活性和DPPH自由基清除活性。因此,确定菌株019和ZN4-5-4的最优发酵条件均是添加浓度为1 mmol/mL丁酸钠的PDB培养基。【结论】化学表观遗传修饰策略指导下,添加诱导剂5-azaC或者丁酸钠对2株海洋真菌次生代谢产物的产生有影响。 展开更多
关键词 海洋真菌 化学诱导 乙酰胆碱酯酶抑制活性 抗氧化 卤虫致死活性
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海洋真菌来源丁内酯I的单胺氧化酶抑制活性及结构类似物虚拟筛选 被引量：1
3
作者 杨煜 周龙建 +2 位作者 刘亚月 王远 张翼 《广东海洋大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第6期119-128,共10页
【目的】为研究海洋土曲霉(Aspergillus terreus)C23-3的次级代谢产物中的单胺氧化酶抑制剂及其抑制作用类型,借助计算机模拟方法探讨同类型化合物对单胺氧化酶的潜在抑制活性及构效关系,以开发单胺氧化酶抑制剂。【方法】采用活性引导... 【目的】为研究海洋土曲霉(Aspergillus terreus)C23-3的次级代谢产物中的单胺氧化酶抑制剂及其抑制作用类型,借助计算机模拟方法探讨同类型化合物对单胺氧化酶的潜在抑制活性及构效关系,以开发单胺氧化酶抑制剂。【方法】采用活性引导下的色谱方法分离纯化得到活性化合物,采用核磁共振、质谱、圆二色谱分析鉴定其结构,采用酶标比色法评价化合物对单胺氧化酶抑制作用。使用Autodock vina对其结构类似物进行抑制单胺氧化酶活性虚拟筛选。【结果】1)分离鉴定得到一个具有单胺氧化酶抑制活性的化合物丁内酯I;2)丁内酯I对单胺氧化酶A和单胺氧化酶B的抑制作用为可逆非竞争性抑制,对单胺氧化酶A的半抑制浓度(IC50)为21.45μmol/L,抑制常数Ki=6.27μmol/L;对单胺氧化酶B的IC50为24.16μmol/L,Ki=12.61μmol/L;3)分子对接显示丁内酯I可与单胺氧化酶形成多个氢键,五元内酯环为α,γ‒二芳基取代、含有苯并吡喃或苯并呋喃基团的aspvinone类丁内酯化合物在虚拟筛选中对单胺氧化酶最小结合亲和力得分更低(即结合力更强)。【结论】丁内酯I是可逆的单胺氧化酶抑制剂,对单胺氧化酶的抑制为非竞争性抑制。真菌来源丁内酯类化合物可作为单胺氧化酶抑制剂的新来源。 展开更多
关键词 海洋真菌 次级代谢产物 单胺氧化酶 抑制类型 虚拟筛选
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糙海参极性脂的提取和神经保护活性
4
作者 熊仕洪 张翼 +4 位作者 赵佳文 周龙建 刘亚月 杨志友 张永平 《广东海洋大学学报》 北大核心 2025年第1期94-105,共12页
【目的】研究糙海参(Holothuria scabra)极性脂的抗阿尔茨海默氏症作用。【方法】采用8种总脂提取方法结合冷丙酮抽提制备海参极性脂,计算不同方法下的极性脂得率,并通过高效液相色谱分析比较所制备极性脂的指纹图谱,采用薄层层析-磷钼... 【目的】研究糙海参(Holothuria scabra)极性脂的抗阿尔茨海默氏症作用。【方法】采用8种总脂提取方法结合冷丙酮抽提制备海参极性脂,计算不同方法下的极性脂得率,并通过高效液相色谱分析比较所制备极性脂的指纹图谱,采用薄层层析-磷钼酸显色法和基于液质联用的脂质组注释分析其成分,对通过优选提取方法得到的总极性脂,采用DPPH自由基清除法、乙酰胆碱酯酶抑制活性测试、LPS诱导的小胶质细胞(BV-2)神经炎症模型、Aβ_(25-35)诱导的小鼠海马神经元(HT-22)损伤模型等指标,综合评价糙海参极性脂的抗阿尔茨海默氏症潜力。