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基于pyrF的乳酸乳球菌食品级表达载体的构建: 1; 作者王帅邓木兰 +6 位作者梁志成周泓宇何少媚张智穆云萍李芳红赵子建《食品工业科技》 CAS 北大核心 2024年第9期124-130,共7页; 基于pyrF筛选标记和来源于乳酸乳球菌(Lactococcus lactis,L.lactis)的基因组DNA为表达元件,构建L.lactis食品级表达载体,用于食品和药用多肽的表达和生产。首先,利用NZ3900 pyrF基因列构建同源重组突变盒,构建NZ3900 ΔpyrF突变株;然后... 展开更多; 关键词 pyrF 乳酸乳球菌食品级表达载体筛选标记绿色荧光蛋白; 在线阅读下载PDF 职称材料

野百合碱诱导肺动脉高压大鼠右心室脂肪酸代谢紊乱的机制被引量：2: 2; 作者韩婷权磊 +3 位作者胡婷婷刘青张宝谭文《山东医药》 CAS 北大核心 2017年第33期29-31,共3页; 目的观察野百合碱诱导的肺动脉高压大鼠右心室CD36、过氧化物酶体增殖剂激活受体α(PPARα)、过氧化物酶体增殖剂激活受体γ(PPARγ)的表达情况,探讨肺动脉高压大鼠右心室脂肪酸代谢紊乱的机制。方法24只大鼠随机分成对照组10只和观察... 展开更多; 关键词肺动脉高压右心室脂肪酸代谢紊乱野百合碱 CD36 过氧化物酶体增殖剂激活受体α 过氧化物酶体增殖剂激活受体γ; 在线阅读下载PDF 职称材料

缺血再灌注对大鼠心肌H9c2细胞活性、凋亡的影响及其机制被引量：2: 3; 作者杨莹莹孙晓鸥谭文《山东医药》 CAS 北大核心 2016年第39期16-19,共4页; 目的观察缺血再灌注对大鼠H9c2心肌细胞活性、凋亡的影响,并探讨其作用机制。方法 H9c2细胞分为A、B组,1×10~4/孔接种于96孔板,每组6个复孔。细胞贴壁生长24 h时B组吸弃原培养基,加入人工缺氧液100μL,置于含94%N_2、1%O_2、5%CO_... 展开更多; 关键词缺血再灌注 H9C2心肌细胞细胞活性细胞凋亡活性氧簇线粒体膜电位热休克蛋白60 过氧化物氧化还原酶硫氧还原蛋白线粒体分裂蛋白; 在线阅读下载PDF 职称材料

CRP基因沉默后心肌细胞系H9c2的miR-21及其靶基因表达、细胞活力观察被引量：3: 4; 作者程玲慧余丽霞 +2 位作者叶凤英权磊谭文《山东医药》 CAS 2018年第40期1-5,共5页; 目的观察沉默炎症因子CRP基因对H9c2心肌细胞活力的影响,并探讨其机制。方法 (1)取H9c2心肌细胞,随机分为CRP沉默组和对照组。CRP沉默组转染对CRP特异性沉默的p LV-shRNA-CRP慢病毒,对照组转染无敲减作用的p LV-shRNA-Scramble慢病毒。... 展开更多; 关键词缺血性心脏病心肌细胞微小RNA-21 PDCD4基因 PTEN基因 Spry1基因基因沉默 C反应蛋白; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名基于pyrF的乳酸乳球菌食品级表达载体的构建: 1; 作者王帅邓木兰梁志成周泓宇何少媚张智穆云萍李芳红赵子建; 机构广东工业大学生物医药研究院华南理工大学医学院深圳大学生命与海洋科学学院; 出处《食品工业科技》 CAS 北大核心 2024年第9期124-130,共7页; 基金国家重点研发计划项目(2018YFA0800603) 国家自然科学基金青年项目(82100064) +1 种基金广东省重点领域研发计划项目(2019B020201015)。; 文摘基于pyrF筛选标记和来源于乳酸乳球菌(Lactococcus lactis,L.lactis)的基因组DNA为表达元件,构建L.lactis食品级表达载体,用于食品和药用多肽的表达和生产。首先,利用NZ3900 pyrF基因列构建同源重组突变盒,构建NZ3900 ΔpyrF突变株;然后,分别以来源于L.lactis的repA和repC基因为复制元件、pyrF基因为筛选标记、P_(32)和P_(8)为启动子、以及Tusp_(45)和TpepN为终止子,构建食品级表达质粒pLD;最后以绿色荧光蛋白ZsGreen为报告基因,验证ZsGreen在NZ3900 ΔpyrF突变株的表达及pLD-ZsG的遗传稳定性。实验结果表明,原养型ZsGreen阳性转化子可在普通Elliker培养基中正常生长,在荧光显微镜下观察到明显的绿色荧光信号;此外,PCR和Western blotting也证实ZsGreen能在NZ3900中表达且能稳定传代至30代,说明pLD食品级表达载体构建成功且使得外源蛋白在L.lactis中稳定表达。