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揭示蛋白激酶CK2生物学功能——亚基敲除/敲减 被引量:6
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作者 谢松青 郑慧玲 刘新光 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第3期227-233,共7页
蛋白激酶CK2是一种真核细胞中普遍存在的信使非依赖性丝/苏氨酸蛋白激酶,可催化细胞内多种蛋白质的磷酸化,由2个催化亚基CK2α或α'以及2个调节亚基CK2β组成的异源四聚体结构。为深入了解CK2的结构与功能,通过运用同源重组敲除、... 蛋白激酶CK2是一种真核细胞中普遍存在的信使非依赖性丝/苏氨酸蛋白激酶,可催化细胞内多种蛋白质的磷酸化,由2个催化亚基CK2α或α'以及2个调节亚基CK2β组成的异源四聚体结构。为深入了解CK2的结构与功能,通过运用同源重组敲除、条件性敲除及RNAi引起的基因敲减技术分别对其3个亚基进行敲除与抑制,发现在CK2亚基敲除与抑制后,可对个体生殖、胚胎发育、肿瘤、代谢以及衰老造成重要的影响,说明CK2各亚基具有重要的生物学功能。本文就敲除与敲减蛋白激酶CK2任一亚基后其功能变化的进展作一综述。 展开更多
关键词 蛋白激酶CK2 基因敲除 基因敲减 亚基 功能
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GSDME介导的细胞焦亡在肺癌治疗中作用的研究进展
2
作者 李欢 唐旭东 《中国肺癌杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第7期529-534,共6页
目前肺癌对人类健康构成了巨大威胁。尽管有关肺癌的治疗技术近年有了显著提高,但肺癌患者的5年生存率仍然不高。在此背景下,细胞焦亡(pyroptosis)这一独特的细胞死亡机制的发现,为探索肺癌治疗的新途径提供了全新的视角。特别是成孔蛋... 目前肺癌对人类健康构成了巨大威胁。尽管有关肺癌的治疗技术近年有了显著提高,但肺癌患者的5年生存率仍然不高。在此背景下,细胞焦亡(pyroptosis)这一独特的细胞死亡机制的发现,为探索肺癌治疗的新途径提供了全新的视角。特别是成孔蛋白E(gasdermin E,GSDME)在细胞焦亡过程中扮演的角色,提示其在肺癌治疗中具有巨大的应用潜力。近年来,GSDME介导的细胞焦亡在肺癌生长、肺癌微环境中的调节作用及GSDME甲基化对肺癌治疗影响的研究取得了较大的进展,本文对这些研究进展进行了总结,并对GSDME介导的细胞焦亡在肺癌治疗中的潜力及潜在的副作用进行了分析,旨在为开发更有效的肺癌治疗策略提供理论基础。 展开更多
关键词 肺肿瘤 成孔蛋白E 细胞焦亡
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过氧化物酶体增殖物激活受体介导的能量代谢重塑在肾疾病中的作用
3
作者 戴祺慧 杨萌 刘新光 《中国生物化学与分子生物学报》 北大核心 2025年第2期238-248,共11页
随着患病率的持续上升,肾疾病成为全球范围内严重的公共卫生问题,严重影响患者的生活质量。肾病的发病机制较为复杂为其防治带来了困难。研究发现,代谢稳态失衡通常会影响肾功能,进而引起肾病变。过氧化物酶体增殖物激活受体(peroxisome... 随着患病率的持续上升,肾疾病成为全球范围内严重的公共卫生问题,严重影响患者的生活质量。肾病的发病机制较为复杂为其防治带来了困难。研究发现,代谢稳态失衡通常会影响肾功能,进而引起肾病变。过氧化物酶体增殖物激活受体(peroxisome proliferator-activated receptor,PPAR)作为内源性配体激活的转录因子,在调节代谢分子网络特别是氧化磷酸化、脂代谢和葡萄糖代谢中发挥重要作用。激活PPAR能够改善线粒体损伤,促进脂肪酸分解并减轻胰岛素抵抗,从而恢复肾的代谢功能和缓解肾的病变。尽管现已开发了多种激活PPAR的小分子药物,但该类药物在临床试验阶段出现不良反应。目前,临床治疗肾疾病仍缺乏安全有效的用药方案。精细解析PPAR家族调控肾的细胞能量代谢的分子机制,寻找和开发新的靶向PPAR及其调控的下游代谢途径的小分子药物,对于肾疾病的认知和诊治具有重要的意义。另一方面,明确不同肾疾病发生发展过程中的代谢变化,针对性地应用靶向PPAR的药物或策略对肾疾病的治疗也尤为重要。本文概述了PPAR家族成员调控靶基因转录的方式及其在氧化磷酸化和糖脂代谢重塑中的作用,并归纳总结了PPAR表达或活性的改变对急性、慢性肾病和年龄相关性肾疾病的影响,有望为肾疾病的防治提供新的思路和理论支撑。 展开更多
