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人苯丙氨酸羟化酶基因克隆及其原核表达质粒的构建
被引量:
3
1
作者
张志
黄宗青
+6 位作者
沈琪
刘洪涛
邓英太
李爱东
周国强
汪华侨
何蕴韶
《中山大学学报(医学科学版)》
CAS
CSCD
北大核心
2007年第3期288-291,共4页
【目的】克隆健康人苯丙氨酸羟化酶基因全长cDNA序列,构建并鉴定其原核表达质粒pTrcHisB/PAH。【方法】采用RT-PCR方法从人肝组织中扩增PAH基因全长cDNA,T/A克隆到pMD18-T载体中,双酶切后将cDA亚克隆入pTrcHisB载体,构建pTrcHisB/PAH质...
【目的】克隆健康人苯丙氨酸羟化酶基因全长cDNA序列,构建并鉴定其原核表达质粒pTrcHisB/PAH。【方法】采用RT-PCR方法从人肝组织中扩增PAH基因全长cDNA,T/A克隆到pMD18-T载体中,双酶切后将cDA亚克隆入pTrcHisB载体,构建pTrcHisB/PAH质粒,经限制性内切酶鉴定并测序。【结果】人PAH基因cDNA正确克隆入pTrcHisB表达载体,与Genebank中PAH基因序列一致。【结论】成功构建pTrcHisB/PAH表达质粒,为进一步进行研究PAH蛋白表达和重组蛋白活性鉴定奠定基础。
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关键词
苯丙酮尿症
苯丙氨酸羟化酶
克隆
原核表达质粒
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职称材料
题名
人苯丙氨酸羟化酶基因克隆及其原核表达质粒的构建
被引量:
3
1
作者
张志
黄宗青
沈琪
刘洪涛
邓英太
李爱东
周国强
汪华侨
何蕴韶
机构
广东医学院附属深圳第四人民医院神经内科
中山大学中山
医学院
人体解剖学教研室脑研究室
中山大学达安基因诊断中心
出处
《中山大学学报(医学科学版)》
CAS
CSCD
北大核心
2007年第3期288-291,共4页
基金
国家重点基础研究发展计划(973计划)项目(2006cb500700)
文摘
【目的】克隆健康人苯丙氨酸羟化酶基因全长cDNA序列,构建并鉴定其原核表达质粒pTrcHisB/PAH。【方法】采用RT-PCR方法从人肝组织中扩增PAH基因全长cDNA,T/A克隆到pMD18-T载体中,双酶切后将cDA亚克隆入pTrcHisB载体,构建pTrcHisB/PAH质粒,经限制性内切酶鉴定并测序。【结果】人PAH基因cDNA正确克隆入pTrcHisB表达载体,与Genebank中PAH基因序列一致。【结论】成功构建pTrcHisB/PAH表达质粒,为进一步进行研究PAH蛋白表达和重组蛋白活性鉴定奠定基础。
关键词
苯丙酮尿症
苯丙氨酸羟化酶
克隆
原核表达质粒
Keywords
phenylketonuria
phenylalanine hydroxylase
clone
prokaryotic expression plasmid
分类号
R479.1 [医药卫生—护理学]
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题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
人苯丙氨酸羟化酶基因克隆及其原核表达质粒的构建
张志
黄宗青
沈琪
刘洪涛
邓英太
李爱东
周国强
汪华侨
何蕴韶
《中山大学学报(医学科学版)》
CAS
CSCD
北大核心
2007
3
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