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家蝇幼虫脂肪体cDNA文库的构建及初步鉴定 被引量:17
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作者 金小宝 王婷婷 朱家勇 《中国人兽共患病杂志》 CSCD 北大核心 2005年第1期52-55,共4页
目的 构建家蝇幼虫cDNA文库。方法 以大肠杆菌和金黄色葡萄球菌免疫诱导 2 4h后的家蝇三龄幼虫为实验材料 ,从其脂肪体中提取总RNA ,运用SMART(switchingmechanismat 5 ,endofmRNAtranscript)技术构建家蝇幼虫cDNA文库。结果 初步测... 目的 构建家蝇幼虫cDNA文库。方法 以大肠杆菌和金黄色葡萄球菌免疫诱导 2 4h后的家蝇三龄幼虫为实验材料 ,从其脂肪体中提取总RNA ,运用SMART(switchingmechanismat 5 ,endofmRNAtranscript)技术构建家蝇幼虫cDNA文库。结果 初步测定 ,原始文库的滴度为 1.34× 10 6pfu/ml,原始文库重组率为 98.9% ,文库扩增后滴度达 2 .4 0 8× 10 9pfu/ml。从扩增文库随机挑取 12个克隆进行PCR扩增鉴定 ,结果显示所选的 12个噬菌体克隆均含有重组的cDNA ,插入片段大小为 4 0 0bp~ 15 0 0bp之间。结论成功构建了家蝇幼虫cDNA文库。 展开更多
关键词 家蝇 CDNA文库 SMART技术 构建
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