关键词 过氧化物酶体增殖物激活受体 能量代谢 肾脏疾病
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角质形成细胞在银屑病中作用的研究进展 被引量:12
4
作者 黄海勇 黄功华 刘新光 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第12期1527-1530,共4页
银屑病是慢性复发性皮肤疾病,其发生与免疫功能失调、环境因素、信号转导通路紊乱及银屑病易感基因相关。既往研究表明角质形成细胞(KC)在银屑病的发生发展中发挥重要作用。银屑病中KC如何影响炎症细胞的募集、活化,及炎症因子如何导致... 银屑病是慢性复发性皮肤疾病,其发生与免疫功能失调、环境因素、信号转导通路紊乱及银屑病易感基因相关。既往研究表明角质形成细胞(KC)在银屑病的发生发展中发挥重要作用。银屑病中KC如何影响炎症细胞的募集、活化,及炎症因子如何导致炎症级联放大尚不明确。KC作为银屑病治疗的靶标,具有广泛的应用前景。本文从银屑病中KC的屏障功能、增殖分化及角质形成细胞与免疫细胞的相互作用作综述。 展开更多
关键词 银屑病 角质形成细胞 免疫细胞 皮肤屏障 增殖
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湛江沿海海洋微藻及其多糖、脂类和蛋白藻株多样性研究 被引量:5
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作者 黄永梅 杨晓红 +3 位作者 兰柳波 詹静婷 罗辉 江黎明 《水生生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第5期1080-1090,共11页
从硇洲岛和徐闻珊瑚礁自然保护区潮间带采集的海水和沉积物样品中分离培养海洋微藻,筛选其中富含多糖、脂类或蛋白质的藻株。采用形态学观察、18S r DNA序列比较及其系统发育分析法,对分离培养的海洋微藻及其富含多糖、脂类或蛋白质的... 从硇洲岛和徐闻珊瑚礁自然保护区潮间带采集的海水和沉积物样品中分离培养海洋微藻,筛选其中富含多糖、脂类或蛋白质的藻株。采用形态学观察、18S r DNA序列比较及其系统发育分析法,对分离培养的海洋微藻及其富含多糖、脂类或蛋白质的藻株进行分类鉴定和生物多样性分析。分离、培养、鉴定并储藏了189株海洋微藻,归属于65个种,分布于硅藻门(Bacillariophyta)、绿藻门(Chlorophyta)、定鞭藻门(Haptophyta)和红藻门(Rhodophyta)的9纲、25目、30个科、38个属;其中多糖含量较高的46株海洋微藻,分布于25个种,20个属;脂类含量较高的46株海洋微藻,分布于32个种,15个属;蛋白含量较高的46株海洋微藻,分布于28个种,18个属。结果表明硇洲岛和徐闻珊瑚礁自然保护区潮间带可培养的海洋微藻及其富含多糖、脂类和蛋白质藻株的物种多样性丰富,在新型药物、活性天然产物、功能食品和饲料及其添加剂的发掘等方面具有良好前景。 展开更多
关键词 硇洲岛 徐闻珊瑚礁自然保护区 海洋微藻 多糖 脂类 蛋白质 多样性
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壳聚糖纳米传递系统主动靶向作用改善实体瘤微环境研究进展 被引量:4
6
作者 刘娇 唐旭东 《医学研究生学报》 CAS 北大核心 2019年第4期423-427,共5页
肿瘤微环境与肿瘤的发生发展密切相关,壳聚糖以其生物降解性和生物相容性而成为良好的纳米载体,现阶段纳米递送系统靶向的方法有主动和被动两种,由于被动靶向可致药物分布不均以及药物治疗浓度偏高等因素,主动靶向已成为研究主流。文章... 肿瘤微环境与肿瘤的发生发展密切相关,壳聚糖以其生物降解性和生物相容性而成为良好的纳米载体,现阶段纳米递送系统靶向的方法有主动和被动两种,由于被动靶向可致药物分布不均以及药物治疗浓度偏高等因素,主动靶向已成为研究主流。文章就肿瘤微环境中重要组分和壳聚糖递送系统的主动靶向作用等方面进行综述,总结了近年来以壳聚糖及其衍生物为基础的纳米传递系统主动靶向实体瘤微环境多个组分的应用进展,且展望了研究中一些尚待解决的问题。 展开更多
