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orexin-1受体抑制剂通过Wnt通路促进骨髓间充质干细胞的成骨分化 被引量:3
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作者 张丽媛 纳青青 +3 位作者 吴天秀 李近 吴敬开 刘钰瑜 《中国骨质疏松杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第5期606-611,共6页
目的研究Wnt/β-catenin信号通路对orexin-1受体抑制剂介导大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)成骨分化的影响。方法(1)分离提取SD大鼠股骨、胫骨的BMSCs,用流式细胞仪进行细胞表型鉴定;(2)实验分组:对照组、10-5mol/L、10-6mol/L质量浓度的or... 目的研究Wnt/β-catenin信号通路对orexin-1受体抑制剂介导大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)成骨分化的影响。方法(1)分离提取SD大鼠股骨、胫骨的BMSCs,用流式细胞仪进行细胞表型鉴定;(2)实验分组:对照组、10-5mol/L、10-6mol/L质量浓度的orexin-1受体抑制剂溶液,于成骨诱导第5天免疫印迹法和实时荧光定量PCR法观察Wnt/β-catenin信号通路关键靶点蛋白Dickkopf-1、Gsk3β、β-catenin以及基因Gsk3β、β-catenin mRNA表达,以观察Wnt信号通路对orexin-1受体抑制剂诱导大鼠骨髓间充质干细胞成骨分化的影响。结果 10^(-5)mol/L、10^(-6)mol/L的orexin-1受体抑制剂处理BMSCs5天后,Dickkopf-1、β-catenin和GSK3β蛋白表达升高,β-catenin和GSK3βmRNA表达升高。结论 orexin-1受体抑制剂促进大鼠骨髓基质干细胞向成骨细胞方向分化的作用可能与调控Wnt/β-catenin信号通路有关。 展开更多
关键词 骨髓间充质干细胞 WNT/Β-CATENIN信号通路 成骨分化
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虾青素对去卵巢糖尿病大鼠骨质流失的防治作用 被引量:6
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作者 张丽媛 纳青青 +1 位作者 周丽敏 刘钰瑜 《中国骨质疏松杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第4期508-513,525,共7页
目的探讨虾青素能否防治去卵巢糖尿病大鼠的骨质流失以及可能的机制。方法 3月龄雌性SD大鼠分为3组(每组6只):对照组CON(假手术),模型组OVX/T1DM(去卵巢糖尿病大鼠),药物组OVX/T1DM-ASX去卵巢糖尿病大鼠,给予虾青素100 mg/(kg·d)... 目的探讨虾青素能否防治去卵巢糖尿病大鼠的骨质流失以及可能的机制。方法 3月龄雌性SD大鼠分为3组(每组6只):对照组CON(假手术),模型组OVX/T1DM(去卵巢糖尿病大鼠),药物组OVX/T1DM-ASX去卵巢糖尿病大鼠,给予虾青素100 mg/(kg·d)。结果连续治疗60 d后,与OVX/T1DM组相比,OVX/T1DM-ASX组骨密度(BMD)明显升高(P<0.01),血清I型胶原蛋白(CTX-1)、骨钙素、I型前胶原蛋白n端前肽(PINP)、抗酒石酸磷酸酶5b(TRACP 5b)水平均显著升高(P<0.01)。虾青素治疗能抑制去卵巢糖尿病大鼠骨组织形态学的改变,减少骨髓脂肪细胞增加,提高OPG/RANKL的比值。结论虾青素对绝经后糖尿病骨质流失有保护作用,这种作用与调控OPG/RANKL轴有关。 展开更多
关键词 虾青素 骨质疏松 糖尿病 骨保护蛋白 受体活化因子 骨转化标志物
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Orexin-1受体抑制剂对大鼠骨髓间充质干细胞增殖和成骨分化的影响 被引量:3
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作者 张丽媛 纳青青 吴天秀 《医药导报》 CAS 2017年第10期1103-1107,共5页
目的探讨orexin-1受体抑制剂对骨髓间充质干细胞(BMSCs)增殖与成骨分化的影响。方法提取SD大鼠BMSCs并鉴定,配制10^(-2),10^(-3),10^(-4),10^(-5),10^(-6)mol·L^(-1)不同浓度的orexin-1受体抑制剂溶液,分别与第3代BMSCs共培养后,... 目的探讨orexin-1受体抑制剂对骨髓间充质干细胞(BMSCs)增殖与成骨分化的影响。方法提取SD大鼠BMSCs并鉴定,配制10^(-2),10^(-3),10^(-4),10^(-5),10^(-6)mol·L^(-1)不同浓度的orexin-1受体抑制剂溶液,分别与第3代BMSCs共培养后,应用噻唑蓝(MTT)法检测orexin-1受体抑制剂对BMSCs增殖的影响。