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miR-365a-3p通过TGF-β信号通路影响血管内皮细胞功能参与子痫前期的发病机制
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作者 严兆华 郑健彬 +2 位作者 张娜 曹春燕 颜露春 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2024年第16期2263-2269,共7页
目的探究微小RNA(miRNA)-365a-3p影响血管内皮细胞功能参与子痫前期(PE)的发病机制。方法分离原代人脐静脉内皮细胞(HUVECs),设为NC组(转染miR-365a-3p NC)、mimics组(转染miR-365a-3p mimics)、inhibitor组(转染miR-365a-3p inhibitor)... 目的探究微小RNA(miRNA)-365a-3p影响血管内皮细胞功能参与子痫前期(PE)的发病机制。方法分离原代人脐静脉内皮细胞(HUVECs),设为NC组(转染miR-365a-3p NC)、mimics组(转染miR-365a-3p mimics)、inhibitor组(转染miR-365a-3p inhibitor),另取对数期细胞设为空白组。检测各组增殖、迁移及血管形成能力。双荧光素酶实验验证miR-365a-3p与下游基因的靶向关系。检测各组TGF-β_(1)、Smad4、Smad7蛋白表达。结果与空白组、NC组比较,mimics组24、48、72 h吸光度值及迁移率降低(P<0.05),每个视野的管状结构数量减少(P<0.05),inhibitor组24、48、72 h吸光度值及迁移率升高(P<0.05),每个视野的管状结构数量增加(P<0.05)。双荧光素酶实验表明Smad7是miR-365a-3p的一个靶基因。与空白组、NC组比较,mimics组转化生长因子-β_(1)(TGF-β_(1))、Smad4蛋白表达升高(P<0.05),Smad7蛋白表达降低(P<0.05),inhibitor组TGF-β_(1)、Smad4蛋白表达降低(P<0.05),Smad7蛋白表达升高(P<0.05)。结论miR-365a-3p可能通过调控下游TGF-β信号通路影响血管内皮细胞功能,从而参与PE发病。 展开更多
关键词 子痫前期 微小RNA-365a-3p 血管内皮细胞功能 转化生长因子-Β
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黏液型与非黏液型铜绿假单胞菌的比较蛋白组学分析 被引量:2
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作者 罗文英 刘建军 +2 位作者 丁瑜 杨拉维 任晓虎 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第13期1345-1351,共7页
目的探讨黏液型与非黏液型铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa,P.a)的差异蛋白谱,以发现黏液型P.a潜在的生物标志物。方法采用来自于临床囊性纤维化患者分离的3株黏液型P.a菌株,脉冲场凝胶电泳以确定它们的同源性;采用同位素相对和绝... 目的探讨黏液型与非黏液型铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa,P.a)的差异蛋白谱,以发现黏液型P.a潜在的生物标志物。方法采用来自于临床囊性纤维化患者分离的3株黏液型P.a菌株,脉冲场凝胶电泳以确定它们的同源性;采用同位素相对和绝对定量标记(isobaric tags for relative and absolute quantitation,i TRAQ)结合二维液相色谱串联质谱(two-dimensional liquid chromatography-tandem mass spectrometry,2D LC-MS/MS)技术分析3株黏液型与对照组1株非黏液型P.a的差异蛋白谱,并采用RT-q PCR方法对5个共同差异蛋白进行验证。结果 3株黏液型P.a菌株不具有同源性,i TRAQ结果没有明显差异。3组共有219个上调和101个下调差异蛋白。pa2815、pa2018、dnak、pa5046和acef基因转录水平与i TRAQ结果一致。结论不同黏液表型P.a的i TRAQ结果没有明显差异,219个上调和101个下调差异蛋白可以作为研究黏液型与非黏液型P.a致病机制的候选生物标志物。 展开更多
关键词 黏液型 铜绿假单胞菌 生物标志物 蛋白质组学
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医用臭氧对宫颈癌细胞增殖和迁移抑制作用的初步研究 被引量:4
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作者 李锦程 唐水英 +1 位作者 曾涛 何晓峰 《介入放射学杂志》 CSCD 北大核心 2021年第11期1140-1145,共6页
