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自噬通过下调ATF6通路抑制促炎型巨噬细胞活化 被引量:1
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作者 李慧媛 黄小荣 +2 位作者 黄丽凤 杨陈 安宁 《中国免疫学杂志》 北大核心 2025年第4期861-866,共6页
目的:揭示自噬抑制促炎型巨噬细胞过度活化的可能分子机制。方法:利用LysM-Cre小鼠和Atg5^(flox/+)小鼠繁殖巨噬细胞自噬缺陷小鼠(Atg5^(△mye))。使用巨噬细胞集落刺激因子诱导小鼠骨髓细胞分化为骨髓源性巨噬细胞(BMDMs)。使用不同浓... 目的:揭示自噬抑制促炎型巨噬细胞过度活化的可能分子机制。方法:利用LysM-Cre小鼠和Atg5^(flox/+)小鼠繁殖巨噬细胞自噬缺陷小鼠(Atg5^(△mye))。使用巨噬细胞集落刺激因子诱导小鼠骨髓细胞分化为骨髓源性巨噬细胞(BMDMs)。使用不同浓度的脂多糖(LPS)刺激BMDMs,利用Western blot检测BMDMs内葡萄糖调节蛋白78(GRP78)等内质网应激分子、iNOS等炎症因子以及LC3-Ⅱ和p62等自噬相关蛋白的表达变化。利用LPS刺激来自Atg5^(flox/flox)和Atg5^(△mye)小鼠的BMDMs,并进行蛋白组学检测。利用牛磺熊去氧胆酸(TUDCA)或激活转录因子6(ATF6)抑制剂Ceapin-A7处理BMDMs。结果:LPS促进内质网应激相关蛋白表达和促炎型巨噬细胞活化,同时抑制BMDMs自噬。通过蛋白组学检测和GO富集分析发现,BMDMs自噬缺陷引起内质网应激关键下游ATF6通路变化。利用TUDCA抑制内质网应激,则显著下调自噬缺陷引起的BMDMs内iNOS的表达以及炎症因子IL-18和IL-1β分泌。利用ATF6特异性抑制剂(Ceapin-A7)处理LPS刺激下的BMDMs,发现Ceapin-A7显著下调Atg5缺失引起的iNOS和炎症因子表达增加。结论:自噬通过下调ATF6通路抑制促炎型巨噬细胞活化。 展开更多
关键词 巨噬细胞 自噬 内质网应激 炎症反应
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细胞自噬与肾脏疾病研究中国专家共识 被引量:28
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作者 中国病理生理学会肾脏病专业委员会 刘华锋 杨俊伟 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第10期1876-1887,共12页
1963年比利时生物化学家Duve第一次使用自噬(autophagy)这一名称,他同时因发现溶酶体获得了1974年的诺贝尔生理学或医学奖。日本科学家大隅良典因发现了细胞自噬机制而荣获2016年诺贝尔生理学或医学奖。目前认为细胞自噬是一种溶酶体依... 1963年比利时生物化学家Duve第一次使用自噬(autophagy)这一名称,他同时因发现溶酶体获得了1974年的诺贝尔生理学或医学奖。日本科学家大隅良典因发现了细胞自噬机制而荣获2016年诺贝尔生理学或医学奖。目前认为细胞自噬是一种溶酶体依赖的细胞降解途径。自噬包括生理状态下的基础自噬以及应激状态下所诱导的自噬[1],在肾脏固有细胞的生理及病理过程中均发挥重要作用。 展开更多
关键词 自噬 肾脏疾病 专家共识
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二甲双胍非降糖肾脏保护作用的研究新进展 被引量:8
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作者 薛晶 杨陈 +1 位作者 安宁 刘华锋 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第5期593-596,共4页
