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siRNA沉默Twist基因对鼻咽癌细胞CNE-2增殖的影响
被引量：
1
1
作者
司秀文
梁统
周克元
《中国药理学通报》
CAS
CSCD
北大核心
2012年第10期1423-1427,共5页
目的探讨RNA干扰沉默Twist基因对人鼻咽癌细胞株CNE-2的迁移、侵袭和增殖等生物学活性的影响。方法构建Twist-shRNA表达载体,脂质体法将重组质粒分别转染入鼻咽癌细胞株CNE-2中,RT-PCR法检测Twist mRNA、Western blot法检测Twist蛋白表...
目的探讨RNA干扰沉默Twist基因对人鼻咽癌细胞株CNE-2的迁移、侵袭和增殖等生物学活性的影响。方法构建Twist-shRNA表达载体,脂质体法将重组质粒分别转染入鼻咽癌细胞株CNE-2中,RT-PCR法检测Twist mRNA、Western blot法检测Twist蛋白表达量的变化。MTT法检测细胞的增殖,细胞创伤愈合试验观察细胞迁移能力,Tran-swell小室试验检测细胞侵袭能力的变化。结果沉默Twist基因可减慢CNE-2细胞生长速度(与对照组比较P<0.05),降低CNE-2细胞的迁移速度,抑制CNE-2的体外侵袭能力。结论靶向封闭Twist基因的表达,可明显抑制CNE-2细胞的增殖、迁移及侵袭能力,提示Twist可作为鼻咽癌防治的一个新的靶点。
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关键词
RNA干扰
TWIST
鼻咽癌
增殖
迁移
侵袭
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职称材料
IGF-1通过BTEB调控CYPs途径保护心肌细胞免于凋亡
被引量：
1
2
作者
张剑凯
丁碧蓝
+2 位作者
许晓玲
李涛
吴柱国
《中国临床解剖学杂志》
CSCD
北大核心
2015年第1期64-71,共8页
目的探讨胰岛素样生长因子1对大鼠心肌细胞凋亡保护作用的基因调控机制。方法体外培养新生大鼠心肌细胞,通过RT-PCR及Werstern-blot观察IGF-1调节BTEB及其下游细胞色素C家族成员CYP1A1、2E1、3A11和11A1的基因表达情况。过氧化氢处理诱...
目的探讨胰岛素样生长因子1对大鼠心肌细胞凋亡保护作用的基因调控机制。方法体外培养新生大鼠心肌细胞,通过RT-PCR及Werstern-blot观察IGF-1调节BTEB及其下游细胞色素C家族成员CYP1A1、2E1、3A11和11A1的基因表达情况。过氧化氢处理诱导心肌细胞凋亡,通过Annexin VFITC/PI双染色法、Caspase 3活性测定、Hoechest33258染色法和Tunel法观察下调CYPs的基因表达对心肌细胞凋亡的影响;JC-1线粒体膜电位检测法和透射电镜观察心肌细胞线粒体膜电位和形态的改变。结果大鼠心肌细胞经IGF-1刺激60 min后,BTEB m RNA和蛋白表达均明显下降;IGF-1刺激48 h后,CYP1A1、2E1、3A11和11A1的m RNA和蛋白表达均明显下降(均P<0.01);用BTEB特异性的si RNA人为下调BTEB基因表达后,CYP1A1、3A1 m RNA和蛋白表达明显下降(均P<0.01),CYP2E1、11A1 m RNA和蛋白表达变化不明显。与对照组相比,H2O2诱导的大鼠心肌细胞用CYP1A1、2E1、3A11和11A1特异性的si RNA人为下调上述基因表达后,Annexin V-FITC/PI双染法显示心肌细胞凋亡率下降(均P<0.05)、Caspase 3活性测定显示酶活性降低(均P<0.05)、Hoechest33258染色和Tunel法检测结果显示凋亡小体和凋亡细胞数目减少,与IGF-1的抗心肌细胞凋亡效果相似;且细胞线粒体膜电位下降率明显降低(均P<0.05),线粒体形态明显改善。结论 IGF-1可以通过下调细胞色素C家族成员CYP1A1、2E1、3A11和11A1的表达改善线粒体功能,其中CYP1A1、3A11受BTEB调控途径发挥抗心肌细胞凋亡作用。
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关键词
心肌细胞
凋亡
基本转录元件结合蛋(BTEB)
细胞色素C
胰岛素样生长因子
I(IGF-1
)
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职称材料
题名
siRNA沉默Twist基因对鼻咽癌细胞CNE-2增殖的影响
被引量：
1
1
作者
司秀文
梁统
周克元
机构
广东医学院广东省医学诊断分子重点实验室
滨州
医学院
附属医院检验科
广东医学院
检验
医学
研究所
出处
《中国药理学通报》
CAS
CSCD
北大核心
2012年第10期1423-1427,共5页
基金
广东省社会发展领域科技计划项目(No 53025)
