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羧基末端结合蛋白CtBP2与泛素结合酶UBE2Ⅰ的相互作用
被引量：
1
1
作者
叶晓霞
石彦
+2 位作者
霍克克
陈东
吴民华
《第三军医大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2011年第17期1783-1788,共6页
目的筛选并确定人羧基末端结合蛋白CtBP2的相互作用蛋白。方法用酵母双杂交技术,以人CtBP2为诱饵蛋白筛选人肝cDNA文库,获得与之相互作用的候选蛋白,采用酵母共转化和细胞免疫共沉淀实验确认相互作用的特异性,最后利用荧光蛋白融合表达...
目的筛选并确定人羧基末端结合蛋白CtBP2的相互作用蛋白。方法用酵母双杂交技术,以人CtBP2为诱饵蛋白筛选人肝cDNA文库,获得与之相互作用的候选蛋白,采用酵母共转化和细胞免疫共沉淀实验确认相互作用的特异性,最后利用荧光蛋白融合表达技术和荧光显微镜观察确认CtBP2与其相互作用蛋白的亚细胞共定位情况。结果酵母双杂交筛选获得了41个与Bd-CtBP2相互作用的阳性克隆,编码10个不同的蛋白,其中有4个克隆编码泛素结合酶UBE2Ⅰ的不同片段。从人肝cDNA文库中扩增获得UBE2Ⅰ的全长编码序列,酵母共转化和细胞免疫共沉淀实验证实CtBP2与UBE2Ⅰ能够特异性结合。亚细胞定位研究表明GFP-CtBP2弥散分布于细胞核,DsRed-UBE2Ⅰ不均匀分布于细胞核,有部分点状聚集。两者共转染时能够呈点状共定位于细胞核。结论人CtBP2能够在细胞核内与UBE2Ⅰ特异性相互作用,是UBE2Ⅰ的靶蛋白。
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关键词
羧基末端结合蛋白
酵母双杂交
泛素结合酶UBE2Ⅰ
免疫共沉淀
亚细胞共定位
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题名
羧基末端结合蛋白CtBP2与泛素结合酶UBE2Ⅰ的相互作用
被引量：
1
1
作者
叶晓霞
石彦
霍克克
陈东
吴民华
机构
广东医学院基础医学院组织学与胚胎学教研室
复旦大学生命科
学院
遗传研究所
出处
《第三军医大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2011年第17期1783-1788,共6页
基金
广东省卫生厅医学科研基金(B2009192)
广东医学院科研基金(B2009010)~~
文摘
目的筛选并确定人羧基末端结合蛋白CtBP2的相互作用蛋白。方法用酵母双杂交技术,以人CtBP2为诱饵蛋白筛选人肝cDNA文库,获得与之相互作用的候选蛋白,采用酵母共转化和细胞免疫共沉淀实验确认相互作用的特异性,最后利用荧光蛋白融合表达技术和荧光显微镜观察确认CtBP2与其相互作用蛋白的亚细胞共定位情况。结果酵母双杂交筛选获得了41个与Bd-CtBP2相互作用的阳性克隆,编码10个不同的蛋白,其中有4个克隆编码泛素结合酶UBE2Ⅰ的不同片段。从人肝cDNA文库中扩增获得UBE2Ⅰ的全长编码序列,酵母共转化和细胞免疫共沉淀实验证实CtBP2与UBE2Ⅰ能够特异性结合。亚细胞定位研究表明GFP-CtBP2弥散分布于细胞核,DsRed-UBE2Ⅰ不均匀分布于细胞核,有部分点状聚集。两者共转染时能够呈点状共定位于细胞核。结论人CtBP2能够在细胞核内与UBE2Ⅰ特异性相互作用,是UBE2Ⅰ的靶蛋白。
关键词
羧基末端结合蛋白
酵母双杂交
泛素结合酶UBE2Ⅰ
免疫共沉淀
亚细胞共定位
Keywords
human C-terminal binding protein 2
yeast two-hybrid
ubiquitin-conjugating enzyme E2Ⅰ
co-immunoprecipitation
subcellular co-localization
分类号
R394.33 [医药卫生—医学遗传学]
R394.3 [医药卫生—医学遗传学]
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作者
出处
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被引量
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1
羧基末端结合蛋白CtBP2与泛素结合酶UBE2Ⅰ的相互作用
叶晓霞
石彦
霍克克
陈东
吴民华
《第三军医大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2011
1
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