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人苯丙氨酸羟化酶基因克隆及其原核表达质粒的构建 被引量:3
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作者 张志 黄宗青 +6 位作者 沈琪 刘洪涛 邓英太 李爱东 周国强 汪华侨 何蕴韶 《中山大学学报(医学科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2007年第3期288-291,共4页
【目的】克隆健康人苯丙氨酸羟化酶基因全长cDNA序列,构建并鉴定其原核表达质粒pTrcHisB/PAH。【方法】采用RT-PCR方法从人肝组织中扩增PAH基因全长cDNA,T/A克隆到pMD18-T载体中,双酶切后将cDA亚克隆入pTrcHisB载体,构建pTrcHisB/PAH质... 【目的】克隆健康人苯丙氨酸羟化酶基因全长cDNA序列,构建并鉴定其原核表达质粒pTrcHisB/PAH。【方法】采用RT-PCR方法从人肝组织中扩增PAH基因全长cDNA,T/A克隆到pMD18-T载体中,双酶切后将cDA亚克隆入pTrcHisB载体,构建pTrcHisB/PAH质粒,经限制性内切酶鉴定并测序。【结果】人PAH基因cDNA正确克隆入pTrcHisB表达载体,与Genebank中PAH基因序列一致。【结论】成功构建pTrcHisB/PAH表达质粒,为进一步进行研究PAH蛋白表达和重组蛋白活性鉴定奠定基础。 展开更多
关键词 苯丙酮尿症 苯丙氨酸羟化酶 克隆 原核表达质粒
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