二甲双胍作为一线口服降糖药应用于2型糖尿病,其有效性、安全性和经济性已得到公认。二甲双胍除降血糖而间接起肾脏保护作用之外,新近研究发现,它还可通过腺苷酸活化蛋白激酶(AMP-activated protein kinase,AMPK)依赖和非依赖途径诱导... 二甲双胍作为一线口服降糖药应用于2型糖尿病,其有效性、安全性和经济性已得到公认。二甲双胍除降血糖而间接起肾脏保护作用之外,新近研究发现,它还可通过腺苷酸活化蛋白激酶(AMP-activated protein kinase,AMPK)依赖和非依赖途径诱导自噬、抗衰老、抗氧化应激、抗内质网应激、抗炎、抗纤维化等,对慢性肾脏病和急性肾损伤起防治作用。该文就二甲双胍非降糖肾脏保护作用及可能机制作一综述。 展开更多
关键词 二甲双胍 非降糖作用 肾脏保护 AMPK 慢性肾脏病 急性肾损伤
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系统性红斑狼疮伴肺部损害的CT定量参数与抗核抗体谱的相关研究 被引量:9
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作者 叶玲 阮莉金 +1 位作者 潘庆军 何滨 《中国医学影像学杂志》 CSCD 北大核心 2021年第5期459-463,共5页
目的探讨系统性红斑狼疮(SLE)伴肺部损害患者CT定量参数与血清抗核抗体谱的相关性。资料与方法选择经病理确诊为SLE患者94例并加以免疫药物治疗。根据患者是否存在肺部损害将其分为肺部损害组36例和肺部无损害组58例,分别检测患者治疗前... 目的探讨系统性红斑狼疮(SLE)伴肺部损害患者CT定量参数与血清抗核抗体谱的相关性。资料与方法选择经病理确诊为SLE患者94例并加以免疫药物治疗。根据患者是否存在肺部损害将其分为肺部损害组36例和肺部无损害组58例,分别检测患者治疗前后7 d CT扫描结果与血清抗体谱变化情况。采用多层螺旋CT扫描及后处理技术获得肺部损害G值和肺小血管截面积与肺截面积比值(%CSA)等定量参数;采用免疫印迹法检测血清抗核抗体(ANA)、抗双链DNA抗体(ds-DNA)和抗可溶性抗原抗体(ENA)表达水平;分析G值、%CSA值与血清ANA、ds-DNA、ENA定量水平的相关性。结果与无损害组相比,损害组患者G值、%CSA值以及ANA、ds-DNA和ENA水平均显著升高,差异有统计学意义(P<0.05);且肺部损害组患者治疗后G值、%CSA值、ANA抗体水平、ds-DNA抗体水平和ENA抗体水平均显著下降,差异有统计学意义(P<0.05)。G值分别与血清ANA、ds-DNA和ENA定量水平呈显著正相关(r=0.754、0.863、0.735,P<0.05);%CSA值也与其呈正相关(r=0.698、0.821、0.709,P<0.05)。结论SLE伴肺部损伤患者CT定量参数G值和肺动脉高压患者%CSA值均与血清抗核抗体谱存在显著相关性,对临床诊断和病情评估具有重要意义。 展开更多
关键词 红斑狼疮 系统性 肺炎 体层摄影术 螺旋计算机 肺动脉高压 抗核抗体谱
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TFEB调控机制及其靶向药物的研究进展 被引量:5
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作者 陈小翠 杨陈 +1 位作者 李志航 刘华锋 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第7期902-906,共5页
转录因子EB(TFEB)是具有螺旋-环-螺旋亮氨酸拉链分子结构的转录因子,在维持细胞稳态等过程中至关重要。TFEB作为维持细胞自噬-溶酶体稳定的转录因子,其异常与诸多疾病的发生发展密切相关。目前,针对其调节机制及其靶向调节药物的研究均... 转录因子EB(TFEB)是具有螺旋-环-螺旋亮氨酸拉链分子结构的转录因子,在维持细胞稳态等过程中至关重要。TFEB作为维持细胞自噬-溶酶体稳定的转录因子,其异常与诸多疾病的发生发展密切相关。目前,针对其调节机制及其靶向调节药物的研究均有一定进展。该文对目前TFEB的调节机制和靶向药物研究进展进行综述,以期为与TFEB调节异常相关的疾病提供新的治疗思路。 展开更多
关键词 TFEB 调节机制 磷酸化修饰 乙酰化修饰 抑制因子互作 靶向药物
