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间充质干细胞源外泌体治疗类风湿性关节炎动物模型和临床研究进展 被引量:3
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作者 王思捷 廖淑珍 +2 位作者 招春飞 吴平 潘庆军 《中国比较医学杂志》 CAS 北大核心 2019年第3期109-112,共4页
目前,临床治疗类风湿性关节炎(RA)可选的药物有限,治疗效果仍不容乐观。间充质干细胞(MSCs)治疗RA具有较好的应用前景,但也存在一定的潜在治疗风险。MSCs可排泌多种功能性外泌体(MSCs-Exos),MSCs-Exos不但具备MSCs的疗效,且可显著降低M... 目前,临床治疗类风湿性关节炎(RA)可选的药物有限,治疗效果仍不容乐观。间充质干细胞(MSCs)治疗RA具有较好的应用前景,但也存在一定的潜在治疗风险。MSCs可排泌多种功能性外泌体(MSCs-Exos),MSCs-Exos不但具备MSCs的疗效,且可显著降低MSCs的治疗风险。随着Exos研究技术的成熟,以及更多的动物模型和大规模的临床研究,MSCs-Exos有望为RA的治疗提供新的策略。 展开更多
关键词 自身免疫性疾病 类风湿性关节炎 间充质干细胞 外泌体 治疗
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PM2.5暴露对肺癌细胞A549自噬和凋亡的影响 被引量:7
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作者 任妮娜 林宜光 +1 位作者 林子英 刘刚 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2017年第16期2616-2619,共4页
目的研究PM2.5暴露对人肺癌细胞A549的自噬影响探讨自噬与凋亡的关联效应。方法 100μg/mL PM2.5分别处理A549细胞0、2、4、12、24 h,采用免疫荧光观察处理PM2.5 24 h对细胞自噬的影响,免疫印迹法检测PM2.5对肺癌细胞自噬和凋亡重要基... 目的研究PM2.5暴露对人肺癌细胞A549的自噬影响探讨自噬与凋亡的关联效应。方法 100μg/mL PM2.5分别处理A549细胞0、2、4、12、24 h,采用免疫荧光观察处理PM2.5 24 h对细胞自噬的影响,免疫印迹法检测PM2.5对肺癌细胞自噬和凋亡重要基因的表达的影响,运用自噬抑制剂3-甲基腺嘌呤(3-MA)处理细胞进一步明确自噬通路对细胞凋亡的作用。结果细胞自噬标志物LC3-Ⅱ蛋白表达均明显著增强,LC3-Ⅱ/LC3-I比值升高,而凋亡蛋白Bax逐渐下调(均P<0.05);免疫荧光显示,PM2.5组细胞的绿色荧光增强;但运用细胞自噬抑制剂(3-MA)会抑制LC3Ⅱ/LC3I的转化,促进Bax的表达。结论PM2.5可诱导肺癌细胞保护性自噬的发生,抑制自噬能够促进PM2.5对肺癌细胞的凋亡诱导。 展开更多
关键词 PM2.5 肺癌细胞A549 细胞自噬 凋亡
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含心脏阿霉素反应蛋白基因的重组慢病毒过表达和RNA干扰载体的构建及鉴定 被引量:1
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作者 梁春梅 许旭三 +6 位作者 余华军 周霞 温霞 李友 KOJIC Snezana 汪亚君 马国达 《吉林大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2019年第4期766-771,I0002,共7页
目的:构建心脏阿霉素反应蛋白(CARP)基因重组慢病毒过表达和RNA干扰载体并进一步包装慢病毒,为研究CARP在阿霉素(ADR)心肌病中的作用及机制奠定基础。方法:将PCR扩增的大鼠CARP基因序列和设计合成的短发夹RNA(shRNA)序列分别插入GV-358... 目的:构建心脏阿霉素反应蛋白(CARP)基因重组慢病毒过表达和RNA干扰载体并进一步包装慢病毒,为研究CARP在阿霉素(ADR)心肌病中的作用及机制奠定基础。方法:将PCR扩增的大鼠CARP基因序列和设计合成的短发夹RNA(shRNA)序列分别插入GV-358和GV-248表达载体,行DNA测序鉴定。采用重组CARP过表达和shRNA表达穿梭载体与Helper 1.0和Helper 2.0辅助包装质粒共转染人胚肾细胞HEK293T,进行病毒包装和扩增,采用终点稀释法测定病毒滴度。采用重组慢病毒感染HEK293T细胞,荧光显微镜观察绿色荧光强度。采用重组慢病毒感染H9C2细胞,分为对照组、Scramble RNA组、CARP过表达组和shRNA CARP组,Western blotting法检测各组细胞中CARP蛋白表达水平。结果:基因测序,CARP过表达及shRNA载体序列与原设计序列完全相符。载体转染HEK293T细胞后,在荧光显微镜下可见绿色荧光蛋白表达。包装的CARP过表达及shRNA病毒感染H9C2细胞后,与对照组比较,CARP过表达组细胞中CARP蛋白表达水平升高5.3倍(P=0.01),shRNA CARP组细胞中CARP蛋白表达水平降低53%(P=0.02)。结论:成功构建了CARP过表达和特异性shRNA慢病毒表达载体并获得高感染效率的过表达和RNA干扰慢病毒,后者在H9C2细胞中能够干预CARP表达。 展开更多
关键词 心脏阿霉素反应蛋白 RNA干扰 慢病毒 H9C2细胞
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太平洋牡蛎HSP70基因SNPs开发及其与温度相关性分析 被引量:4
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作者 周玉兰 闫守泉 +2 位作者 牛艳茹 何惠娟 王家丰 《广东海洋大学学报》 CAS 2017年第3期14-22,共9页
利用高通量二代测序联合先进的高分辨率熔解曲线技术,在牡蛎HSP70基因中开发并验证SNP标记,获43个能够分型的SNP标记,其中33个转换类型SNP,10个颠换类型SNP标记。随机挑选8个SNP位点在大连及厦门共计116个样本中进行分型分析,8个标记位... 利用高通量二代测序联合先进的高分辨率熔解曲线技术,在牡蛎HSP70基因中开发并验证SNP标记,获43个能够分型的SNP标记,其中33个转换类型SNP,10个颠换类型SNP标记。随机挑选8个SNP位点在大连及厦门共计116个样本中进行分型分析,8个标记位点均符合H-W平衡,最小等位基因MAF在0.037 3~0.495 7之间。有2个标记基因型在不同地域群体间具有显著差异,O_H70-20标记的T等位基因在南方群体中的频率更高,表现出更高温度耐受性(P=0.025,OR=1.809,95%CI:1.074~3.044)。O_H70-41位点T等位基因频率在大连群体中明显高于厦门群体(P=0.003,OR=0.394,95%CI:0.210~0.733),该位点的T等位基因携带个体则表现出低温耐受性。NGS-HRM策略为牡蛎SNP标记开发提供简洁、高效的方法。 展开更多
关键词 太平洋牡蛎 HSP70 二代测序 高分辨率熔解曲线 单核苷酸多态性标记
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