【结果】1)在8种不同的总脂提取方法中,Bligh&Dyer法既有较高的最终极性脂得率(1.25%),且提取的极性脂成分多样,并在同等效果下氯仿消耗量最低,该方法在极性脂提取上综合表现最佳;2)薄层层析-磷钼酸显色实验显示该极性脂中含有磷脂类成分,脂质组分析显示其含有丰富的磷脂、鞘脂、甘油脂、脂肪酸、N-磺甲基酰胺和未知脂类等成分;3)糙海参极性脂表现出较好的DPPH自由基清除活性[半数清除质量浓度(217.13±2.34)μg/mL]、乙酰胆碱酯酶抑制活性[半抑制质量浓度(30.39±1.48)μg/mL]、抑制LPS诱导的BV-2细胞中NO生成活性(1μg/mL剂量下抑制率为48.88%),以及对Aβ_(25-35)诱导的HT-22神经元损伤的治疗性、预防性保护作用和清除胞内活性氧的作用(40μg/mL剂量下)。【结论】糙海参极性脂具有较好的多靶向抗阿尔茨海默氏症体外活性,作为相关功能食品和药物具备进一步研究开发的价值。 展开更多
关键词 糙海参 极性脂 提取 阿尔茨海默氏症 神经保护
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石珊瑚共附生真菌次级代谢产物的抗炎活性及化学多样性研究 被引量：1
5
作者 廖清楠 周龙建 +5 位作者 杨志友 冯昀铠 黄谊君 胡雪琼 张翼 刘亚月 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第12期261-275,共15页
以石珊瑚共附生真菌为研究对象,探究不同培养条件对其次级代谢产物抗炎活性和化学多样性的影响。基于OSMAC(one stain many compounds)策略,分别选用马铃薯葡萄糖水(potato dextrose broth,PDB)和糙米培养基,并设置3种盐度(0.3%、3.0%和... 以石珊瑚共附生真菌为研究对象,探究不同培养条件对其次级代谢产物抗炎活性和化学多样性的影响。基于OSMAC(one stain many compounds)策略,分别选用马铃薯葡萄糖水(potato dextrose broth,PDB)和糙米培养基,并设置3种盐度(0.3%、3.0%和10.0%),对31株石珊瑚来源共附生真菌进行小规模发酵培养。以脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导的BV-2小胶质细胞为炎症模型,从中筛选出具有抗炎活性的菌株;并通过薄层色谱法(thin-layer chromatography,TLC)指纹图谱、超高效液相色谱-四极杆飞行时间质谱法(ultra-performance liquid chromatography quadrupole time-of-flight mass spectrometry,UPLC-QTOF-MS)以及基于特征的分子网络(feature-based molecular networking,FBMN)等技术手段进一步分析抗炎活性菌株次级代谢产物的化学多样性。结果表明,5株菌株在糙米培养基条件下表现出显著的抗炎活性,对LPS诱导的BV-2细胞中一氧化氮(nitric oxide,NO)的释放显示中等或强的抑制活性,且呈现显著的浓度剂量依赖性。而菌株C3-9粗提物在10和20μg/mL的低浓度条件下也表现出了显著的抑制NO产生的作用,进一步的TLC和FBMN分析显示菌株C3-9的次级代谢产物中含有丰富的抗炎活性化合物,且具有高度的多样性。石珊瑚共附生真菌C3-9次级代谢产物具有显著的抗炎活性和多样性,为后续抗炎活性化合物的发现提供了基础。 展开更多
关键词 石珊瑚 共附生真菌 OSMAC 抗炎活性 化学多样性
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一株内生真菌 Talaromyces sp.次级代谢产物及其活性 被引量：1
6
作者 薛欣怡 张翼 +3 位作者 冯昀铠 廖清楠 胡雪琼 刘亚月 《广西植物》 CAS CSCD 北大核心 2022年第9期1487-1497,共11页