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巨噬细胞条件性Atg5基因敲除小鼠的构建及鉴定 被引量:12
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作者 黄小荣 黄衍恒 +5 位作者 叶霖 杨陈 汤济鑫 安宁 刘建兴 刘华锋 《中国实验动物学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第6期770-775,共6页
目的构建并鉴定巨噬细胞条件性Atg5基因敲除小鼠,为研究巨噬细胞自噬在肾脏疾病发病机制中的作用提供动物模型。方法将引进LysM-Cre小鼠与Atg5^flox/+小鼠进行杂交、Atg5^flox/+小鼠自交,分别获得基因型为Atg5^flox/+Cre^+/-和Atg5^flox... 目的构建并鉴定巨噬细胞条件性Atg5基因敲除小鼠,为研究巨噬细胞自噬在肾脏疾病发病机制中的作用提供动物模型。方法将引进LysM-Cre小鼠与Atg5^flox/+小鼠进行杂交、Atg5^flox/+小鼠自交,分别获得基因型为Atg5^flox/+Cre^+/-和Atg5^flox/flox Cre^-/-的子代小鼠;将上述两种基因型的子代小鼠杂交,得到巨噬细胞条件性Atg5基因敲除小鼠(Atg5^flox/flox Cre^+/-,Atg5^-/-)和对照小鼠(Atg5^flox/flox Cre^-/-,Atg5^+/+)。提取小鼠鼠尾组织基因组DNA,经PCR扩增及琼脂糖凝胶电泳后,在DNA水平判断小鼠基因型;提取小鼠骨髓来源巨噬细胞RNA和蛋白,利用基因测序和Western blot技术检验Atg5基因的敲除效果。结果成功建立巨噬细胞条件性Atg5基因敲除小鼠模型,该小鼠存活并且可育。在基因及蛋白水平上,巨噬细胞Atg5基因敲除成功;且与Atg5^+/+小鼠相比,Atg5^-/-小鼠自噬基础水平低下(p62明显增多,LC3Ⅱ明显减少),对于自噬激活剂雷帕霉素刺激不能恢复到正常基础水平。结论利用Cre/loxp系统,本研究成功构建并鉴定出条件性巨噬细胞Atg5基因敲除小鼠,为在动物水平研究巨噬细胞自噬在肾脏疾病发病机制中的作用提供研究平台。 展开更多
关键词 巨噬细胞 Atg5基因 基因敲除 自噬 基因型鉴定
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反复注射顺铂诱导小鼠慢性肾功能不全模型的建立 被引量:5
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作者 黄统生 郭赟 +7 位作者 杨陈 安宁 叶霖 唐皓璇 黄希杰 许勇芝 潘庆军 刘华锋 《中国实验动物学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第1期20-28,共9页
目的构建慢性肾脏病(chronic kidney disease,CKD)C57BL/6小鼠模型,探索其小管损伤指标和间质纤维化程度随顺铂造模剂量的改变,为研究从AKI到CKD进展过程提供动物实验依据。方法将24只8周龄雄性C57BL/6小鼠随机平均分为对照组和低、中... 目的构建慢性肾脏病(chronic kidney disease,CKD)C57BL/6小鼠模型,探索其小管损伤指标和间质纤维化程度随顺铂造模剂量的改变,为研究从AKI到CKD进展过程提供动物实验依据。方法将24只8周龄雄性C57BL/6小鼠随机平均分为对照组和低、中、高剂量顺铂模型组。模型组小鼠按5、7、10 mg/kg顺铂腹腔注射给药,每周1次,连续注射4周构建模型。处死小鼠后,留取标本进行相关检测。检测血浆肌酐和24 h尿蛋白排泌量来评估小鼠肾功能;PAS染色观察肾脏病理学变化;免疫组化检测肾损伤分子1(KIM-1)和尿液检测N-乙酰-β-D氨基葡萄糖苷酶(NAG)水平以评估肾小管损伤情况;免疫组化法检测肾脏CD3阳性T细胞和免疫荧光法检测F4/80阳性巨噬细胞浸润情况;天狼星红染色、免疫组化法检测胶原I和α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)表达以评估肾脏纤维化情况。