东莞市科技计划项目(No 201010815212)
文摘
目的探讨RNA干扰沉默Twist基因对人鼻咽癌细胞株CNE-2的迁移、侵袭和增殖等生物学活性的影响。方法构建Twist-shRNA表达载体,脂质体法将重组质粒分别转染入鼻咽癌细胞株CNE-2中,RT-PCR法检测Twist mRNA、Western blot法检测Twist蛋白表达量的变化。MTT法检测细胞的增殖,细胞创伤愈合试验观察细胞迁移能力,Tran-swell小室试验检测细胞侵袭能力的变化。结果沉默Twist基因可减慢CNE-2细胞生长速度(与对照组比较P<0.05),降低CNE-2细胞的迁移速度,抑制CNE-2的体外侵袭能力。结论靶向封闭Twist基因的表达,可明显抑制CNE-2细胞的增殖、迁移及侵袭能力,提示Twist可作为鼻咽癌防治的一个新的靶点。
关键词
RNA干扰
TWIST
鼻咽癌
增殖
迁移
侵袭
Keywords
RNAi
Twist
nasopharyngeal carcinoma
proliferation
migration
invasion
分类号
R739.63 [医药卫生—肿瘤]
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职称材料
题名
IGF-1通过BTEB调控CYPs途径保护心肌细胞免于凋亡
被引量：
1
2
作者
张剑凯
丁碧蓝
许晓玲
李涛
吴柱国
机构
广东医学院
基础
医学院
人体解剖学教研室
广东医学院
研究生
学院
广东医学院
广东省
医学
分子
诊断
重点
实验室
广东医学院
第二临床
学院
出处
《中国临床解剖学杂志》
CSCD
北大核心
2015年第1期64-71,共8页
基金
广东省自然科学基金(No.S2013010011763)
广东省科技计划项目(No.2011B031600007
No.2013B021800066)
文摘
目的探讨胰岛素样生长因子1对大鼠心肌细胞凋亡保护作用的基因调控机制。方法体外培养新生大鼠心肌细胞,通过RT-PCR及Werstern-blot观察IGF-1调节BTEB及其下游细胞色素C家族成员CYP1A1、2E1、3A11和11A1的基因表达情况。过氧化氢处理诱导心肌细胞凋亡,通过Annexin VFITC/PI双染色法、Caspase 3活性测定、Hoechest33258染色法和Tunel法观察下调CYPs的基因表达对心肌细胞凋亡的影响;JC-1线粒体膜电位检测法和透射电镜观察心肌细胞线粒体膜电位和形态的改变。结果大鼠心肌细胞经IGF-1刺激60 min后,BTEB m RNA和蛋白表达均明显下降;IGF-1刺激48 h后,CYP1A1、2E1、3A11和11A1的m RNA和蛋白表达均明显下降(均P<0.01);用BTEB特异性的si RNA人为下调BTEB基因表达后,CYP1A1、3A1 m RNA和蛋白表达明显下降(均P<0.01),CYP2E1、11A1 m RNA和蛋白表达变化不明显。与对照组相比,H2O2诱导的大鼠心肌细胞用CYP1A1、2E1、3A11和11A1特异性的si RNA人为下调上述基因表达后,Annexin V-FITC/PI双染法显示心肌细胞凋亡率下降(均P<0.05)、Caspase 3活性测定显示酶活性降低(均P<0.05)、Hoechest33258染色和Tunel法检测结果显示凋亡小体和凋亡细胞数目减少,与IGF-1的抗心肌细胞凋亡效果相似;且细胞线粒体膜电位下降率明显降低(均P<0.05),线粒体形态明显改善。结论 IGF-1可以通过下调细胞色素C家族成员CYP1A1、2E1、3A11和11A1的表达改善线粒体功能,其中CYP1A1、3A11受BTEB调控途径发挥抗心肌细胞凋亡作用。
关键词
心肌细胞
凋亡
基本转录元件结合蛋(BTEB)
细胞色素C
胰岛素样生长因子
I(IGF-1
)
Keywords
Cardiomyocytes
Apoptosis
Basic transcription element binding protein （BTEB）
Cytochromes P450（CYPs）
Insulin-like growth factor-1 （IGF-1）
分类号
R329.26 [医药卫生—人体解剖和组织胚胎学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
siRNA沉默Twist基因对鼻咽癌细胞CNE-2增殖的影响
司秀文
梁统
周克元
《中国药理学通报》
CAS
CSCD
北大核心
2012
1
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
IGF-1通过BTEB调控CYPs途径保护心肌细胞免于凋亡
张剑凯
丁碧蓝
许晓玲
李涛
吴柱国
《中国临床解剖学杂志》
CSCD
北大核心
2015
1
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