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MNNG诱导TERC基因沉默的16HBE细胞恶性转化模型的建立
1
作者
朱俊峰
黄小荣
+1 位作者
冯宇鹏
周俊宜
《中国病理生理杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2012年第7期1326-1329,1334,共5页
目的:建立N-甲基-N'-硝基-N-亚硝基胍(N-methyl-N'-nitro-N-nitrosoguanidine,MNNG)诱导的人端粒酶RNA组分(telomerase RNA component,TERC)缺陷的人支气管上皮细胞株(16HBE)恶性转化细胞模型。方法:将靶向TERC基因的shRNA干扰...
目的:建立N-甲基-N'-硝基-N-亚硝基胍(N-methyl-N'-nitro-N-nitrosoguanidine,MNNG)诱导的人端粒酶RNA组分(telomerase RNA component,TERC)缺陷的人支气管上皮细胞株(16HBE)恶性转化细胞模型。方法:将靶向TERC基因的shRNA干扰质粒载体转染16HBE细胞,G418抗性克隆筛选得到稳定转染的16HBE-1细胞,RT-PCR检测16HBE-1细胞TERC mRNA的干扰效率;用1 mg/L MNNG对16HBE-1细胞进行隔代染毒,每次染毒1 h;直到染毒27次转化灶的出现。分离扩增转化灶细胞并命名为16HBE-T,用软琼脂克隆形成实验和裸鼠成瘤实验鉴定细胞的转化程度。结果:从转化灶分离培养的细胞能在软琼脂中生长,且转化细胞能在裸鼠体内成瘤,HE染色后光镜下显示为鳞癌。结论:成功建立MNNG诱导的TERC基因缺陷的16HBE细胞恶性转化模型。
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关键词
端粒酶RNA
人支气管上皮细胞
RNA干扰
N-甲基-N’-硝基-N-亚硝基胍
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题名
MNNG诱导TERC基因沉默的16HBE细胞恶性转化模型的建立
1
作者
朱俊峰
黄小荣
冯宇鹏
周俊宜
机构
中山大学中山
医学院
生物化学与分子生物学教研室
中山大学中山
医学院
实验教学中心
广东医学院附属西乡人民医院泌尿外科
出处
《中国病理生理杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2012年第7期1326-1329,1334,共5页
基金
广东省科技计划项目(No.2006B35502007
No.2010B031200013)
广东省自然科学基金重点项目(No.04105351)
文摘
目的:建立N-甲基-N'-硝基-N-亚硝基胍(N-methyl-N'-nitro-N-nitrosoguanidine,MNNG)诱导的人端粒酶RNA组分(telomerase RNA component,TERC)缺陷的人支气管上皮细胞株(16HBE)恶性转化细胞模型。方法:将靶向TERC基因的shRNA干扰质粒载体转染16HBE细胞,G418抗性克隆筛选得到稳定转染的16HBE-1细胞,RT-PCR检测16HBE-1细胞TERC mRNA的干扰效率;用1 mg/L MNNG对16HBE-1细胞进行隔代染毒,每次染毒1 h;直到染毒27次转化灶的出现。分离扩增转化灶细胞并命名为16HBE-T,用软琼脂克隆形成实验和裸鼠成瘤实验鉴定细胞的转化程度。结果:从转化灶分离培养的细胞能在软琼脂中生长,且转化细胞能在裸鼠体内成瘤,HE染色后光镜下显示为鳞癌。结论:成功建立MNNG诱导的TERC基因缺陷的16HBE细胞恶性转化模型。
关键词
端粒酶RNA
人支气管上皮细胞
RNA干扰
N-甲基-N’-硝基-N-亚硝基胍
Keywords
Telomerase RNA
Human bronchial epithelial cells
RNA interference
N - methyl - N＇ - nitro - N - nitrosognanidine
分类号
R363 [医药卫生—病理学]
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题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
MNNG诱导TERC基因沉默的16HBE细胞恶性转化模型的建立
朱俊峰
黄小荣
冯宇鹏
周俊宜
《中国病理生理杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2012
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