关键词 壳聚糖 纳米载体 主动靶向 微环境 实体瘤
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铁死亡与免疫细胞关系的研究进展 被引量:5
7
作者 张桂洪 唐旭东 《中国比较医学杂志》 CAS 北大核心 2023年第3期90-97,共8页
铁死亡(Ferroptosis)是一种铁依赖的新型细胞程序性死亡方式,其特征是活性氧(reactive oxygen species,ROS)和脂质过氧化的过量蓄积。铁死亡在免疫调节方面作用的研究越来越多,而免疫细胞是机体免疫系统最重要的一环,本文阐述铁死亡与... 铁死亡(Ferroptosis)是一种铁依赖的新型细胞程序性死亡方式,其特征是活性氧(reactive oxygen species,ROS)和脂质过氧化的过量蓄积。铁死亡在免疫调节方面作用的研究越来越多,而免疫细胞是机体免疫系统最重要的一环,本文阐述铁死亡与免疫细胞关系的研究进展,首先阐明铁死亡核心靶点谷胱甘肽过氧化物酶4(glutathione peroxidase 4,Gpx4)在各种免疫细胞增殖和免疫反应中的作用,其次总结细胞发生铁死亡能释放包括损伤相关分子模式(damage associated molecular patterns,DAMPs)等多种分子,这些分子能影响免疫细胞的分化与功能,进而影响疾病的发生和进展。同时,免疫细胞分泌免疫因子或其代谢物也能影响细胞铁死亡的发生。最后,我们对未来的研究进行了简要的总结和展望,这将有助于指导疾病治疗方向。 展开更多
关键词 铁死亡 免疫细胞 谷胱甘肽过氧化物酶4 损伤相关的分子模式
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脂代谢紊乱在肾脏衰老和肾纤维化中的作用 被引量:4
8
作者 吴胜泉 杨萌 刘新光 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2024年第5期1067-1078,共12页
肾间质纤维化是终末期肾脏病的病理基础,肾脏衰老是肾间质纤维化的危险因素。越来越多的研究证明,脂代谢紊乱会导致肾脏衰老和肾间质纤维化。脂代谢紊乱引起的脂质堆积,会造成脂毒性和细胞应激性损伤,从而诱发衰老与细胞外基质(extracel... 肾间质纤维化是终末期肾脏病的病理基础,肾脏衰老是肾间质纤维化的危险因素。越来越多的研究证明,脂代谢紊乱会导致肾脏衰老和肾间质纤维化。脂代谢紊乱引起的脂质堆积,会造成脂毒性和细胞应激性损伤,从而诱发衰老与细胞外基质(extracellular matrix,ECM)的分泌。维持脂代谢稳态有助于减轻肾脏衰老与肾间质纤维化的发生发展。脂代谢途径的关键酶和调控蛋白有望成为改善肾脏衰老和肾间质纤维化的潜在靶点。本综述概括了脂代谢紊乱在肾脏衰老和间质纤维化中的作用,并对脂代谢中肾脏衰老和间质纤维化的预防靶点和策略进行了总结,为治疗肾纤维化发现新靶点提供了参考。 展开更多
关键词 肾脏衰老 肾间质纤维化 脂代谢 肾小管上皮细胞
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衰老脂肪组织的微环境
9
作者 张玉洁 杨萌 刘新光 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第6期749-758,共10页
脂肪组织是人体重要的能量储存库,也是最大的内分泌器官,在衰老过程中发生显著变化。脂肪组织中衰老的细胞通过分泌细胞因子、释放代谢物质等与邻近细胞相互作用,可造成脂肪组织功能异常,并引发全身性的慢性炎症或代谢紊乱。目前,对衰... 脂肪组织是人体重要的能量储存库,也是最大的内分泌器官,在衰老过程中发生显著变化。脂肪组织中衰老的细胞通过分泌细胞因子、释放代谢物质等与邻近细胞相互作用,可造成脂肪组织功能异常,并引发全身性的慢性炎症或代谢紊乱。目前,对衰老过程中脂肪组织微环境的变化及其机制并不完全清楚。本文概述了衰老脂肪组织微环境的改变,包括脂肪组织中多种细胞类型的变化、细胞外基质堆积造成的纤维化、细胞因子等分泌表型和代谢物的改变;归纳总结了衰老脂肪组织微环境如何影响脂肪组织功能以及全身慢性低度炎症、胰岛素抵抗和早衰等;最后介绍了几种有望延缓脂肪组织衰老的策略,包括改善脂肪细胞产热、衰老细胞消融药物、饮食和锻炼。本综述对衰老脂肪组织微环境的深入探讨,有望为衰老相关疾病的治疗提供理论支撑。 展开更多