综上所述,基于pyrF营养缺陷型标记构建的L.lactis食品级表达载体的方法切实可行,可为推动L.lactis在食品和药用多肽生产中的应用提供研究基础。; 关键词 pyrF 乳酸乳球菌食品级表达载体筛选标记绿色荧光蛋白; Keywords pyrF Lactococcus lactis food-grade expression vector selective marker green fluorescent protein; 分类号 TS201.3 [轻工技术与工程—食品科学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名野百合碱诱导肺动脉高压大鼠右心室脂肪酸代谢紊乱的机制被引量：2: 2; 作者韩婷权磊胡婷婷刘青张宝谭文; 机构华南理工大学生物科学与工程学院广东工业大学生物医药研究院; 出处《山东医药》 CAS 北大核心 2017年第33期29-31,共3页; 文摘目的观察野百合碱诱导的肺动脉高压大鼠右心室CD36、过氧化物酶体增殖剂激活受体α(PPARα)、过氧化物酶体增殖剂激活受体γ(PPARγ)的表达情况,探讨肺动脉高压大鼠右心室脂肪酸代谢紊乱的机制。方法24只大鼠随机分成对照组10只和观察组14只。观察组通过一次性腹腔注射60 mg/kg野百合碱来建立肺动脉高压模型,对照组腹腔注射相同剂量的生理盐水。4周时通过右心导管法测定大鼠的平均右心室压(mRVP)以及右心室收缩压(RVSP);称量右心室(RV)、左心室+室间隔(LV+S)的质量,计算右心肥厚指数[RV/(LV+S)];采用实时荧光定量PCR方法检测右心室CD36、PPARα、PPARγ的mRNA表达的变化。结果 4周时,观察组mRVP和RVSP高于对照组(P均<0.05),肺动脉高压模型建立成功。对照组右心室心肌肥厚指数、心肌细胞横截面积分别为0.20±0.02、(290.32±28.16)μm2,观察组分别为0.40±0.07、(187.92±21.15)μm2,两组比较差异有统计学意义(P均<0.05)。对照组右心室CD36、PPARα、PPARγmRNA相对表达量分别为1.00±0.00、1.00±0.00、1.00±0.00,观察组分别为1.26±0.08、0.71±0.06、0.48±0.09,观察组右心室CD36表达量高于对照组,PPARα、PPARγ的表达量低于对照组(P均<0.05)。结论野百合碱诱导的肺动脉高压大鼠右心室CD36的表达增加和PPARα、PPARγ表达减少,导致右心室脂肪酸利用水平降低,形成脂毒性,引起右心室功能紊乱。; 关键词肺动脉高压右心室脂肪酸代谢紊乱野百合碱 CD36 过氧化物酶体增殖剂激活受体α 过氧化物酶体增殖剂激活受体γ; 分类号 R543.2 [医药卫生—心血管疾病]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名缺血再灌注对大鼠心肌H9c2细胞活性、凋亡的影响及其机制被引量：2: 3; 作者杨莹莹孙晓鸥谭文; 机构华南理工大学生物科学与工程学院广东工业大学生物医药研究院; 出处《山东医药》 CAS 北大核心 2016年第39期16-19,共4页; 基金华南理工大学自然科学基金资助项目(D2154630); 文摘目的观察缺血再灌注对大鼠H9c2心肌细胞活性、凋亡的影响,并探讨其作用机制。方法 H9c2细胞分为A、B组,1×10~4/孔接种于96孔板,每组6个复孔。细胞贴壁生长24 h时B组吸弃原培养基,加入人工缺氧液100μL,置于含94%N_2、1%O_2、5%CO_2的三气培养箱中培养90 min;吸弃缺氧液,加入DMEM高糖培养基,置于正常培养箱中培养90 min备用。A组仅加入DMEM高糖培养基,置于正常培养箱中培养90 min备用。采用MTT法检测细胞活性,TUNEL法检测凋亡细胞,采用激光共聚焦显微镜观察并计算两组细胞活性氧簇（ROS）含量及线粒体膜电位（MMP）,采用Western blotting法检测心肌细胞热休克蛋白60（HSP60）、过氧化物氧化还原酶（Prx）、硫氧还原蛋白（Trx）、线粒体分裂蛋白（Fis1）。结果 A、B组心肌细胞活性分别为0.77±0.01、0.40±0.02,二者比较,P〈0.05。A、B组心肌细胞凋亡率分别为2.24%±0.12%、41.78%±1.43%,二者比较,P〈0.05。A组细胞ROS含量及MMP分别为0.58%±0.02%、1.12%±0.05%,B组分别为1.13%±0.05%、0.76%±0.01%,组间比较,P均〈0.05。