目的探讨医用臭氧是否通过核因子(NF)-κB信号通路调控上皮-间质细胞转化(EMT)相关蛋白表达抑制宫颈癌细胞增殖和迁移。方法选用人宫颈癌Hela细胞,分别设空白组、N-乙酰-L-半胱氨酸(NAC)处理组、NAC和臭氧共处理组、臭氧组。细胞在臭氧... 目的探讨医用臭氧是否通过核因子(NF)-κB信号通路调控上皮-间质细胞转化(EMT)相关蛋白表达抑制宫颈癌细胞增殖和迁移。方法选用人宫颈癌Hela细胞,分别设空白组、N-乙酰-L-半胱氨酸(NAC)处理组、NAC和臭氧共处理组、臭氧组。细胞在臭氧处理前以60 mmol/mL NAC溶液预处理20 min,随后将细胞悬液与等体积半最大效应浓度(EC50)臭氧混合15 min。细胞计数试剂盒(CCK)-8和细胞集落实验检测细胞增殖抑制。二氯二乙酸酯(DCFH-DA)探针通过流式细胞术检测活性氧(ROS)水平。划痕实验和Transwell实验验检测臭氧处理后Hela细胞迁移能力。蛋白质印迹法检测NF-κB和EMT相关蛋白表达水平。结果臭氧处理后Hela细胞增殖能力下降,臭氧EC50为10 mg/mL,同时其迁移能力也下降。臭氧处理后,Hela细胞NF-κB和κB抑制性蛋白激酶(IKK)α表达及其磷酸化水平均降低,同时EMT相关波形蛋白(vimentin)和β-连环蛋白(β-catenin)表达水平降低,而NAC预处理可逆转臭氧的作用。结论医用臭氧可能通过抑制NF-κB信号通路下调vimentin、β-catenin抑制宫颈癌Hela细胞增殖和迁移,ROS在其中发挥重要作用,表明医用臭氧有望成为宫颈癌新的辅助治疗手段。 展开更多
关键词 医用臭氧 宫颈癌 NF-ΚB信号通路 细胞增殖 细胞迁移
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多发性骨髓瘤合并肾损伤的实验室特征 被引量:7
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作者 曲璟 肖斌 +1 位作者 李林海 曾涛 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2021年第15期2003-2006,2011,共5页
目的研究多发性骨髓瘤(multiple myeloma,MM)合并肾损伤实验室特征,及对多指标的联合诊断效能进行评估。方法回顾性分析2018年6月至2021年3月南方医科大学南方医院及南部战区总医院血液内科收治的MM患者的临床资料,包括157例MM患者,其... 目的研究多发性骨髓瘤(multiple myeloma,MM)合并肾损伤实验室特征,及对多指标的联合诊断效能进行评估。方法回顾性分析2018年6月至2021年3月南方医科大学南方医院及南部战区总医院血液内科收治的MM患者的临床资料,包括157例MM患者,其中合并肾损伤的MM患者为30例,非肾损伤患者为127例,比较实验室检查结果,分析MM合并肾损伤危险因素,并对单个指标检测与联合检测在MM合并肾损伤中的诊断效能进行比较。结果本研究共157例MM患者,其中合并肾损伤的MM患者为30例,非肾损伤患者为127例,研究发现肾损伤组的尿素氮、尿酸、β2-微球蛋白、校正钙离子、中性粒细胞/淋巴细胞(neutrophil/lymphocyte ratio,NLR)高于MM未合并肾损伤组(P<0.05)。此外,校正钙离子升高、β2-微球蛋白水平升高、NLR升高为MM合并肾损伤的独立危险因素。β2-微球蛋白、校正钙离子及NLR三者联合检测诊断的敏感性和特异性更高。结论β2-微球蛋白、校正钙离子和NLR是MM肾损伤的危险因素,且具有较好的预测价值。 展开更多
关键词 多发性骨髓瘤 肾损伤 Β2-微球蛋白 校正钙离子 危险因素
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肠道病毒71型能诱导THP-1巨噬细胞的自噬和凋亡 被引量:2
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作者 罗文英 杨拉维 +1 位作者 潘庆军 邱丽红 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第6期828-836,共9页
目的探讨肠道病毒71型(EV71)诱导THP-1巨噬细胞自噬和凋亡及其相关信号通路。方法设置EV71处理组和DMEM对照组,EV71处理组是用感染复数0.1感染THP-1巨噬细胞2、8和16 h,对照组是用DMEM培养基作为阴性对照即是0 h组。CCK-8检测EV71对THP-... 目的探讨肠道病毒71型(EV71)诱导THP-1巨噬细胞自噬和凋亡及其相关信号通路。方法设置EV71处理组和DMEM对照组,EV71处理组是用感染复数0.1感染THP-1巨噬细胞2、8和16 h,对照组是用DMEM培养基作为阴性对照即是0 h组。CCK-8检测EV71对THP-1巨噬细胞增殖和毒性的影响;荧光定量PCR法检测EV71在细胞内病毒核酸变化情况;透射电镜观察THP-1巨噬细胞内超微结构变化;Hoechst 33342染色法和AnnexinV/PI双染法检测EV71诱导THP-1巨噬细胞凋亡的情况;免疫印迹法分析EV71诱导THP-1巨噬细胞自噬和凋亡相关蛋白水平的变化;用3-MA和Ac-DEVD-CHO抑制剂分别检测EV71对THP-1巨噬细胞自噬和凋亡的影响。结果EV71作用THP-1巨噬细胞2、8和16h的细胞存活率逐渐下降(P<0.05);细胞内病毒核酸拷贝数逐渐增多(P<0.01);可见细胞内自噬小体和病毒颗粒;总细胞凋亡率逐渐增加(P<0.01);与对照组比较,EV71处理组LC3转化量(LC3-II/LC3-I)逐渐增多,而p62蛋白逐渐减少,cleaved caspase 3蛋白增多,Bcl-2和caspase-3蛋白减少(P<0.01),而cleaved caspase-8无差异(P>0.05);与PBS对比,在8 h时3-MA明显抑制EV71诱导THP-1巨噬细胞自噬,LC3-II/LC3-I比值减少,而p62蛋白增多(P<0.01);与DMSO对比,Ac-DEVD-CHO明显抑制EV71诱导THP-1巨噬细胞凋亡,凋亡率分别为15.5%和7.7%(P<0.01)。结论EV71能感染THP-1巨噬细胞并在其中复制,且能诱导自噬和凋亡,其可能与激活LC3/p62自噬途径和caspase凋亡途径有关。 展开更多
关键词 肠道病毒71型 THP-1巨噬细胞 自噬 凋亡
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