为了研究红树杨叶肖槿来源内生真菌Talaromyces sp.YX-001的次级代谢产物及其乙酰胆碱酯酶(acetylcholinesterase,AChE)抑制活性,该文运用硅胶柱层析和HPLC等手段从菌株YX-001的PDB培养基发酵提取物中分离得到单体化合物,而后结合1/2D ... 为了研究红树杨叶肖槿来源内生真菌Talaromyces sp.YX-001的次级代谢产物及其乙酰胆碱酯酶(acetylcholinesterase,AChE)抑制活性,该文运用硅胶柱层析和HPLC等手段从菌株YX-001的PDB培养基发酵提取物中分离得到单体化合物,而后结合1/2D NMR和MS等现代波谱技术并与文献数据对比鉴定其结构,最后通过比色法测定各单体化合物的AChE抑制活性。结果表明:(1)共分离得到9个单体化合物,分别为asterrelenin(1),aszonalenin(2),cladosporisteroid C(3),sitosterol(4),ergosterol(5),cyclo-Ile-Pro-diketopiperazine(6),cyclo(-Pro-Val)(7),4-methoxy-2-methylisoquinolin-1-one(8)和allantoin(9)。(2)其中化合物1和2显示出一定的AChE抑制活性,IC_(50)值分别为81.5、105.8μmol·L^(-1)。该文首次对杨叶肖槿来源内生真菌次级代谢产物及其AChE抑制活性进行了研究,为后续红树植物杨叶肖槿来源内生真菌资源的开发与再利用奠定了基础。 展开更多
关键词 杨叶肖槿 红树内生真菌 次级代谢产物 AChE抑制活性 海洋天然产物
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基于质谱的分子网络分析化学调控对土曲霉C23-3次生代谢产物及生物活性的影响 被引量：11
7
作者 马小翔 刘亚月 +5 位作者 聂影影 黎燕媚 王远 薛欣怡 洪鹏志 张翼 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第8期95-110,共16页
以一株高产丁内酯Ⅰ的海洋来源土曲霉C23-3作为出发菌株,筛选出可获得更丰富次生代谢产物的化学调控培养条件。利用2种基础培养基分别添加9种小分子化合物,对菌株进行24孔板上的化学调控培养,在菌丝体形态变化和薄层层析生物活性自显影... 以一株高产丁内酯Ⅰ的海洋来源土曲霉C23-3作为出发菌株,筛选出可获得更丰富次生代谢产物的化学调控培养条件。利用2种基础培养基分别添加9种小分子化合物,对菌株进行24孔板上的化学调控培养,在菌丝体形态变化和薄层层析生物活性自显影基础上,运用液相色谱-串联质谱法以及基于质谱的分子网络进一步分析次生代谢产物的产量和多样性。在糙米培养基中分别加入金合欢醇(1 μmol/L)、法尼焦磷酸铵盐(FPP,5 μmol/L)、亚硫酸氢钠甲萘醌(MSB,10 μmol/L)、3-氨基-L-酪氨酸(1 mmol/L)等4种诱导条件均可调控菌株C23-3次级代谢产物发生较明显变化,其丁内酯、土震素和洛伐他汀类化合物的多样性和产量较为突出。菌株C23-3经化学调控后的次生代谢产物产生了不同程度的变化,为活性化合物的发现提供了基础。 展开更多
关键词 海洋真菌 化学调控 丁内酯 LC-MS/MS 分子网络
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添加前体对2株真菌次级代谢产物及其生物活性的影响 被引量：1
8
作者 薛欣怡 张翼 +3 位作者 廖清楠 冯昀铠 胡雪琼 刘亚月 《广西科学》 CAS 北大核心 2022年第5期854-862,共9页