与B组相比,A组心肌细胞HSP60、Fis1蛋白表达升高,Prx2、Trx1蛋白表达降低,P均〈0.05。结论缺血再灌注后H9c2细胞出现细胞活性下降、细胞凋亡,其机制可能与缺血再灌注促进细胞HSP60、Fis1蛋白表达,抑制Prx2、Trx1蛋白表达有关。; 关键词缺血再灌注 H9C2心肌细胞细胞活性细胞凋亡活性氧簇线粒体膜电位热休克蛋白60 过氧化物氧化还原酶硫氧还原蛋白线粒体分裂蛋白; Keywords ischemia reperfusion H9c2 cardiomyocytes cell viability apoptosis reactive oxygen species mitochondrial membrane potential heat shock protein 60 peroxiredoxin thioredoxin mitochondrial fission protein; 分类号 R965 [医药卫生—药理学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名CRP基因沉默后心肌细胞系H9c2的miR-21及其靶基因表达、细胞活力观察被引量：3: 4; 作者程玲慧余丽霞叶凤英权磊谭文; 机构华南理工大学生物科学与工程学院华南理工大学医学院广东工业大学生物医药研究院; 出处《山东医药》 CAS 2018年第40期1-5,共5页; 基金广东省自然科学基金资助项目(22016A030313467) 广东省社会发展领域新药创制重大项目(2014B020210001); 文摘目的观察沉默炎症因子CRP基因对H9c2心肌细胞活力的影响,并探讨其机制。方法 (1)取H9c2心肌细胞,随机分为CRP沉默组和对照组。CRP沉默组转染对CRP特异性沉默的p LV-shRNA-CRP慢病毒,对照组转染无敲减作用的p LV-shRNA-Scramble慢病毒。筛选与鉴定慢病毒载体成功转染H9c2心肌细胞。转染48 h后,采用实时定量PCR法观察两组H9c2心肌细胞CRP基因的沉默效率、miR-21及PDCD4、PTEN、Spry1 mRNA。(2)取H9c2心肌细胞,随机分为空白组、对照组和CRP沉默组,空白组不转染病毒加入等量的DMEM培养基,对照组转染p LV-shRNA-Scramble慢病毒颗粒,CRP沉默组转染p LV-shRNA-CRP慢病毒颗粒。转染24 h后,采用MTT法检测三组H9c2心肌细胞活力。结果 (1)CRP沉默组和对照组H9c2心肌细胞中CRP mRNA相对表达量分别为0. 320±0. 069、1±0. 090,miR-21相对表达量分别为0. 740±0. 099、0. 280±0. 010,两组相比P均<0. 01。CRP沉默组PDCD4、PTEN和Spry1 mRNA表达均低于对照组(P均<0. 01)。(2)CRP沉默组、对照组和空白组细胞活力分别为0. 78±0. 030、0. 66±0. 010、1. 00±0. 013;与空白组相比,CRP沉默组和对照组细胞活力均下降(P均<0. 01);与对照组相比,CRP沉默组细胞活力上升(P <0. 05)。结论沉默CRP基因可促进H9c2心肌细胞存活,这可能与其可增加H9c2心肌细胞中miR-21表达,抑制PDCD4、PTEN和Spry1的基因表达有关。; 关键词缺血性心脏病心肌细胞微小RNA-21 PDCD4基因 PTEN基因 Spry1基因基因沉默 C反应蛋白; Keywords ischemic heart disease cardiomyocytes microRNA-21 PDCD4 gene PTEN gene Spry1 gene gene silencing C-reactive protein; 分类号 R541 [医药卫生—心血管疾病]; 在线阅读下载PDF 职称材料

	题名	作者	出处	发文年	被引量	操作
1	基于pyrF的乳酸乳球菌食品级表达载体的构建	王帅邓木兰梁志成周泓宇何少媚张智穆云萍李芳红赵子建	《食品工业科技》 CAS 北大核心	2024	0	在线阅读下载PDF 职称材料
2	野百合碱诱导肺动脉高压大鼠右心室脂肪酸代谢紊乱的机制	韩婷权磊胡婷婷刘青张宝谭文	《山东医药》 CAS 北大核心	2017	2	在线阅读下载PDF 职称材料
3	缺血再灌注对大鼠心肌H9c2细胞活性、凋亡的影响及其机制	杨莹莹孙晓鸥谭文	《山东医药》 CAS 北大核心	2016	2	在线阅读下载PDF 职称材料
4	CRP基因沉默后心肌细胞系H9c2的miR-21及其靶基因表达、细胞活力观察	程玲慧余丽霞叶凤英权磊谭文	《山东医药》 CAS	2018	3	在线阅读下载PDF 职称材料