关键词 脂肪组织 衰老 微环境 免疫 代谢
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我国南海硇洲岛潮间带产油真菌的脂肪酸组成分析 被引量:2
10
作者 王洁 江黎明 +1 位作者 崔丽娇 薛珊珊 《中国油脂》 CAS CSCD 北大核心 2018年第8期115-118,126,共5页
采用尼罗红平板筛选法从我国南海硇洲岛潮间分离鉴定出的178株海洋真菌中筛选产油菌株,对其脂肪酸进行抽提并甲酯化,采用气相色谱-质谱联用(GC-MS)技术测定产油真菌的总脂肪酸含量并对其脂肪酸组成进行分析。结果表明:筛选出89株产油真... 采用尼罗红平板筛选法从我国南海硇洲岛潮间分离鉴定出的178株海洋真菌中筛选产油菌株,对其脂肪酸进行抽提并甲酯化,采用气相色谱-质谱联用(GC-MS)技术测定产油真菌的总脂肪酸含量并对其脂肪酸组成进行分析。结果表明:筛选出89株产油真菌,其中14株海洋真菌的总脂肪酸含量占冷冻干燥菌体质量的1.41%~7.73%,不饱和脂肪酸含量占总脂肪酸含量的42.51%~68.86%,多不饱和脂肪酸含量占总脂肪酸含量的9.03%~36.49%。我国南海硇洲岛潮间带产油真菌资源丰富,在生物油脂开发利用中具有较高价值,获取的不饱和脂肪酸具有广泛应用前景。 展开更多
关键词 硇洲岛 产油真菌 尼罗红平板 气相色谱-质谱联用 脂肪酸
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lncRNA BC002811慢病毒载体构建及对胃癌细胞增殖的影响 被引量:5
11
作者 符伟玉 林小聪 +2 位作者 陈小谊 余华军 兰柳波 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2020年第1期46-50,共5页
目的构建长链非编码RNA (lncRNA) BC002811慢病毒表达载体,并探讨稳定表达BC002811对胃癌HGC-27细胞增殖的影响。方法将PCR法扩增得到的BC002811全基因序列,与pLVX-EGFP-IRES-neo载体连接,经酶切鉴定和测序验证后,与辅助包装质粒共转染H... 目的构建长链非编码RNA (lncRNA) BC002811慢病毒表达载体,并探讨稳定表达BC002811对胃癌HGC-27细胞增殖的影响。方法将PCR法扩增得到的BC002811全基因序列,与pLVX-EGFP-IRES-neo载体连接,经酶切鉴定和测序验证后,与辅助包装质粒共转染HEK293T细胞,包装成重组慢病毒颗粒,再感染HGC-27细胞,经有限稀释法筛选出稳定表达BC002811的细胞克隆并扩大培养。qPCR法分析BC002811的表达水平,MTS法检测细胞增殖能力。结果双酶切和测序结果表明BC002811重组慢病毒载体构建成功,经HEK293T细胞包装后,测定其病毒滴度为2.2×1011 TU/L。将此病毒感染HGC-27细胞,显示可有效提高BC002811的表达水平(P<0.05)。MTS法检测结果显示,与对照组相比,BC002811组的HGC-27细胞增殖能力增强(P<0.05)。结论成功构建了BC002811重组慢病毒载体,该载体能稳定感染HGC-27细胞,使BC002811过表达并提高细胞的增殖能力。 展开更多
关键词 胃癌 长链非编码RNA 慢病毒 增殖
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管家基因GAPDH在肿瘤与衰老组织中作为内参应慎重 被引量:6
12
作者 郑琳 郑慧玲 刘新光 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第4期385-389,共5页