结果与正常对照组相比,随着注射顺铂浓度的升高,小鼠肾脏损伤越明显,其中10 mg/kg顺铂高剂量组最为显著。与对照组相比,顺铂高剂量组小鼠肾功能下降,表现为血浆肌酐浓度和24 h尿蛋白排泌量显著升高(P<0.05和P<0.001);肾小管上皮细胞坏死、空泡变性等病理学改变显著,肾组织KIM-1表达显著上升(P<0.05),尿NAG水平升高;肾组织浸润的CD3阳性T细胞和F4/80阳性巨噬细胞增多;肾组织天狼星红染色阳性胶原纤维区域显著增多(P<0.001),胶原I和α-SMA表达也明显增多(P<0.01),肾小管-间质发生纤维化。结论反复注射4周10 mg/kg顺铂可诱导小鼠慢性肾功能不全模型,可为研究AKI向CKD的转化机制提供了新的实验模型。 展开更多
关键词 慢性肾功能不全 肾小管-间质损伤 顺铂 巨噬细胞 肾损伤分子1 小鼠
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基于网络药理学分析冬虫夏草防治急性肾损伤的分子机制 被引量:5
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作者 洪涛 李晓宇 +1 位作者 李尚妹 刘华锋 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第11期2299-2304,共6页
目的:基于网络药理学分析冬虫夏草(CS)防治急性肾损伤(AKI)的分子作用机制。方法:应用中药系统药理学数据库(TCMSP)筛选CS的有效成分和作用靶点,从DisGeNET、GeneCards、OMIM、TTD数据库筛选AKI的疾病靶点,运用Cytoscape 3.8.0软件构建... 目的:基于网络药理学分析冬虫夏草(CS)防治急性肾损伤(AKI)的分子作用机制。方法:应用中药系统药理学数据库(TCMSP)筛选CS的有效成分和作用靶点,从DisGeNET、GeneCards、OMIM、TTD数据库筛选AKI的疾病靶点,运用Cytoscape 3.8.0软件构建“药物-成分-疾病-靶点”可视化调控网络,采用String在线数据库构建CS与AKI共同靶点的蛋白互作网络,DAVID数据库和KEGG数据库对共同靶点进行GO功能富集分析和KEGG通路富集分析,探讨其潜在分子机制。结果:CS中筛选得到有效成分9种,防治AKI的作用靶点63个。GO功能富集分析主要包括对药物的反应、信号转导、衰老、细胞增殖调控、细胞凋亡调控等。CS防治AKI的主要富集通路有PI3K-Akt信号通路、MAPK信号通路、细胞凋亡通路、TNF信号通路、P53信号通路等。结论:通过网络药理学研究方法预测了CS防治AKI的有效活性成分及作用靶点,并通过PPI网络和KEGG富集分析推测了CS通过多条信号通路调节防治AKI,涉及细胞自噬、凋亡及炎症反应等多环节生物学过程。 展开更多
关键词 冬虫夏草 急性肾损伤 网络药理学 分子机制
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T细胞在急性肾损伤中的作用 被引量:4
9
作者 郭赟 黄统生 +2 位作者 杨陈 安宁 刘华锋 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第4期618-622,共5页
急性肾损伤(AKI)是指各种原因引起的短时间内肾功能快速丢失的临床综合征,发生AKI的患者进展为慢性肾脏病(CKD)的风险高,死亡率增加,给患者家庭和社会造成极大的经济负担。许多因素介导AKI的发生发展,目前认为,固有免疫和适应性免疫介... 急性肾损伤(AKI)是指各种原因引起的短时间内肾功能快速丢失的临床综合征,发生AKI的患者进展为慢性肾脏病(CKD)的风险高,死亡率增加,给患者家庭和社会造成极大的经济负担。许多因素介导AKI的发生发展,目前认为,固有免疫和适应性免疫介导的炎症反应参与了AKI的起始、进展以及修复的各个阶段,而T淋巴细胞在其中扮演了关键角色。本文将对T细胞在AKI中的作用的研究进展进行综述。 展开更多
关键词 T细胞 急性肾损伤 特异性治疗
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TFEB调控--肾脏疾病治疗的新思路 被引量:5