对硝基苯磷酸盐法和双抗体两步夹心酶联免疫吸附法检测碱性磷酸酶和骨钙素,实时荧光定量PCR法检测成骨分化相关基因Runx2、Col1a1 mRNA。结果orexin-1受体抑制剂最佳促BMSCs增殖浓度为1×10^(-4)mol·L^(-1)。10^(-4),10^(-5),10^(-6)mol·L^(-1)orexin-1受体抑制剂作用3,5,7 d能升高BMSCs胞浆内碱性磷酸酶表达,差异有统计学意义(P<0.05),而且这种作用在第5天达到高峰。10^(-4),10^(-5),10^(-6)mol·L^(-1)orexin-1受体抑制剂作用7 d可使骨钙素含量升高(P<0.05)。10^(-4),10^(-5),10^(-6)mol·L^(-1)orexin-1受体抑制剂上调Runx2、COL1A1 mRNA表达。结论 orexin-1受体抑制剂可促进BMSCs增殖,同时促进其向成骨细胞方向分化,促进BMSCs表达碱性磷酸酶刺激骨钙素的分泌。 展开更多
关键词 orexin-1受体抑制剂 骨髓间充质干细胞 碱性磷酸酶 骨钙素
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甲硝唑诱导斑马鱼骨丢失模型的建立 被引量:2
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作者 张丽媛 纳青青 周丽敏 《医药导报》 CAS 北大核心 2022年第1期30-34,共5页
目的通过构建甲硝唑诱导胰岛β细胞破坏的转基因斑马鱼骨丢失的动物模型,为寻找可保护胰岛β细胞的促骨形成药物提供经济便捷的平台。方法用酶切鉴定正确的重组质粒p-IsceI-INS:nfsB进行显微注射,建立胰岛β细胞转基因斑马鱼系。选用受... 目的通过构建甲硝唑诱导胰岛β细胞破坏的转基因斑马鱼骨丢失的动物模型,为寻找可保护胰岛β细胞的促骨形成药物提供经济便捷的平台。方法用酶切鉴定正确的重组质粒p-IsceI-INS:nfsB进行显微注射,建立胰岛β细胞转基因斑马鱼系。选用受精后30 h的转基因斑马鱼胚胎分别暴露于5,10,15μmol·L^(-1)甲硝唑溶液中,作为甲硝唑组;同时设1%二甲亚砜溶媒作为阴性对照组,nfsB蛋白将无毒性的前体药物转变为细胞毒素,在活体直接破坏胰岛β细胞。48 h后及时更换胚胎养殖水终止甲硝唑的破坏作用,常规28.5℃下在24孔板中培养至斑马鱼颅骨形成。测定斑马鱼血糖水平,采用酶联免疫吸附测定(ELISA)试剂盒定量测定糖基化终产物;采用茜素红对斑马鱼骨骼进行染色,以显微检测、数码成像方法定量分析骨骼染色区域。结果与阴性对照组比较,5,10,15μmol·L^(-1)甲硝唑组斑马鱼骨骼染色面积和累计吸光度显著减小,提示利用甲硝唑破坏胰岛β细胞构建转基因斑马鱼的骨骼矿化量和骨密度都显著降低,成功诱导斑马鱼骨丢失模型。并用该模型成功验证依替膦酸二钠防治骨质疏松的作用。结论成功构建破坏胰岛β细胞诱导转基因斑马鱼骨丢失模型,为在整体动物水平筛选可保护胰岛β细胞的促骨形成的小分子化合物和中草药提供一个新型的动物模型。 展开更多
关键词 甲硝唑 胰岛Β细胞 骨质疏松 斑马鱼
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Orexin-2受体激动剂不同给药方式对去卵巢糖尿病大鼠骨组织的影响 被引量:1
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作者 张丽媛 谭丹丹 +3 位作者 纳青青 刘钰瑜 余永杰 周丽敏 《中华骨质疏松和骨矿盐疾病杂志》 CSCD 北大核心 2020年第6期539-546,共8页
目的研究orexin-2受体激动剂对去卵巢糖尿病大鼠骨组织的影响。方法选取成年雌性SD大鼠作为动物模型,分为5组,每组6只。正常组:正常SD大鼠连续8周每天接受缓冲液注射;模型组:SD大鼠进行去卵巢手术,术后1周腹腔注射链脲佐菌素60 mg/kg,连... 目的研究orexin-2受体激动剂对去卵巢糖尿病大鼠骨组织的影响。方法选取成年雌性SD大鼠作为动物模型,分为5组,每组6只。正常组:正常SD大鼠连续8周每天接受缓冲液注射;模型组:SD大鼠进行去卵巢手术,术后1周腹腔注射链脲佐菌素60 mg/kg,连续8周每天接受缓冲液注射;口服给药组、腹腔给药组和侧脑室给药组:大鼠给予orexin-2受体激动剂(Ala11,d-Leu15-orexin B),连续8周。实验8周后处死大鼠,用双能X线骨矿物质密度检测仪检测左侧股骨及第5腰椎骨密度;采用半自动图像分析系统,对左侧胫骨上段进行骨形态计量学参数的分析;分析股骨和第5腰椎的生物力学性能。结果与正常组相比,模型组股骨的各项生物力学性能指标呈明显下降趋势,其中弹性载荷值,最大载荷值、断裂载荷值,分别降低19.63%(P<0.01)、21.08%(P<0.01)和24.58%(P<0.01),胫骨上段的骨小梁数量减少,骨小梁分离度增加。每毫米破骨细胞数和破骨细胞贴壁长度增加,侧脑室给药组能改善成模组大鼠骨组织的上述指标,差异有统计学意义(P<0.05);但是口服给药组和腹腔注射给药组不能改善模型组骨丢失指标,差异无统计学意义(P>0.05)。结论侧脑室给予orxin-2受体激动剂能改善去卵巢糖尿病大鼠的骨微结构,防治骨质疏松症。 展开更多
关键词 orexin-2受体激动剂 骨质疏松 糖尿病 去卵巢大鼠
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