甘油醛-3-磷酸脱氢酶(glyceraldehyde 3-phosphate dehydrogenase,GAPDH)是糖酵解过程中的一个酶,编码该酶的基因为管家基因,几乎在所有组织中呈高水平、恒定表达,常用作蛋白质、RNA、DNA等分子生物学相关实验的标准化内参。但近年来,GA... 甘油醛-3-磷酸脱氢酶(glyceraldehyde 3-phosphate dehydrogenase,GAPDH)是糖酵解过程中的一个酶,编码该酶的基因为管家基因,几乎在所有组织中呈高水平、恒定表达,常用作蛋白质、RNA、DNA等分子生物学相关实验的标准化内参。但近年来,GAPDH作为内参受到质疑,特别是在肿瘤组织、衰老组织。大量研究证实,GAPDH在多种肿瘤中表达上调,衰老的骨骼肌中下调。其中GAPDH在肿瘤中的高表达可能与肿瘤的侵袭性转移和细胞增殖相关。本文就GAPDH在肿瘤、衰老组织或细胞中的表达情况以及可能机制作一综述,旨在更全面地了解管家基因GAPDH在肿瘤与衰老组织、细胞中是否恒定表达,以便在研究中可以选择最优的内参做参照。 展开更多
关键词 甘油醛-3-磷酸脱氢酶(GAPDH) 肿瘤 衰老
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稳定靶向干扰长链非编码RNA BC002811胃癌SGC-7901细胞株的构建 被引量:4
13
作者 林小聪 陈小谊 +2 位作者 余华军 兰柳波 符伟玉 《医学研究生学报》 CAS 北大核心 2019年第4期364-368,共5页
目的 BC002811在胃癌中的生物学功能及其作用机制尚不明确。文中旨在构建长链非编码RNA (lncRNA BC002811的短发夹结构RNA (shRNA)重组慢病毒载体,建立稳定干扰BC002811表达的胃癌SGC-7901细胞株。方法实验根据不同BC002811 siRNA转染... 目的 BC002811在胃癌中的生物学功能及其作用机制尚不明确。文中旨在构建长链非编码RNA (lncRNA BC002811的短发夹结构RNA (shRNA)重组慢病毒载体,建立稳定干扰BC002811表达的胃癌SGC-7901细胞株。方法实验根据不同BC002811 siRNA转染人胃癌SGC-7901细胞分为:siRNA-1组(siRNA-1正义链及反义链)、siRNA-2组(siRNA-2正义链及反义链)、siRNA-3组(siRNA-3正义链及反义链)、对照组(siRNA-NC正义链及反义链)。取SGC-7901细胞内对BC002811表达抑制效果最明显的siRNA序列构建shRNA慢病毒载体,定义为shRNA组。包装重组慢病毒及测定滴度,建立稳定靶向干扰BC002811表达的SGC-7901胃癌细胞株,MTS法检测细胞增殖能力。结果 siRNA-1组SGC-7901细胞内BC002811的RNA干扰效率较其他组升高。因此,后续实验选择siRNA-1设计BC002811 shRNA。对照组、shRNA组的病毒滴度分别为4.5×108、3.7×10~8TU/mL,提示病毒已包装成功。shRNA组BC002811表达水平[(10%±1%)]较对照组明显降低[(100%±4%)],差异有统计学意义(P<0.01),提示稳定靶向干扰BC002811表达的SGC-7901胃癌细胞株构建成功。与对照组比较,shRNA组的SGC-7901细胞生长速度明显减慢(P<0.05),提示下调BC002811表达可抑制SGC-7901细胞增殖。结论成功建立了稳定靶向干扰BC002811表达的SGC-7901胃癌细胞株,为BC002811在胃癌中的功能及其作用机制研究奠定了基础。 展开更多
关键词 胃癌 长链非编码RNA 慢病毒 短发夹结构RNA
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非小细胞肺癌细胞外泌体源性FZD10促进体外血管生成 被引量:2
14
作者 吴小凤 詹日明 +3 位作者 程大钊 陈黎 王天雨 唐旭东 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第9期1351-1358,共8页