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作者 李婷婷 王淑君 +4 位作者 杨陈 吴洪銮 李志航 刘华锋 刘伟敬 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第4期754-759,共6页
2017年世界肾脏病日报告显示,目前中国慢性肾脏病患者超过1亿,接受透析的患者人数近40万,透析年治疗费用约10万,政府医保和患者都面临着巨大的经济负担。肾脏疾病病因复杂,大多数发病机制尚不完全清楚,目前治疗也多依赖于经验性、对症... 2017年世界肾脏病日报告显示,目前中国慢性肾脏病患者超过1亿,接受透析的患者人数近40万,透析年治疗费用约10万,政府医保和患者都面临着巨大的经济负担。肾脏疾病病因复杂,大多数发病机制尚不完全清楚,目前治疗也多依赖于经验性、对症性治疗。在如此严峻的形势下,迫切需要明确肾脏病的发病机制,进行病因性治疗才能有效地遏制肾脏病向终末期肾脏病的进展。转录因子EB(transcription factor EB,TFEB)具有众多细胞生物学功能,随着研究的不断深入,发现TFEB也参与一些肾脏病的发生发展。本文就TFEB在肾脏病中的研究进展进行综述,希望可以为肾脏病的治疗带来新思路。 展开更多
关键词 转录因子EB 肾细胞癌 糖尿病肾病 胱氨酸肾病
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肠道病毒71型能诱导THP-1巨噬细胞的自噬和凋亡 被引量:2
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作者 罗文英 杨拉维 +1 位作者 潘庆军 邱丽红 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第6期828-836,共9页
目的探讨肠道病毒71型(EV71)诱导THP-1巨噬细胞自噬和凋亡及其相关信号通路。方法设置EV71处理组和DMEM对照组,EV71处理组是用感染复数0.1感染THP-1巨噬细胞2、8和16 h,对照组是用DMEM培养基作为阴性对照即是0 h组。CCK-8检测EV71对THP-... 目的探讨肠道病毒71型(EV71)诱导THP-1巨噬细胞自噬和凋亡及其相关信号通路。方法设置EV71处理组和DMEM对照组,EV71处理组是用感染复数0.1感染THP-1巨噬细胞2、8和16 h,对照组是用DMEM培养基作为阴性对照即是0 h组。CCK-8检测EV71对THP-1巨噬细胞增殖和毒性的影响;荧光定量PCR法检测EV71在细胞内病毒核酸变化情况;透射电镜观察THP-1巨噬细胞内超微结构变化;Hoechst 33342染色法和AnnexinV/PI双染法检测EV71诱导THP-1巨噬细胞凋亡的情况;免疫印迹法分析EV71诱导THP-1巨噬细胞自噬和凋亡相关蛋白水平的变化;用3-MA和Ac-DEVD-CHO抑制剂分别检测EV71对THP-1巨噬细胞自噬和凋亡的影响。结果EV71作用THP-1巨噬细胞2、8和16h的细胞存活率逐渐下降(P<0.05);细胞内病毒核酸拷贝数逐渐增多(P<0.01);可见细胞内自噬小体和病毒颗粒;总细胞凋亡率逐渐增加(P<0.01);与对照组比较,EV71处理组LC3转化量(LC3-II/LC3-I)逐渐增多,而p62蛋白逐渐减少,cleaved caspase 3蛋白增多,Bcl-2和caspase-3蛋白减少(P<0.01),而cleaved caspase-8无差异(P>0.05);与PBS对比,在8 h时3-MA明显抑制EV71诱导THP-1巨噬细胞自噬,LC3-II/LC3-I比值减少,而p62蛋白增多(P<0.01);与DMSO对比,Ac-DEVD-CHO明显抑制EV71诱导THP-1巨噬细胞凋亡,凋亡率分别为15.5%和7.7%(P<0.01)。结论EV71能感染THP-1巨噬细胞并在其中复制,且能诱导自噬和凋亡,其可能与激活LC3/p62自噬途径和caspase凋亡途径有关。 展开更多
关键词 肠道病毒71型 THP-1巨噬细胞 自噬 凋亡
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