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孕哺期维生素D补充对子代大鼠软骨内成骨过程及mTOR通路的影响
1
作者
邱小菊
邓姗
+1 位作者
陈胜如
苏小锋
《中国骨质疏松杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2024年第11期1605-1611,共7页
目的探究孕哺期维生素D(VD)补充对子代大鼠软骨内成骨过程及哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)通路的影响。方法24只雌性Wistar大鼠与12只雄性大鼠合笼后,随机分为对照组(Control组)、VD低剂量组(VD-Low组)、VD高剂量组(VD-High组)和mTOR抑...
目的探究孕哺期维生素D(VD)补充对子代大鼠软骨内成骨过程及哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)通路的影响。方法24只雌性Wistar大鼠与12只雄性大鼠合笼后,随机分为对照组(Control组)、VD低剂量组(VD-Low组)、VD高剂量组(VD-High组)和mTOR抑制剂雷帕霉素组(RAPA组),每组各6只。孕哺期[妊娠第0天(GD 0)到子鼠出生后第21天(PND 21)]给予相应的VD(10、20 ng/kg)和雷帕霉素(1 mg/kg)。子鼠喂养4周后,测量子鼠体重和体长;分离子鼠胫骨并进行micro-CT扫描和重建;全身及局部骨架染色观察子鼠骨骼发育;HE染色观察胫骨生长板软骨细胞形态;免疫组化染色检测胫骨组织中软骨细胞增殖相关蛋白[Ki67、增殖细胞核抗原(PCNA)]、分化相关蛋白[Ⅱ型胶原α1链(Col2A1)、性别决定区Y框转录因子9(SOX9)]、肥大相关蛋白[X型胶原α1链(Col10A1)、基质金属蛋白酶13(MMP-13)、骨桥蛋白(OPN)]、成骨相关蛋白[Ⅰ型胶原(ColⅠ)、骨钙素(OCN)、碱性磷酸酶(ALP)]水平;RT-qPCR检测胫骨组织中mTOR通路相关mRNA[mTOR、p70S6核糖体蛋白激酶(p70S6K)、elF4E-结合蛋白1(4E-BP1)]水平;Western blot检测胫骨组织中mTOR通路相关蛋白(mTOR、p-mTOR、p70S6K、p-p70S6K、4E-BP1、p-4E-BP1)及自噬相关蛋白[微管相关蛋白1轻链3(LC3)、Beclin1、p62]水平。结果与Control组相比,VD-Low组、VD-High组、RAPA组子鼠体重、体长增加;胫骨组织骨小梁厚度(Tb.Th)增大;胫骨组织生长板软骨细胞排列整齐,生长板厚度、增殖区和肥大区厚度均增加;胫骨组织中Ki67、PCNA、Col2A1、SOX9、Col10A1、MMP-13、OPN、Col I、OCN、ALP、LC3Ⅱ/Ⅰ、Beclin1蛋白水平升高,mTOR、p70S6K、4E-BP1 mRNA水平、p62、p-mTOR/mTOR、p-p70S6K/p70S6K、p-4E-BP1/4E-BP1蛋白水平降低(P均<0.05);且呈VD剂量依赖性(P均<0.05)。结论孕哺期VD补充能够促进子鼠软骨内成骨,其可能通过抑制mTOR信号通路,并激活自噬发挥作用。
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关键词
维生素D
软骨内成骨
雷帕霉素靶蛋白
信号通路
自噬
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题名
孕哺期维生素D补充对子代大鼠软骨内成骨过程及mTOR通路的影响
1
作者
邱小菊
邓姗
陈胜如
苏小锋
机构
广东
医科
大学
附属
第二
医院
产科
广东医科大学附属第二医院妇科
出处
《中国骨质疏松杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2024年第11期1605-1611,共7页
文摘
目的探究孕哺期维生素D(VD)补充对子代大鼠软骨内成骨过程及哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)通路的影响。方法24只雌性Wistar大鼠与12只雄性大鼠合笼后,随机分为对照组(Control组)、VD低剂量组(VD-Low组)、VD高剂量组(VD-High组)和mTOR抑制剂雷帕霉素组(RAPA组),每组各6只。孕哺期[妊娠第0天(GD 0)到子鼠出生后第21天(PND 21)]给予相应的VD(10、20 ng/kg)和雷帕霉素(1 mg/kg)。子鼠喂养4周后,测量子鼠体重和体长;分离子鼠胫骨并进行micro-CT扫描和重建;全身及局部骨架染色观察子鼠骨骼发育;HE染色观察胫骨生长板软骨细胞形态;免疫组化染色检测胫骨组织中软骨细胞增殖相关蛋白[Ki67、增殖细胞核抗原(PCNA)]、分化相关蛋白[Ⅱ型胶原α1链(Col2A1)、性别决定区Y框转录因子9(SOX9)]、肥大相关蛋白[X型胶原α1链(Col10A1)、基质金属蛋白酶13(MMP-13)、骨桥蛋白(OPN)]、成骨相关蛋白[Ⅰ型胶原(ColⅠ)、骨钙素(OCN)、碱性磷酸酶(ALP)]水平;RT-qPCR检测胫骨组织中mTOR通路相关mRNA[mTOR、p70S6核糖体蛋白激酶(p70S6K)、elF4E-结合蛋白1(4E-BP1)]水平;Western blot检测胫骨组织中mTOR通路相关蛋白(mTOR、p-mTOR、p70S6K、p-p70S6K、4E-BP1、p-4E-BP1)及自噬相关蛋白[微管相关蛋白1轻链3(LC3)、Beclin1、p62]水平。结果与Control组相比,VD-Low组、VD-High组、RAPA组子鼠体重、体长增加;胫骨组织骨小梁厚度(Tb.Th)增大;胫骨组织生长板软骨细胞排列整齐,生长板厚度、增殖区和肥大区厚度均增加;胫骨组织中Ki67、PCNA、Col2A1、SOX9、Col10A1、MMP-13、OPN、Col I、OCN、ALP、LC3Ⅱ/Ⅰ、Beclin1蛋白水平升高,mTOR、p70S6K、4E-BP1 mRNA水平、p62、p-mTOR/mTOR、p-p70S6K/p70S6K、p-4E-BP1/4E-BP1蛋白水平降低(P均<0.05);且呈VD剂量依赖性(P均<0.05)。结论孕哺期VD补充能够促进子鼠软骨内成骨,其可能通过抑制mTOR信号通路,并激活自噬发挥作用。
关键词
维生素D
软骨内成骨
雷帕霉素靶蛋白
信号通路
自噬
Keywords
Vitamin D
intrachondral osteogenesis
mechanistic target of rapamycin
signaling pathway
autophagy
分类号
R68 [医药卫生—骨科学]
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1
孕哺期维生素D补充对子代大鼠软骨内成骨过程及mTOR通路的影响
邱小菊
邓姗
陈胜如
苏小锋
《中国骨质疏松杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2024
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