目的探讨非小细胞肺癌(NSCLC)细胞外泌体源性FZD10在血管生成中的作用及其机制。方法采用超速离心法分离外泌体,并利用Westernblot和RT-qPCR技术分析NSCLC细胞(95D和H1299)、正常人支气管上皮细胞(BEAS-2B)及其外泌体中FZD10的表达;通... 目的探讨非小细胞肺癌(NSCLC)细胞外泌体源性FZD10在血管生成中的作用及其机制。方法采用超速离心法分离外泌体,并利用Westernblot和RT-qPCR技术分析NSCLC细胞(95D和H1299)、正常人支气管上皮细胞(BEAS-2B)及其外泌体中FZD10的表达;通过转染FZD10-siRNA敲低FZD10表达,用FZD10未敲低和敲低的NSCLC细胞外泌体分别处理HUVEC细胞,利用体外血管生成实验观察其成管能力,采用ELISA和RT-qPCR技术分析血管生成相关因子VEGFA和Ang-1的表达;进一步利用Westernblot分析外泌体源性FZD10对信号通路PI3K、Erk1/2和YAP/TAZ激活的影响。结果同BEAS-2B细胞及其外泌体相比较,FZD10在95D和H1299细胞及其外泌体中高表达(P<0.01);95D和H1299细胞来源的外泌体可促进HUVEC的微管形成及VEGFA、Ang-1的蛋白分泌、mRNA的表达(P<0.01),但在95D和H1299细胞敲低FZD10后这些效果受到抑制。FZD10的敲低可抑制PI3K、Erk1/2信号通路的激活,但对YAP/TAZ信号通路的影响不显著。结论NSCLC细胞外泌体源性FZD10可促进体外血管生成,其机制可能与PI3K、Erk1/2信号通路的激活有关。 展开更多
关键词 外泌体 FZD10 血管生成 非小细胞肺癌
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Rab4:细胞囊泡循环运输过程的重要因子 被引量:1
15
作者 陈辉积 刘新光 陈维春 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2016年第12期1163-1172,共10页
囊泡运输是真核细胞中物质运输及信息交流的重要形式,Rab蛋白在这个过程中发挥着重要功能.Rab4是Rab蛋白家族的成员之一,参与调控早期内体的分选与内体循环途径.Rab4包括Rab4A、Rab4B和Rab4C 3个亚型.本文主要阐述了Rab4的结构特征、主... 囊泡运输是真核细胞中物质运输及信息交流的重要形式,Rab蛋白在这个过程中发挥着重要功能.Rab4是Rab蛋白家族的成员之一,参与调控早期内体的分选与内体循环途径.Rab4包括Rab4A、Rab4B和Rab4C 3个亚型.本文主要阐述了Rab4的结构特征、主要的效应蛋白和参与运输的货物蛋白以及影响细胞自噬、葡萄糖摄取、神经调节、心脏功能及肿瘤发生方面的功能. 展开更多
关键词 Rab4 囊泡运输 自噬 葡萄糖摄取
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PAMM不影响人脂肪干细胞的成脂分化能力 被引量:1
16
作者 张明萌 王颖 +8 位作者 梁杰 吴洪福 史玉仓 吴志远 饶敏腊 彭健愉 蒋智文 刘新光 孙雪荣 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2022年第7期1305-1317,共13页
目的PAMM(peroxiredoxin-like 2 activated in M-CSF stimulated monocytes)是近年来发现的一种在脂肪组织中高表达的分泌因子,但其生物学功能尚不完全清楚。为了给PAMM功能研究提供新线索,本文探讨了PAMM在白色脂肪生成中的可能作用及P... 目的PAMM(peroxiredoxin-like 2 activated in M-CSF stimulated monocytes)是近年来发现的一种在脂肪组织中高表达的分泌因子,但其生物学功能尚不完全清楚。为了给PAMM功能研究提供新线索,本文探讨了PAMM在白色脂肪生成中的可能作用及PAMM调节的下游基因。方法利用成脂分化液或“成脂分化液+IL-1α”建立人脂肪干细胞(adipose-derived stem cells,ADSCs)的成脂分化和成脂抑制模型。用si RNA干扰和过表达质粒转染的方法抑制或上调PAMM表达水平。采用基因芯片、m RNA测序及定量RT-PCR检测基因的m RNA表达水平,采用蛋白质印迹法评价蛋白质表达水平,用油红O染色检测脂滴沉积。结果随着ADSCs向白色脂肪分化,PAMM表达水平明显上升,而随着成脂抑制,PAMM表达明显下降。在ADSCs中沉默或过表达PAMM后,再进行成脂分化。结果发现,上调或下调PAMM对脂滴形成及成脂相关基因的表达均无明显影响。类似地,在高度分化的脂肪细胞中敲低PAMM表达,对细胞形态及脂滴含量亦无明显影响。本文进一步利用si RNA干扰、m RNA测序及q RT-PCR,筛选和验证了一批受PAMM调节的下游基因及功能性基因集,包括SULF1、A2M基因及调节P53稳定性的基因集等。结论PAMM可作为白色成脂分化的标志基因,但其自身对白色脂肪细胞生成无明显影响,本研究筛选出来的PAMM下游基因及基因集,可为进一步研究PAMM的功能提供新线索。 展开更多