为探究添加前体物质对红树植物杨叶肖槿(Thespesia populnea)来源内生真菌Talaromyces sp.YX-001和Penicillium sp.YX-002次级代谢产物及其生物活性的影响,选取马铃薯葡萄糖液体(Potato Dextrose Broth,PDB)培养基和察氏(Czapek′s)培养... 为探究添加前体物质对红树植物杨叶肖槿(Thespesia populnea)来源内生真菌Talaromyces sp.YX-001和Penicillium sp.YX-002次级代谢产物及其生物活性的影响,选取马铃薯葡萄糖液体(Potato Dextrose Broth,PDB)培养基和察氏(Czapek′s)培养基,分别在其中添加2种前体物质(甲戊二羟酸和酪氨酸),采用12孔板对菌株进行微量发酵培养。通过分析菌株次级代谢产物的产量、HPLC指纹图谱、乙酰胆碱酯酶(AChE)抑制活性、1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH)自由基清除活性和卤虫致死活性,探究添加前体物质前后菌株次级代谢产物的化学多样性和生物活性的变化情况。结果表明:添加2种前体物质均可使菌株次级代谢产物的产量和化学多样性增加,但生物活性的变化有所不同。酸性环境可能会促进菌株中具有较好DPPH自由基清除活性的次级代谢产物的合成,但其具体机制还有待进一步研究。本研究为深入研究杨叶肖槿内生真菌Talaromyces sp.YX-001和Penicillium sp.YX-002的次级代谢产物奠定了基础。 展开更多
关键词 前体物质 杨叶肖槿 TALAROMYCES sp. PENICILLIUM sp. 次级代谢产物
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羊栖菜抑制乙酰胆碱酯酶活性油脂成分的提取优化 被引量：1
9
作者 黎燕媚 聂影影 +6 位作者 刘亚月 周龙建 宋采 洪鹏志 张永平 胡雪琼 张翼 《广东海洋大学学报》 CAS 北大核心 2022年第3期97-106,共10页
【目的】建立药食同源海藻羊栖菜抑制乙酰胆碱酯酶(Acetylcholinesterase,AChE)活性油脂成分的优化提取工艺,探明其主要活性组分的具体化学成分。【方法】以提取物质量浓度1 mg/mL下的乙酰胆碱酯酶抑制率×提取物质量为指标,比较各... 【目的】建立药食同源海藻羊栖菜抑制乙酰胆碱酯酶(Acetylcholinesterase,AChE)活性油脂成分的优化提取工艺,探明其主要活性组分的具体化学成分。【方法】以提取物质量浓度1 mg/mL下的乙酰胆碱酯酶抑制率×提取物质量为指标,比较各个溶剂比、料液质量体积比、超声时间和提取次数等四个单因素水平下的抑制AChE活性成分提取效果,确定各个单因素中的最优水平范围,进而设计正交实验优化提取工艺条件;按最优提取工艺条件下提取制备粗浸膏,运用硅胶柱色谱法、薄层层析等方法对粗浸膏进行分离纯化并追踪其活性组分,运用气相色谱-质谱联用GC-MS进行成分分离与鉴定。【结果】羊栖菜抑制AChE活性成分的最优提取条件为:溶剂乙酸乙酯、石油醚体积比为5∶5,料液质量(g)体积(mL)比为1∶10,超声时间30 min,提取次数3次。此条件下对应的提取物质量浓度1 mg/mL下乙酰胆碱酯酶抑制率(%)×提取物质量(g)的值为7.078±1.038。从该粗提物中分离得到两个具有抑制AChE活性的组分Fr2和Fr3,主要成分为花生四烯酸、亚油酸、油酸等脂肪酸,Fr3还含有十四烷等多种烷烃。其抑制IC_(50)值分别为2.69 mg/mL和5.31 mg/mL。【结论】本研究确定的基于石油醚-乙酸乙酯混合溶剂的超声提取工艺可得到较高产量的羊栖菜抑制AChE活性成分,其主要成分为脂肪酸,可能在改善记忆方面具有一定应用价值。 展开更多
关键词 羊栖菜 正交实验 阿尔茨海默症 抑制乙酰胆碱酯酶活性 脂肪酸
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