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白桦酯醇抗轮状病毒作用及机制
1
作者
杨思雁
袁月
+5 位作者
钱余培
易灏森
杨芷胭
徐文韬
赵文昌
宋丽军
《中国药理学与毒理学杂志》
CAS
北大核心
2024年第12期907-916,共10页
目的探讨白桦酯醇(BE)抗轮状病毒(RV)的作用及机制。方法①BE按0.03125~64μmol·L^(-1)浓度梯度处理MA104细胞72 h,MTT法检测细胞活力。②设细胞对照组、RV组和RV+BE组,采用细胞病变效应(CPE)法并结合MTT法检测BE抗RV病毒作用(干...
目的探讨白桦酯醇(BE)抗轮状病毒(RV)的作用及机制。方法①BE按0.03125~64μmol·L^(-1)浓度梯度处理MA104细胞72 h,MTT法检测细胞活力。②设细胞对照组、RV组和RV+BE组,采用细胞病变效应(CPE)法并结合MTT法检测BE抗RV病毒作用(干扰RV吸附、抑制RV生物合成和直接抑制RV)。③细胞分组同②,加药培养24 h后,实时荧光定量PCR、Western印迹法和免疫荧光法检测RV结构蛋白VP6的表达水平。④细胞分组同②,加药培养24 h后,ELISA试剂盒检测细胞上清液中促炎因子IL-6,IL^(-1)β和TNF-α及抗炎因子IL^(-1)0和Ⅱ型干扰素IFN-γ水平。⑤实验分组同②,加药培养24 h后,实时荧光定量PCR检测Toll样受体4(TLR4)、髓样分化因子88(MYD88)和TNF受体相关因子6(TRAF6)的mRNA表达水平;Western印迹法进一步检测MYD88和IκBα的蛋白表达水平和NF-κB p65的蛋白磷酸化水平。结果①与细胞对照组相比,BE在0.03125~1μmol·L^(-1)未出现明显细胞毒性,>1μmol·L^(-1)时细胞活力显著下降(P<0.01)。②与RV组相比,BE可抑制RV生物合成,0.0625~1μmol·L^(-1)的BE抗RV-Wa的抑制率>50%,EC50为0.0485μmol·L^(-1),治疗指数(TI)为119.48;0.25~1μmol·L^(-1)的BE抗RV-SA-11的抑制率>50%,EC50为0.1226μmol·L^(-1),TI值为47.27。而BE抗RV吸附和直接抑制RV的作用不明显。③与RV组相比,RV+BE组RV结构蛋白VP6的蛋白表达水平显著降低(P<0.01)。④与RV组相比,RV+BE组IL-6,IL^(-1)β和TNF-α的水平显著降低(P<0.01);IL^(-1)0和IFN-γ水平显著升高(P<0.01)。⑤与RV组相比,RV+BE组TLR4,MYD88和TRAF6的mRNA水平显著降低(P<0.01),MYD88蛋白表达水平显著降低(P<0.01),IκBα蛋白表达水平和NF-κB p65的蛋白磷酸化水平显著升高(P<0.01)。结论BE具有抗RV生物合成作用,并可能通过调控TLR4/MYD88/NF-κB信号通路降低了RV引起的炎症反应。
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关键词
轮状病毒
白桦酯醇
炎症反应
NF-ΚB信号通路
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职称材料
题名
白桦酯醇抗轮状病毒作用及机制
1
作者
杨思雁
袁月
钱余培
易灏森
杨芷胭
徐文韬
赵文昌
宋丽军
机构
广东
医科
大学
药学院
广东医科大学东莞市中药抗炎成分筛选与研究重点实验室
出处
《中国药理学与毒理学杂志》
CAS
北大核心
2024年第12期907-916,共10页
基金
国家自然科学基金(81973548)
广东医科大学学科建设项目(4SG23006G)
+1 种基金
广东省普通高校创新团队项目(2022KCXTD011)
湛江市科技计划项目(2021B01139)。
文摘
目的探讨白桦酯醇(BE)抗轮状病毒(RV)的作用及机制。方法①BE按0.03125~64μmol·L^(-1)浓度梯度处理MA104细胞72 h,MTT法检测细胞活力。②设细胞对照组、RV组和RV+BE组,采用细胞病变效应(CPE)法并结合MTT法检测BE抗RV病毒作用(干扰RV吸附、抑制RV生物合成和直接抑制RV)。③细胞分组同②,加药培养24 h后,实时荧光定量PCR、Western印迹法和免疫荧光法检测RV结构蛋白VP6的表达水平。④细胞分组同②,加药培养24 h后,ELISA试剂盒检测细胞上清液中促炎因子IL-6,IL^(-1)β和TNF-α及抗炎因子IL^(-1)0和Ⅱ型干扰素IFN-γ水平。⑤实验分组同②,加药培养24 h后,实时荧光定量PCR检测Toll样受体4(TLR4)、髓样分化因子88(MYD88)和TNF受体相关因子6(TRAF6)的mRNA表达水平;Western印迹法进一步检测MYD88和IκBα的蛋白表达水平和NF-κB p65的蛋白磷酸化水平。结果①与细胞对照组相比,BE在0.03125~1μmol·L^(-1)未出现明显细胞毒性,>1μmol·L^(-1)时细胞活力显著下降(P<0.01)。②与RV组相比,BE可抑制RV生物合成,0.0625~1μmol·L^(-1)的BE抗RV-Wa的抑制率>50%,EC50为0.0485μmol·L^(-1),治疗指数(TI)为119.48;0.25~1μmol·L^(-1)的BE抗RV-SA-11的抑制率>50%,EC50为0.1226μmol·L^(-1),TI值为47.27。而BE抗RV吸附和直接抑制RV的作用不明显。③与RV组相比,RV+BE组RV结构蛋白VP6的蛋白表达水平显著降低(P<0.01)。④与RV组相比,RV+BE组IL-6,IL^(-1)β和TNF-α的水平显著降低(P<0.01);IL^(-1)0和IFN-γ水平显著升高(P<0.01)。⑤与RV组相比,RV+BE组TLR4,MYD88和TRAF6的mRNA水平显著降低(P<0.01),MYD88蛋白表达水平显著降低(P<0.01),IκBα蛋白表达水平和NF-κB p65的蛋白磷酸化水平显著升高(P<0.01)。结论BE具有抗RV生物合成作用,并可能通过调控TLR4/MYD88/NF-κB信号通路降低了RV引起的炎症反应。
关键词
轮状病毒
白桦酯醇
炎症反应
NF-ΚB信号通路
Keywords
rotavirus
betulin
inflammatory response
NF-κB signaling pathway
分类号
R967 [医药卫生—药理学]
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1
白桦酯醇抗轮状病毒作用及机制
杨思雁
袁月
钱余培
易灏森
杨芷胭
徐文韬
赵文昌
宋丽军
《中国药理学与毒理学杂志》
CAS
北大核心
2024
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