关键词 PAMM 脂肪细胞 成脂分化 干细胞 脂肪因子
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沉默信息调节因子1通过诱导miR-221/222表达促进细胞自噬 被引量:1
17
作者 杨文平 刘新光 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第2期197-203,共7页
微小RNA(microRNAs,miRNAs,)是一类强大的基因表达调控子,可在转录及转录后水平负调控靶基因的表达来参与生物学过程。沉默信息调节因子1(silent information regulator1,SIRT1)底物众多,可通过去乙酰化作用参与多种细胞生命活动进程。... 微小RNA(microRNAs,miRNAs,)是一类强大的基因表达调控子,可在转录及转录后水平负调控靶基因的表达来参与生物学过程。沉默信息调节因子1(silent information regulator1,SIRT1)底物众多,可通过去乙酰化作用参与多种细胞生命活动进程。尽管如此,SIRT1与非编码RNA如miRNA的表达调控关系仍有待深入研究。本文利用荧光定量PCR检测发现,SIRT1与miR-221和miR-222的表达呈正相关:干扰SIRT1后,miR-221/222呈低水平表达;而过表达SIRT1则促进miR-221/222的表达。将miR-221/222基因簇启动子区序列插入p EZX-GA01构建双荧光素酶报告载体,与SIRT1过表达质粒或干扰序列共转至细胞。结果显示,SIRT1可显著提高miR-221/222启动子区活性,提示SIRT1可在转录水平调节miR-221/222的表达。进一步运用Western印迹研究发现,在HEK293细胞中过表达miR-221/222可促进细胞的自噬能力,而抑制miR-221/222的表达可减弱自噬。此外,过表达SIRT1的同时抑制miR-221/222的表达可减弱SIRT1的自噬诱导作用。综上所述,SIRT1可通过诱导miR-221/222的表达促进细胞自噬,其具体作用机制有待进一步探讨。 展开更多
关键词 微小RNA-221/222 沉默信息调节因子1 自噬
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早老素通过下调CDK4使HEK293T细胞周期阻滞
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作者 宋浩昌 余辉 +1 位作者 刘新光 陈维春 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第1期96-102,共7页
早老素(progerin)的累积导致儿童早老症(Hutchinson-Gilford progeria syndrome,HGPS)的发生,并与正常衰老相关。早老素能使细胞内稳态失衡但分子机制仍有待深入研究。本研究旨在探讨早老素导入人胚胎肾293T细胞(human embryo kidney 29... 早老素(progerin)的累积导致儿童早老症(Hutchinson-Gilford progeria syndrome,HGPS)的发生,并与正常衰老相关。早老素能使细胞内稳态失衡但分子机制仍有待深入研究。本研究旨在探讨早老素导入人胚胎肾293T细胞(human embryo kidney 293T cell,HEK293T)后细胞增殖、周期变化的分子机制。形态学观察发现过表达早老素的HEK293T细胞密度下降,(57±2.47)%细胞核形态皱缩。细胞增殖和周期实验证明早老素使细胞增殖减慢,发生G1/S期阻滞,G1细胞从(42.3±1.31)%升至(47.2±1.26)%,而S期细胞从(43.1±1.36)%降至(38.5±1.42)%。Western印迹结果显示早老素的高表达引起p21蛋白表达上调(103.2±1.49)%,CDK4下调(63±1.52)%,而p53、ATM、Cyclin E1以及p16等蛋白质水平均不变;HEK293T细胞中早老素的过表达导致γ-H2AX水平下调(53±1.36)%,H2O2处理后变化趋势不变。我们的研究结果提示,早老素通过上调p21和下调CDK4使细胞发生周期阻滞,不能增加HEK293T细胞的损伤及衰老。 展开更多
关键词 早老症 早老素 人胚胎肾293T细胞 细胞周期阻滞 衰老
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稳定干扰长链非编码RNA LINC01224结直肠癌细胞株的建立及其对细胞凋亡的影响
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作者 李国丹 杨勤 +4 位作者 李秋燕 陈小谊 符伟玉 兰柳波 林小聪 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2022年第6期908-914,共7页
目的 建立稳定干扰长链非编码RNA(lncRNA)LINC01224表达的结直肠癌LoVo和SW620细胞株,并探讨下调LINC01224表达对结直肠癌细胞凋亡的影响。方法 使用GEPIA2数据库分析LINC01224在结直肠癌组织中的表达情况;qPCR法检测LINC01224在10种人... 目的 建立稳定干扰长链非编码RNA(lncRNA)LINC01224表达的结直肠癌LoVo和SW620细胞株,并探讨下调LINC01224表达对结直肠癌细胞凋亡的影响。方法 使用GEPIA2数据库分析LINC01224在结直肠癌组织中的表达情况;qPCR法检测LINC01224在10种人结直肠癌细胞中的表达水平。3种不同的LINC01224 siRNA分别转染人结直肠癌LoVo细胞,取抑制LINC01224表达效果最显著的siRNA序列构建LINC01224 shRNA慢病毒载体。在HEK293T细胞内包装成重组慢病毒颗粒,再感染LoVo和SW620细胞,经嘌呤霉素筛选后以有限稀释法获得稳定干扰LINC01224的单克隆细胞。MTS法检测细胞增殖能力,流式细胞术检测细胞凋亡率。结果 LINC01224在结直肠癌组织中的表达高于正常结直肠组织,其在10种结直肠癌细胞中的表达也高于正常结直肠上皮细胞HCOEPic。siRNA-3对LoVo细胞内LINC01224表达的抑制率高于siRNA-1和siRNA-2。故选择siRNA-3设计LINC01224 shRNA。与对照组(sh-NC组)相比,稳定干扰LINC01224组(sh-LINC01224组)LoVo和SW620细胞内LINC01224的表达水平降低(P<0.01),其细胞生长速度减慢(P<0.01),凋亡率也增加(P<0.01)。结论 成功构建LINC01224的shRNA慢病毒干扰载体,该载体能够稳定感染LoVo和SW620细胞,下调LINC01224表达并诱导细胞凋亡。 展开更多
关键词 结直肠癌 长链非编码RNA 慢病毒 凋亡
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A型核纤层蛋白与氧化应激和DNA损伤反应
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作者 周涛 赵炜 刘新光 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第8期849-855,共7页
核纤层蛋白是一种存在于真核细胞核膜下的中间丝纤维蛋白,是细胞核中重要的骨架蛋白,对维持细胞核的结构和功能具有重要作用。其基因突变会引起一系列的遗传性疾病,称为核纤层蛋白病。这些疾病在细胞水平表现出氧化应激和DNA损伤的特征... 核纤层蛋白是一种存在于真核细胞核膜下的中间丝纤维蛋白,是细胞核中重要的骨架蛋白,对维持细胞核的结构和功能具有重要作用。其基因突变会引起一系列的遗传性疾病,称为核纤层蛋白病。这些疾病在细胞水平表现出氧化应激和DNA损伤的特征,提示核纤层蛋白在氧化应激和DNA损伤反应中具有重要作用。本文主要就A型核纤层蛋白在氧化应激、DNA损伤反应中的作用机制进行综述。 展开更多
关键词 A型核纤层蛋白 氧化应激 DNA损伤反应
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